4-甲基umb蛋白蛋白-β-D-葡糖(MUG)试验

MUG试验的目标

识别各种肠杆菌痤疮和蛋白酶产生的生成大肠杆菌。

MUG试验原理

β-D-葡糖醛酸酶是大多数菌株产生的酶大肠杆菌和其他肠杆菌菌,其将β-D-吡喃葡萄糖 - 尿素衍生物水解给乙炔和D-葡糖醛酸。底物4-甲基蛋白酶β-D-葡糖醛酮烷基浸渍在盘中。MUG是4-甲基蛋糖-D-β-D-葡糖醛酸,β-葡糖醛酸酶的荧光底物的首字母缩略词。能够产生β-D-葡糖醛酸酶酶的生物体具有能够切割底物4-甲基纤维素 - β-D-葡糖醛酸酯,从而产生荧光部分4-甲基晶(4-MU)。水解的最终产物,4-甲基umb蛋糖(4-mu),在长波长紫外光下荧光蓝色。但是,术毒素产生菌株大肠杆菌不要产生杯子,阴性测试结果可能表明存在临床上重要的菌株。在低(1.97-6.72)和高(7.12-10.3)pH下,4-mu荧光依赖于320和360nm的激发最大值。

MUG测试程序

直接磁盘测试

  1. 将杯子盘放入空旷的培养皿中,并添加一滴脱矿水。
  2. 从18-24小时的磁盘上涂抹2-3孤立的殖民地。
  3. 将一块滤纸饱和,用水盖盖在培养皿的盖子中以提供潮湿的环境。
  4. 在35°-37℃下孵育至多30分钟。
  5. 孵育后,在黑暗的房间中使用长波紫外线(360nm)检查荧光的磁盘。

管试验

  1. 将0.25ml脱矿物水加入干净的玻璃管。
  2. 用3-4个测试分离物中的3-4个菌落在管中进行重悬浮液。
  3. 使用Forcep,将杯子盘放入管中并剧烈摇动以确保在周围液体中充分洗脱基板。
  4. 在35°-37℃下孵育至多1小时。
  5. 孵育后,在黑暗的房间中使用长波紫外线(360nm)检查荧光的磁盘。

结果解释Mug测试

4-甲基umb蛋白蛋白-β-D-葡糖(MUG)试验

阳性测试:蓝色荧光

负面测试:没有荧光

MUG测试的局限性

  1. 该测试只是识别整体方案的一部分科利。优先识别需要进一步的生化和血清学测试。
  2. 大多数菌株科利0157:H7是杯子负面。使用大肠杆菌0157:H7乳胶凝集试验结合Mug试验,建议在爆发期间快速鉴定分离物。
  3. 一些菌株志贺丽杯子阳性。可能需要血清学测试来区分志贺丽科利
  4. 当使用含有染料(MAC)中分离的培养基中分离的测试菌落来报告假阴性反应,因此它可能使解释难。
  5. 除了以外的生物科利沙门氏菌,志贺氏菌,葡萄球菌,链球菌拥有酶β-葡糖醛酸酶,均为卤素阳性。仅测试乳糖阳性,β - 葡糖醛酸酶活性的克gr阴性棒有助于排除其他生物的误诊大肠杆菌

MUG试验质量控制

积极的:大肠杆菌(ATCC25922)

消极的:Klebsiella肺炎(ATC13883)

参考

  1. Tille下午2014.贝利和斯科特的诊断微生物学。十三个版本。Mosby,Inc。是elsevier Inc.3251 Riverport Lane的联盟。圣路易斯。密苏里州63043
  2. Remel Mug磁盘。2010.1076 Santa Fe Drive,Lenexa,Ks 66215,USAhttps://assets.thermofisher.com/tfs-assets/lsg/manuals/ifu21135.pdf.

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