药敏试验(AST) - 类型和限制

在传染病的治疗和控制中,特别是当经常耐药性的病原体引起的,用于选择有效的抗微生物药物的敏感性(敏感性)测试。例如,当可以预测病原体的易感反应时,通常不指示易感性测试,例如:
-蛋白质物种通常耐含呋喃素和四环素,
-S. pyogenes通常易患青霉素,
-K.肺炎通常是氨苄青霉素的,
- 厌氧菌很容易受到甲硝唑。

绝不能对共生生物或污染物进行易感性测试,因为这会误导临床医生,并且可能导致患者接受无效和不必要的抗菌治疗,导致可能的副作用和对其他潜在的致病生物的抗性。

药敏试验技术

图:药敏试验(AST)步骤;来源:临床细菌学实验室的基本程序,世卫组织,第二版​​,2003

药敏试验技术

实验室药敏试验可施行:
- 甲稀释技术
- 一种盘扩散技术。

稀释药敏试验

手动或半自动稀释易感性试验在微生物学参考实验室用于流行病学目的而执行或当患者不响应治疗被认为是足够的,而复发被治疗,或者当存在免疫抑制。稀释技术测定最小抑制浓度(MIC)。它们也可以用于测量最小杀菌浓度(MBC),它是抗微生物杀死细菌所需要的最低浓度。甲稀释试验是通过将抗微生物的稀释到肉汤或琼脂培养基中进行。然后测试生物体的标准化接种物加入。隔夜培养后,将MIC报告为抗菌需要防止可见生长的最低浓度。通过比较在血清或其它体液获得的药物的已知浓度的MIC值,可能的临床反应进行评估。

光盘扩散药敏试验

纸片扩散技术使用的大多数实验室常规测试抗菌药物的敏感性。吸墨纸的圆盘浸渍有已知体积和抗微生物的适当的浓度,并且这被放置在敏感性试验琼脂均匀地与测试生物体接种的板。从盘到培养基中并测试生物体的生长的抗微生物扩散在从涉及(除其它因素外)到生物体的易感性的盘的距离被抑制。菌株易患所述抗微生物在从盘的距离被抑制,而耐药菌株具有抑制的更小的区域或长大于盘的边缘。对于临床和监视的目的,促进结果的实验​​室之间重现性和可比性,WHO推荐的(NCCLS)改性纸片盘扩散技术。

抗微生物易感性测试(AST)

纸片NCCLS改性盘扩散技术

这种仔细标准化技术的有效性取决于每个定义的物种,使用正确的抗微生物含量的光盘,其含有融合的生长,以及可靠的穆勒亨酮琼脂。必须完全按照每个细节遵循测试方法。在35℃温育16-18小时后,使用NCCLS标准测量和解释区域尺寸。这些来自于区域尺寸和麦克风之间存在的相关性。NCCLS Kirby-Bauer技术应该仅用于评估的细菌种类。它不适合缓慢增长的细菌,需要特殊的营养,或需要CO2或厌氧孵育。

斯托克斯纸片扩散法

在此光盘技术中,无论是测试和对照生物体接种在同一板上。测试生物体的区域的大小直接与对照进行比较。此方法不是为高度标准化为纸片技术和在实验室中特别是当抗微生物在盘中的确切量不能保证由于获得盘和正确地将它们存储或困难时使用所需的卡比的其他条件-Bauer技术不能得到满足。一种方式进行实验室斯托克斯技术可以改变向媲美的技术世界卫生组织推荐的纸片技术是使用非常稳定罗斯科Diagnostica公司抗生素片剂(NEO-Sensitabs),而不是不太稳定的纸片。

抗微生物易感性测试的局限性

敏感性试验衡量在实验室条件下的细菌的抗微生物活性(体外活性),而不是在患者(体内活性)。它不能被假定因此,该抗微生物杀死或防止生物体从体外生长将是成功的治疗。

选择适当的抗菌治疗还涉及考虑患者的临床病症,任何潜在的条件(例如肝脏或肾脏疾病),感染的类型和部位,患者的任何药物过敏的历史,患者的年龄和患者是否怀孕。还有必要了解不同药物的活性,包括它们的吸收率,组织中的扩散,代谢,排泄,以及对患者正常微生物菌群的可能毒性和影响。还需要考虑药物的成本和可用性。

8关于“抗微生物易感性测试(AST) - 类型和限制”的思考

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