杆菌肽药敏试验-原理，程序，结果，用途

什么是双硝酸锰敏感性测试？

Bacitracin易感性测试是用于鉴定来自其他β-溶血性链球菌的链球菌的抗微生物盘试验之一。

• 抗菌药敏试验主要是为了区分一个特定属的不同种。
• 抗菌片用于确定细菌对特定抗生素的敏感性。
• 杆菌肽是一种用于治疗浅表皮肤感染的杀菌药物，很少用于全身注射。
• 脱赤素是从中获得的枯草芽孢杆菌作为一种多肽抗生素。它会干扰细菌中肽聚糖的产生，从而抑制细菌的生长。
• 它阻断了在细胞膜穿过细胞膜的Nam和Nag糖来阻断双乳糖醇，从而抑制肽聚糖的进一步合成。
• 杆菌肽能抑制A族β-溶血性链球菌的生长，而其他β-溶血性链球菌则不能。这有助于区分这两组生物。
• Bacitracin磁盘主要用于链球菌Pyogenes因为它抑制了生物体的生长。
• 杆菌肽产生约12mm的抑制区S. pyogenes，然后在对抗其他生物组的同时用作阳性控制。

双硝酸锰易感性测试的目标

• 分化β-溶血链球菌（主要是S. pyogenes）来自其他β-溶血链球菌。
• 观察不同微生物对杆菌肽的药敏情况。

双硝酸锰敏感性测试原理

• 血液琼脂对β-溶血链球菌的生长受到嗜酸叶片的0.04单位的血糖素。
• MicroCocci和链球菌也抑制0.04个单位盘，而所有凝结酶阴性葡萄球菌都是抗性的。
• Bacitracin易感性测试盘是滤纸纸盘，浸渍0.04单位的甲硝丁。然后将浸渍的盘放入琼脂上，其中允许抗微生物通过介质扩散并抑制生物体的生长。
• 在围绕盘周围观察到的抑制区孵育后评估测试结果。
• 如果观察到微生物的生长达到圆盘的边缘，则认为是耐药的，而圆盘周围的圆形区域代表抑制和易感性。
• 如果在血清学分组之前用作筛选试验，则Bacitracin圆盘可以节省大量时间，劳动力和材料。
• 已观察到A组链球菌对杆菌肽的敏感性高于其他组的-溶血菌株。
• 因此通过抗微生物磁盘杆菌肽敏感性试验被建议作为A组链球菌快速诊断试剂。

微生物测试

• 杆菌肽药敏试验用于对青霉素敏感或革兰氏阳性球菌的“粘性”菌落，这些菌落在侵袭部位标本中是过氧化氢酶阳性和凝固酶阴性的，用于分离葡萄球菌和微球菌。
• 柠檬黄色菌落未被视为被认为是单体．

使用的媒体，试剂和用品

媒体

• 血琼脂或
• 穆勒辛顿琼脂

用品

• 杆菌肽0.04 u盘
• 拭子
• 无菌镊子
• 接种肉汤

杆菌肽药敏试验程序

使用两种不同的营养培养基，两种不同的程序可用于双硝酸酯易感性试验。该测试可以通过通过传代培养或直接从临床样品获得的生物体的纯培养物进行。下面给出了两种不同的双硝基菌素易感测试方法的程序：

使用血琼脂平板的赫伯特法

1. 0.1麦克法兰悬浮液从生物体的过夜培养制备的生物体中。
2. 应接种血琼脂板的不同部分，导致草坪培养。应在一个特定方向上接种每个部分，接种面积应允许在每个盘之间分离10mm以放置在板上。
3. 干燥约10分钟后，用无菌钳子将圆盘置于琼脂上。然后用无菌棒轻敲圆盘以确保粘附。
4. 然后将板在35-37℃下孵育24小时。
5. 孵育后，观察和测量抑制区。进一步的确认可通过血清学检测得到。

Mueller Hinton琼脂法

1. Mueller hinton琼脂也可用于观察快速生物的易感性。
2. 从生物体过夜培养制备有机体的0.5 McFarland悬浮液。
3. 然后用悬浮液用无菌拭子接种MHA板，形成琼脂上的细菌草坪。
4. 干燥约10分钟后，用无菌钳子将抗生素片放置在琼脂片上，使片与片之间保持约10毫米的距离。
5. 磁盘用无菌棒敲击以确保盘粘附到板上。
6. 然后将倒置板在35-37℃温育24小时。
7. 对抑制带进行了观察和测量。进一步的确认可通过血清学检测得到。

结果杆菌肽药敏试验结果

图像来源：贝利和斯科特的诊断微生物学。爱思唯尔。

抑制区	媒体	结果
6毫米或更少	血琼脂或穆勒亨龙琼脂	抵抗的
大于10毫米		易受影响的
在6毫米和10毫米之间		试验将重复进行，因为它表明可能的敏感性。

使用Bacitracin易感性测试

• 杆菌肽敏感性试验主要用于组A的β溶血性链球菌的从其它β溶血性链球菌的分化。
• 它还可以用于观察不同生物对苯匹匹汀的抗生素易感性的模式。
• 自从绝大多数以来，双硝酸辛蛋白的分化也可用于青霉素易感菌株单体，和罗思氏菌属微生物对青霉素敏感，而大多数凝固酶阴性葡萄球菌不敏感。

双硝酸锰敏感性测试的局限性

• 由于抗生素对这种琼脂的扩散而减少，已经干燥的旧血琼脂平板不应用于易感性测试，这可能导致假阴性结果。
• 不同浓度的杆菌肽可以观察到不同的抑菌带大小;因此，应使用差速盘(0.04 U)而不是灵敏度盘(10u)。
• 光接种物可能导致抑制的假区域，因此应使用充分的接种物，得到汇合生长。
• 为进一步确认，应进行血清学检测，如乳胶凝集试验，以获得准确的确认。
• 葡萄球菌在BAP上的杆菌肽0.04-U盘周围无抑制带。对于大于7 mm但小于10 mm断点的尺寸，可以得到抑制带单体如果培养不完全24小时或使用MH琼脂。

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