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Brightfield显微镜定义
明菲尔德显微镜也被称为化合物光显微镜.这是一种光学显微镜,它利用光线在明亮的背景上产生暗影。它是在生物学,细胞生物学和微生物实验室研究中使用的标准显微镜。
该显微镜用于观察固定的和活的标本,这些标本已经用基本的染色剂染色,使图像和图像背景形成对比。它是特别设计的,与被称为透镜的放大镜一起,可以修改标本,以产生通过目镜看到的图像。
布莱特菲尔德显微镜原理
对于作为焦点并在明亮田显微镜下产生图像的标本,样品必须通过均匀的照明光束。通过微分吸收和差分折射,显微镜将产生对比图像。
使用的样品首先通过染色来制备,以引入用于易于收缩表征的颜色。彩色样品将具有折射率,其将与周围的围绕区分,呈现吸收和折射率的组合。
显微镜的功能基于其从充分提供的光源生产高分辨率图像的能力,其聚焦在图像上,产生高质量的图像。
将标本放在显微镜载玻片上,在油浸或/和盖玻片下观察。
布莱特菲尔德显微镜部分
图:Brightfield显微镜(复合光学显微镜)零件。图像创建使用biorender.com
明菲尔德显微镜由各个部件组成,包括
- 目镜(接目镜)- 它在显微镜的顶部有两个目镜透镜,其将图像聚焦到物镜。这是您看到所形成的图像的位置,用眼睛。
- 物镜由六个或更多个玻璃透镜组成,这使得从标本或正在聚焦的物体上清除清晰的图像。
- 两个聚焦旋钮即,微调旋钮和粗调的旋钮,在显微镜的臂上找到,可以移动舞台或骗局仪以聚焦在图像上。它们的功能是为了确保以清晰度的敏锐的形象的生产。
- 在舞台上就在目标的下面,这是放置标本的地方,允许标本周围的移动,以更好地观察灵活的旋钮,这是光线聚焦的地方。
- 冷凝器例它安装在舞台下面,舞台将一束光聚焦在标本上。它可以是固定的,也可以是移动的,以调节光线的质量,但这完全取决于显微镜。
- 手臂:这是显微镜的坚固金属骨架,用于从一个地方携带和移动显微镜。它们还握住显微镜基地这是显微镜的支架。臂和底座保持所有微观部件。
- 它有一个光照明或者一个镜子在底座或显微镜的鼻梁架上发现。
- 这骗子有两到五个不同放大率的物镜。它可以移动到任何位置,取决于物镜聚焦的图像。
- 光圈(对比度):它控制通过冷凝器的光束的直径。当电容器几乎关闭时,光线到电容器的中心,产生高对比度,当冷凝器广泛打开时,图像非常明亮,对比度非常低。
Brightfield显微镜放大
- 物镜是在聚光镜上聚焦像的主透镜。这就产生了放大后的清晰图像,然后再由目镜放大,形成人眼所看到的原始图像。
- 在成像过程中,物镜保持近焦,即使物镜改变了,图像仍然保持聚焦。在目镜上看到的图像是标本放大后的清晰图像,称为虚像。
- 图像的放大率由对目镜透镜的放大率的目标放大来确定。目标具有40x-1000x的放大功率,具体取决于亮野显微镜的类型,而目镜镜片具有10倍的标准放大功率。
- 因此计算:
总放大率=物镜镜头的放大倍率X放大镜的倍率
- 例如:物镜的放大率为45倍,目镜的放大率为10倍,则标本的总放大率为450倍。
- 放大率是标准的,即不是过高的,也不太低,因此根据镜片的放大功率,它将在40倍和100ox之间。
- 物镜放大可以被观察的图像,称为分辨率的特征。根据Prescott的分辨率,是镜头分离或区分小物体在一起的小物体的能力。
- 目镜在观看结束时对图像进行放大,但其放大倍数低于物镜的8 -12倍(10倍标准)和物镜的40 -100倍,显微镜的放大倍数和分辨率高度依赖于物镜。
明菲尔德显微镜的应用
Brightfield显微镜应用于多个领域,从基础生物学到细胞生物学中了解细胞结构,微生物学,细菌学,寄生虫学中可视化寄生生物。
使用特殊染色来染色到染色的大部分标本以实现可视化。使用的一些染色技术包括负染色和革兰染色。
它的一些应用包括:
- 用于可视化和研究动物细胞
- 用来观察和研究植物细胞。
- 用于可视化和研究细菌细胞的形态
- 用来识别寄生原生动物,如草履虫。
Brightfield显微镜的优点
- 它是简单的使用与很少的调整,而查看图像。
- 它可用于查看染色和未染色。
- 显微镜的光学器件不会改变样品的颜色。
- 可以调节和修改显微镜以便更好地查看,例如安装相机,以形成数字显微镜,或者在图像照射的方式中,例如通过在样本上使用荧光料和在黑暗环境下观察,形成暗田显微镜。
缺点
- 孔径隔膜可能导致可能扭曲图像结果的相反的对比度,因此是虹膜膜片是优选的。
- 它不能用来查看活的标本,如细菌细胞。只有固定的标本才能在亮场显微镜下观察。
- 亮野显微镜的最大放大率为100倍,但修饰可以重新调整放大率至1000倍,这是细菌细胞的最佳放大倍数。
- 它具有低对比度,因此大多数样本必须染色,以便可视化。
- 使用油浸泡可能会扭曲图像
- 使用盖玻片可能会损坏样本
- 染色可能将外部不需要的细节引入样品中或污染样品。
- 在明菲尔德显微镜下可视化之前,染色样品是乏味的。
- 显微镜需要强光源来放大,有时光源会产生大量的热量,可能会损坏或杀死标本。
参考和源
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