目录
- 建议采用亮绿琼脂培养基作为初步培养基进行分离沙门氏菌物种。
- 它最初被描述为一种选择性分离培养基沙门氏菌物种Kristensen等.
- 考夫曼改进了他们的配方,提供了一种高度选择性的培养基,用于从粪便和其他病理物质以及食品和奶制品中分离和鉴定沙门氏菌。
- 辉煌的绿色琼脂应该与其他选择性电镀介质平行使用,例如脱氧胆酸盐酸酸琼脂,Hektoen肠琼脂,X.L.D。琼脂。特别推荐硫酸铋琼脂沙门氏菌伤寒。
辉煌的绿色琼脂的组成
成分 | Gms /升 |
蛋白胨 | 5.000 |
胰蛋白胨 | 5.000 |
酵母抽提物 | 3.000 |
乳糖 | 10.000 |
蔗糖 | 10.000 |
氯化钠 | 5.000 |
酚红 | 0.080 |
亮绿 | 0.0125 |
琼脂 | 20.000 |
最终pH(25°C):6.9±0.2
辉煌的绿色琼脂原理
- 蛋白胨,胰蛋白胨和酵母提取物的组合使中等高度营养和供应氨基酸和肽的长链。
- 氯化钠保持渗透平衡。
- 乳糖和蔗糖是可发酵的碳水化合物的来源。
- 酚红作为酸碱指示剂,使乳糖和或蔗糖发酵细菌呈黄色。
- 非乳糖发酵细菌在孵育的18-24小时内呈现白粉红色的红肠杆菌。
- 这种培养基还含有亮绿色,它抑制大多数革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌的生长。
- 沙门氏菌伤寒,志贺丽物种,大肠杆菌,普罗透斯物种,假单胞菌物种,金黄色葡萄球菌主要是抑制。
非乳糖/蔗糖发酵生物
Red-pink-white不透明有色琼脂中被亮红色区域包围的菌落——很可能是沙门氏菌(但不是伤寒沙门氏菌)。
普罗透斯和假单胞菌物种
它们可能以红色小菌落的形式生长。
乳糖/蔗糖发酵生物(通常抑制)
黄色到绿色黄色有色在琼脂中被强烈的黄绿色区域包围的菌落大肠杆菌要么克雷伯氏菌、肠杆菌属团体。
辉煌绿色琼脂的制备及使用方法
- 悬浮在1000ml纯化/蒸馏水中的58.09克。
- 热量沸腾以完全溶解培养基。
- 通过在15磅压力(121℃)的高压灭菌15分钟的灭菌15分钟。避免过热。
- 冷却至45 - 50°C。
- 充分混合后倒入无菌培养皿。
检查粪便或类似材料,用于鲑鱼:
- 严重接种一个辉煌的绿色琼脂板。同时,接种其他电镀培养基和硒肉汤管和四乙酸四阴离子肉汤。
- 在35°C下孵育辉煌的绿色琼脂板18-24小时。
- 检查培养皿并使用鉴别试验确定可疑菌落。
- 如果在原代平板培养中没有观察到非乳糖发酵剂,将富集培养物接种Brilliant Green Agar和其他培养基,然后按第3点进行。
检查食品
- 在75毫升缓冲蛋白水中预先富集四种25g等分试样的食物,并在35℃下孵育4-6小时。
- 在每个样品中加入75ml双倍浓度亚硒酸盐胱氨酸肉汤,43°C孵育24小时。
- 脱培养的辉煌绿色琼脂和硫酸铋琼脂。
- 35°C孵育,24小时后检查亮绿琼脂,48小时后检查亚硫酸盐铋琼脂。
- 寻找具有沙门氏菌特征的殖民地,并用生化和血清学测试确认他们的身份。
结果解释在辉煌的绿色琼脂上
生物 | 增长 |
Salmonella typhimurium. | 良好的增长;红色彩色殖民地 |
沙门氏菌Abony | 良好的增长;粉红色的白色 |
肠炎沙门氏菌 | 良好的增长;粉红色的白色 |
Salmonella Typhi. | 穷虚;红粉红色 |
金黄色葡萄球菌 | 抑制 |
大肠杆菌 | 抑制或不生长;黄绿 |
粪肠球菌 | 没有生长到光生长;略带黄色的菌落,有或没有黄色晕 |
使用亮绿琼脂
- 亮绿琼脂是一种具有选择性和差异的分离培养基沙门氏菌以外的物种年代。Typhi和美国甲型副伤寒从临床标本。
- 亮绿琼脂也被美国药典FDA推荐,符合美国药典。这种培养基用于检验临床标本。
- 由于这种培养基的优异选择性,重接种和重污染的样品可以被分析。
- 亮绿琼脂用于微生物限度检测,并与新生霉素一起用于食品和药品的检测。
辉煌的绿色琼脂的局限性
- 由于具有高度的选择性,建议该培养基应与抑制较少的培养基一起使用,以增加恢复的机会。经常培养丰富的亚硒酸盐或四亚硫酸肉汤被镀在辉煌的绿色琼脂与亚硫酸盐铋琼脂,SS琼脂,麦康基琼脂。
- 沙门氏菌伤寒和志贺丽物种可能不会在此媒体上生长。必须使用替代介质。
- 普罗透斯,枸橼酸杆菌属和假单胞菌物种可以通过产生小的红色菌落来模仿肠道病原体。
- 应对分离菌落进行生化和/或血清学试验,以完成鉴定。
参考
- http://himedialabs.com/td/mu016.pdf.
- http://www.oxoid.com/UK/blue/prod_detail/prod_detail.asp?pr=CM0263&org=124&c=UK&lang=EN
- https://www.bd.com/resource.aspx?idx=8964
- http://www.dalynn.com/dyn/ck_assets/files/tech/PB84.pdf
- http://bvascientific.com/customer/miscne/specpages/228530.pdf.
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