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Feeley等人在1978年开发了一种分离介质军团菌后来用酵母提取物代替酪蛋白水解物和牛肉提取物,用活性炭代替淀粉,命名为炭酵母提取物(CYE)琼脂。1980年,Pasculle等人通过添加ACES (n -2-乙酰氨基-2-氨基乙烷磺酸)缓冲液进行了进一步的改性,以保持最佳生长的适当pH值BCYE:缓冲木炭酵母提取物.1981年,Edelstein等人通过添加α -酮戊二酸钾盐进一步改进了培养基,提高了培养基的敏感性。推荐用于黄芪的栽培和初级分离军团菌在水和其他疑似有细菌的样本中。
BCYE琼脂组成
成分 | 通用汽车/ L |
酵母提取物 | 10.0通用 |
ace缓冲 | 10.0通用 |
活性炭 | 2.0通用 |
氢氧化钾 | 2.8通用 |
Alpha-Ketoglutarate | 1.0通用 |
半胱氨酸 | 0.4通用 |
焦磷酸铁 | 0.25通用 |
琼脂 | 12.0通用 |
最终pH值(25°C) 6.9±0.2
的原则BCYE琼脂
军团菌物种non-spore-forming一种狭窄的革兰氏阴性杆菌,可引起肺炎(军团病)或庞蒂亚克热。该细菌在传统培养基中不氧化或发酵碳水化合物,也不生长在羊血琼脂上。在缓冲木炭酵母提取物琼脂上生长更好,更快。BCYE培养基包括有助于细菌分离和生长的不同成分。氨基酸是军团菌的主要能量来源。l -胱氨酸在人体免疫系统中起着重要作用,是人体必需的氨基酸生长代谢军团菌.氨基酸和焦磷酸铁有助于生长军团菌.介质中含有木炭,这是一种解毒剂,活性炭分解过氧化氢,一种对人体有毒的代谢产物军团菌物种,也可能收集二氧化碳和修改表面张力。酵母提取物是维生素,氮和碳的丰富来源,以支持生长。ACES缓冲液保持最佳pH值,l -胱氨酸盐酸盐;焦磷酸铁和α-酮戊二酸酯对生长有促进作用军团菌活性氧酶刺激下的物种。琼脂是凝固剂。如有必要,可添加选择性试剂。
的制备BCYE琼脂
- 将20 gms悬浮于500 ml蒸馏水中。
- 加热至沸腾使介质完全溶解。
- 在15磅压力(121°C)高压灭菌15分钟,冷却到50°C。
- 无菌添加无菌复水的军团菌制剂各1瓶。
- 混合均匀,不断搅拌,以确保木炭颗粒均匀分布
结果解释BCYE琼脂
- 嗜肺性军团菌产生小的到大的,光滑的,无色的到苍白的,蓝灰色的,稍微粘液样的菌落,随着年龄的增长变得更白和更丝状,在长波紫外线下发出黄绿色荧光。
- 菌落表面通常光滑,边缘精确,但有些菌株在显微镜下可能会呈现磨砂玻璃或“煎蛋”外观。
缓冲木炭酵母提取物(BCYE)的使用琼脂
- 该介质是用于隔离和推定鉴定军团菌.
- 它是一种基本的介质,用于隔离军团菌来自临床和环境样本。
缓冲木炭酵母提取物(BCYE)的局限性琼脂
- 建议使用生化、免疫、分子或质谱分析对来自纯培养物的菌落进行测试,以便完全鉴定。
- 还建议使用一种以上的介质进行隔离军团菌非选择性和选择性BCYE琼脂平板平行接种。
- 由于营养变化,一些菌株可能会遇到生长不良或不能在这种培养基上生长。
- 美国疾病控制与预防中心(CDC)建议将环境样本与2.5%的CO孵育2;然而,l . gormanii是唯一已知的在这种条件下生长增强的物种。
- 殖民地的军团菌在白色滤膜上显影与在黑色或深色背景滤膜上显影可能会有不同的外观。
- 在处理军团菌物种,重要的是要避免气溶胶的形成。
参考文献
- Himedia
- 哈代的诊断
- Neogen
- Conda实验室
- Ronald M. Atlas和James W. Snyder(2014)。临床和公共卫生微生物学媒介手册。CRC出版社。Taylor & Francis集团有限责任公司
很丰富。