表的内容
什么是头孢氨苄琼脂试验?
溴棕三甲铵琼脂测试是进行的生物化学测试以识别或区分假单胞菌铜绿假单胞菌来自其他微生物。
- 测试工作原理在环晶的存在下生长生长的原则。
- 环纤维是一种有毒的季铵洗涤剂，除了少量生物之外，对大多数细菌有毒P。绿脓杆菌。
- 假单胞菌铜绿假单胞菌是通常与人类尿路感染和菌血症等感染有关的常见病原体。
- 在环晶体存在下有机体生存能力使得测试能够用于分化P。绿脓杆菌来自其他微生物。
- P.铜绿假单胞菌根据其产生的蓝色、水溶性、非荧光非嗪类色素pyocyanin的特性、氨基苯乙酮的葡萄样气味的特性和菌落形态进行了鉴定。
- P.铜绿假单胞菌是唯一的假单胞菌已知的一种或革兰氏阴性杆状菌，可排出脓青素，在本试验中检测到。
十四维琼脂试验的目标
- 识别和区分P。绿脓杆菌来自其他微生物。
- 检测不同生物在环环琼脂上生长的能力。
头孢咪胺琼脂检测原理
- Cetrimide是一种季铵盐，作为一种阳离子洗涤剂，对大多数细菌细胞是有毒的。
- Cetrimide降低了接触点的表面张力，导致沉淀剂，络合和变性作用于细菌膜蛋白。
- 在各种微生物中观察到抑制生长，包括除了以外的假单胞菌种类假单胞菌铜绿假单胞菌。
- 当环晶与细菌接触时，氮和磷从细菌细胞释放。
- 以外的生物P。绿脓杆菌还有一些其他的假单胞菌无法承受这种杀菌活性。
- 培养基中还含有明胶蛋白胨，提供必需的营养物质P。绿脓杆菌。
- 氯化钠保持介质的渗透平衡并防止在生长期间的培养基的pH变化。氯化镁和硫酸钾中的硫酸钾增强了碧粘素和百洛丁的生产（荧光素）P.铜绿假单胞菌。
微生物检测
非葡萄糖发酵的分离菌落，革兰氏阴性杆状菌，提示P。绿脓杆菌。
使用的介质，试剂和用品
中使用
- 头孢咪胺琼脂可以在商业上以脱水粉末的形式购买。如果有必要的培养基成分，也可以在实验室中制备。
- 以下是头孢菌胺琼脂的组成:
| S.N | 原料 | 克/升 |
| 1。 | 明胶胨 | 20.0 |
| 2。 | 氯化镁 | 1．4 |
| 3. | 硫酸钾 | 10.0 |
| 4. | 十字西米米 | 0．3 |
| 5。 | 琼那 | 15.0 |
| 最终pH在25°C：7.2±0.2 | ||
用品使用
- 无菌接种环或棍子
- 木材或UV光（360nm）或短波长（254-nm）紫外线
头孢咪胺琼脂检测程序
准备的媒体
- 在烧杯中，将46.7克脱水粉末或实验室制备的培养基加入1000毫升含有10毫升甘油的蒸馏水或去离子水中。
- 将培养基加热至沸腾以完全溶解培养基。
- 然后将煮沸的介质分配到管道中，并在15磅压力(121°C)的高压釜中灭菌15分钟。
- 如有必要，可将1瓶Nalidixic选择性补品(FD130)的再水化内容物无菌地添加到1000ml培养基中。
- 在高压灭菌后取出管，并在倾斜位置冷却至约40-45℃的温度。应以适当的角度保持该位置，以获得1.5-2.0cm深度的烟头。
溴棕三甲铵琼脂试验
- 从18-24小时的培养物中收集一个孤立的殖民地，用无菌接种针或环。
- 通过将倾斜的表面切割来接种环晶琼脂管。应来回倾斜，以确保与环路或接种棒的正当接种。
- 应放松试管盖，以确保足够的通气。
- 然后将管在35-37℃下孵育至多7天。
- 试管应连续4天每天检查，7天再次检查，然后将结果作为阴性丢弃。
质量控制
- 作为对头孢咪胍琼脂试验质量控制的一种形式，可将两种不同的生物作为阳性和阴性对照。
| 控制 | 孵化 | 结果 |
| P.铜绿假单胞菌 | 在33-37°C有氧孵育24-48小时。 | 十四维琼脂阳性（生长;黄绿色至蓝色颜料） |
| 大肠杆菌 | 在33-37°C有氧孵育24-48小时。 | 十四维琼脂负（没有增长） |
头孢菌胺琼脂检验结果与解释
图:溴棕三甲铵琼脂测试。图片来源:Bailey和斯科特的诊断微生物学。elewsvier。
- 增长证明了一个积极的结果。可以观察到黄绿色(荧光素)到深蓝绿色(花青苷)颜色。
- 对生长的抑制表明是负的结果。
报告结果
- 绿脓杆菌明确地确定如果氧化酶阳性，革兰氏阴性棒在环酰胺琼脂上生长，并产生蓝绿（盐粘蛋白）颜料。
- 假单胞菌荧光和假单胞菌putida也可以在这种培养基上生长并产生荧光色素，但从P。绿脓杆菌因为它们不会在42°C下成长。
使用环酰胺琼脂测试
- 环纤维琼脂测试用于选择性隔离假单胞菌铜绿假单胞菌从水和临床标本。
- 它也被用来检测有机体对头孢曲霉胺的耐受能力和在头孢曲霉胺琼脂上的生长。
环纤维琼脂试验的限制
- 仅在这种培养基上生长是不够的P。绿脓杆菌到物种水平，因为其他非葡萄糖发酵物种(例如，无色菌xylosoxidans无性系种群。xylosoxidans和粪产碱杆菌属）可能会增长。颜料也必须存在。
- 十四维琼脂缺乏生长并不排除鉴定P.铜绿假单胞菌。
- 环纤维琼脂是一种选择性培养基，因此，一些菌株可能表现出较差的生长，因为环晶质量剧毒。
引用和来源
- 生物化学检验鉴定有氧细菌。（2016）。临床微生物学程序手册，3.17.1.1-3.17.48.3。ch3.17.1 DOI: 10.1128/9781555818814.
- 7%,http://www.himedialabs.com/td/m024.pdf.
- 2％ - https://microbiologyinfo.com/cetrimide-test/
- 1％ - https://www.slideshare.net/sayantanmondal96/idtified- agacteria-35638850
- 1％ - https://www.sciencearirect.com/topics/medicine-and-dentry/achroomobacter - xylosoxidans
- 1%——https://orbitbiotech.com/pseudomonas-aeruginosa-isolation-and-identification/
- 1%——https://microbiologynotes.com/cetrimide-test-principle-procedure-result-interpretation-and-limitation/
- 1％ - https：//assets.thermofisher.com/tfs-assets/lsg/manuals/ifu1292.pdf
- <1％ - https://www.who.int/water_sanitation_health/resourcy/wqmchap10.pdf
- < 1%, https://www.techylib.com/en/view/mexicorubber/pathogenic_microbiology_college_of_computer_mathematical
- <1％ - https://www.cram.com/flashcards/non- fermentative-gram-negative-rods-1568966
- <1％ - https://wologicalindicators.mesalabs.com/wp-content/uploads/sites/31/2014/02/nunique-cyclessterileizing-liquid -load.pdf