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1984年,博尔顿等人。所述木炭可能有效地替代培养基中的血液以用于隔离弯曲杆菌SPP。Endtz等人。后来证实了更高隔离率弯曲杆菌使用时木炭选择性培养基。
木炭选择性培养基的组成
原料 | 总经理/L |
牛肉提取物 | 10.0G. |
明胶蛋白胨 | 10.0G. |
氯化钠 | 5.0g |
酪蛋白蛋白胨 | 3.0克 |
木炭 | 4.0g |
去氧胆酸钠 | 1.0g. |
硫酸亚铁 | 0.25克 |
丙酮酸钠 | 0.25克 |
环己酰亚胺 | 100.0mg. |
cefoperazone. | 32.0mg. |
血红素 | 32.0mg. |
万古霉素 | 20.0mg. |
琼那 | 12.0g |
pH 7.4±0.2(25°C)
木炭选择性培养基原理
培养基由提供氮的牛肉提取物组成,碳水化合物,生长所需的维生素和其他营养素弯曲杆菌. 明胶和酪蛋白蛋白胨以氨基酸和肽的形式提供营养。木炭、血红素、丙酮酸钠和硫酸亚铁提高了植物的耐气性弯曲杆菌物种;已经提出,这些补充剂作为光化学毒性氧衍生物的猝灭剂。木炭是一种解毒剂并减少氧气张力。氯化钠提供了保持渗透平衡的基本电解质,从而保持细胞的完整性。脱氧胆酸钠是一种抑制一些细菌的选择性培养基。头孢哌酮是头孢菌素抗生素抑制革兰氏阴性肠道杆菌和一些革兰氏阳性物种的生长。万古霉素是一种抑制许多革兰氏阳性细菌的糖肽抗生素。环己酰亚胺是一种抑制的抗真菌剂酵母和模具。
木炭选择性培养基的制备
- 将组分加入蒸馏水/去离子水中,并将体积带到1000毫升。
- 充分搅拌。轻轻加热并频繁搅拌至沸腾。
- 在121℃下以15psi压力高压釜15分钟。
- 冷却至45-50°C。
- 倒入无菌培养皿或分配到管中。
- 配药时摇动烧瓶,使木炭保持悬浮状态。
结果解释用木炭选择性培养基
图像来源:Thermo Scientific.和希德米亚。
- 空肠弯曲菌产生两种类型的菌落。
- 一个是小的,凸起的,灰棕色的,光滑的,闪闪发光的,整个半透明的边缘。
- 另一种菌落类型为扁平、粘液样、半透明、浅灰色,边缘不规则。
- 在新鲜培养基上观察到平坦,不规则或传播菌落。
- 一些菌株作为琼脂上的薄膜或沿着条纹线形成菌落。
- 在较少的新鲜培养基上,菌落的直径为1-2毫米;形成凸出和闪闪发光的菌落。菌落可以是灰色或粉红色的灰色或粉红色,是非溶血性的。
木炭选择性培养基的应用
- 它用于选择性隔离和推定识别弯曲杆菌食物和人类粪便标本的物种。
木炭选择性培养基的限制
- 建议对来自纯培养的菌落进行生物化学,免疫,分子或质谱测试以完全鉴定。
- 将孵育延长至72小时可能会增加分离率弯曲杆菌
- Campylobacter Coli,Campylobacter胎儿和一些菌株的空肠弯曲菌被头孢菌素类药物抑制。
- 孵化空肠弯曲菌应在42°C下进行,因为它是嗜热生物。较高的温度通过抑制伴随的微生物来赋予选择性并促进生长空肠弯曲菌。
- 选择性培养基中的试剂可以抑制所需物种的一些菌株或允许其设计用于抑制物种的生长,特别是如果物种存在于样本中的大量中。因此,在选择性培养基上培养的标本也应在非选择性培养基上培养,以获得其他信息,并有助于确保潜在病原体的恢复。
工具书类
- Dalynn生物学
- 哈代诊断
- Thermo.渔民
- Himedia
- 贝顿,狄金森和单位
- http://legacy.bd.com/ds/technicalCenter/inserts/8813781(02)(20101202).pdf.
- Ronald M.Atlas和James W. Snyder(2014年)。临床和公共卫生微生物学的媒体手册。CRC压力机。泰勒和弗朗西斯集团,LLC。
- Karmali Ma,Simor Ae,Roscoe M,Fleming PC,Smith SS,Lane J(1986)。评估无血,木炭的选择性培养基,用于分离弯曲杆菌来自粪便的生物。临床微生物学23(3):456-459。