补充固定试验 - 步骤,优点和缺点

补充固定试验

它是证明患者血清中抗体存在的经典方法。它基于抗原 - 抗体复合物修复补体的原理。随着补体的偶联没有明显的效果或变化,有必要使用由绵羊RBC组成的指示系统并涂有抗绵羊RBC抗体。补体溶酶抗体涂覆的RBC。

补充固定试验 - 步骤,优点和缺点

补充固定测试包括两个组件

第一个组件是一个指示系统使用绵羊红细胞的组合,补体固定抗体如免疫球蛋白G,避险绵羊红细胞和各种补体源豚鼠血清。当这些元素在最佳条件下混合时,抗羊抗体在红细胞表面上结合。随后与该抗原 - antibody复合物结合,形成并将红细胞引起莱斯佩。

第二个组件是测试系统(除了补体之外,还添加了一种已知的抗原和患者血清以绵羊红细胞的悬浮液)。补体固定方法的这两个组分按顺序测试。首先将患者血清加入已知的抗原中,并将补体加入溶液中。如果血清含有对抗原的抗体,则所得抗原 - 抗体复合物将结合所有补体。然后加入绵羊红细胞和抗羊抗体。如果由患者血清和已知的抗原形成的抗原抗体复合物尚未束缚,则可用于结合绵羊细胞和抗羊抗体的指示剂系统。指示剂绵羊红细胞的裂解意味着患者血清中缺乏抗体和负补体固定试验。如果患者的血清含有补体固定抗体,则缺乏红细胞裂解效果将表明。

补充固定测试的步骤

第1步:已知的抗原和灭活的患者的血清与标准化的有限的补体一起温育。如果血清含有特异性的,则补体激活抗体将通过抗原 - 抗体复合物激活或固定互补物。然而,如果患者血清中没有抗体,则不会形成抗原 - 抗体复合物,因此不固定补体。但将保持自由。

第2步:第二步骤检测是否在第一步中使用了补充。这是通过添加指示系统来完成的。如果由于抗体的存在,则在第一步中固定补码,则不会对指示系统固定不替换。然而,如果患者血清中存在抗体,则不会存在抗原 - 抗体复合物,因此,在混合物中可以自由或未固定互补。这种未固定的补充现在将与抗体涂层红细胞反应,以引起它们的裂解。

因此,羊红细胞(阳性CFT)的裂解表明在试验血清中存在抗体,而绵羊红细胞(阴性CFT)的裂解表明血清中的抗体也不存在抗体。

补体固定试验的优点

  1. 能够同时筛选大量病毒和细菌感染。
  2. 经济。

补体固定试验的缺点

  1. 不敏感 - 不能用于免疫筛查。
  2. 耗时的。
  3. 通常是非特异性的。单纯疱疹病毒和枸杞子之间的交叉反应性。

补充固定试验 - 步骤,优点和缺点

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