Coomb的测试 - 直接和间接的Coomb的测试

• Coomb的测试是直接的凝集反应，更常见的是抗气蛋白试验。
• 1945年由Coombs，Mourant和Race发现的是检测到不完全抗RH抗体的发现。
• 在测试中，不完整抗体不要凝集红细胞。不完全抗体抗结核蛋白涂层红细胞表面，但不会引起任何凝集。
• 当用抗叶蛋白或COOMBS血清处理这种红细胞时，细胞凝集。
• Coombs的血清或Coomb的试剂是来自兔或其他用纯化的人球蛋白免疫的兔或其他动物的特殊血清，以制备指导的抗体IgG.和补充（例如。兔子抗血清对抗人球蛋白）。
• 它用于直接和间接的Coomb的测试，也称为抗人麻球蛋白。

Coomb的测试目标

检测用IgG AlloAlibodies，IgG自身抗体或补体组分致敏的红细胞。

Coomb的测试原理

在一定条件下，补体蛋白或更常见的不完全抗体(IgG)通过免疫球蛋白的Fab部分附着在红细胞膜上。这些细胞被称为致敏细胞。红细胞的致敏作用可发生在体内或体外。依附在红细胞上的IgG分子无法在致敏红细胞之间架起桥梁，致敏红细胞被表面的负电荷分开，因此致敏红细胞不能凝集。

然而，添加了Coomb的试剂（抗气蛋白血清）完成了反应。当血清加入敏化细胞时，抗人球蛋白分子（抗IgG）的Fab部分与附着在红细胞的两个相邻IgG分子的Fc部分反应，从而弥合敏化的红细胞之间的间隙并引起凝集。

Thus, if human IgG antibody has already attached to the patient’s red cells in vivo (in the bloodstream), or the patient serum contains incomplete antibodies that can attach to RBCs in-vitro, then the addition of anti-human IgG will cause the cells to agglutinate. This is a positive Coomb’s test.

Coomb的测试类型

有两种类型的COMBS测试：直接的COOMB的测试和间接COOMB的测试。

直接Coomb的测试（直接抗气素测试）

• 直接测试更常见，并且对连接到红细胞表面的抗体进行检查。
• 在该测试中，发生了不完全抗体的红细胞（RBC）的敏化体内。
• 通过该试验可以检测细胞结合的抗体，其中对人免疫球蛋白的抗血清用于凝集患者的红细胞。

间接的Coomb的测试（间接抗叶蛋白测试）

• 间接试验检查血液中漂浮的未连接抗体。
• 在该测试中，发生了不完全抗体的RBC的敏化体外。
• 将患者的血清与正常的红细胞混合，并加入对人免疫球蛋白的抗血清。如果患者的血清中存在抗体，则会发生凝集。

Coomb的测试要求

试管，离心机，抗人球蛋白（AHG）试剂，预敏化红细胞（CoomBS对照细胞），盐水。

Coomb的测试程序

使用抗人麻球蛋白血清以检测体外红细胞的敏化是一种两级技术构成间接抗脱离蛋白检验（IAT）。另一方面，通过一个阶段技术检测体内红细胞的敏化 - 直接抗脱离蛋白检测（DAT）。

直接Coomb的测试

1. 怀疑致敏的红细胞在大量的盐水中洗涤3至4次。
2. 将两滴抗人球蛋白血清加入沉积的细胞中。
3. 它很好地混合并以1500rpm离心一分钟。
4. 通过握住点燃背景并敲击管的底部来检查凝集。
5. 如果未看到凝集，则管子在室温下放置10分钟。然后重新离心并读取。较弱的反应抗体可能会显示出延迟反应，这被认为是阳性的。
6. 如果在步骤5中未看到血凝凝血，则加入一滴的预先征收的红细胞（5％悬浮液是盐水）。这应导致预致敏细胞的血液凝集，表明抗人团球蛋白（AHG）是反应性的，结果是有效的。

间接的Coomb的测试

1. 制备4％的盐水悬浮液。
2. 将两滴细胞悬浮液加入小型试管中。
3. 将两滴抗血清添加到细胞悬浮液中。
4. 将其在37℃下在水浴中温育30分钟。
5. 除去水浴管，用大量的盐水洗涤3至4次。最后一次洗涤后完全倾倒。
6. 立即加入两滴抗人球蛋白（AHG）并混合良好。
7. 它以1500rpm离心一分钟并检查血凝凝集。
8. 在阴性血凝凝集的情况下，加入预敏化试剂细胞以测试AHG的反应性。必须通过添加组织对照细胞来观察凝集。

结果解释了Coomb的测试

积极的：在试验期间，红细胞（凝集）块块。

在a期间血细胞的凝集直接的Coomb测试表明，抗体可能存在于患者的红细胞上，并且溶血的条件可能持续存在。

血细胞期间的凝集间接的Coomb测试表明存在在血液中循环的抗体，其可能导致免疫系统对任何被认为是身体的红细胞反应 - 特别是在输血期间可能存在的红色血细胞。

消极的：没有块状或粘合红细胞。

Coomb的测试应用

1. Coomb的测试是有助于帮助了解贫血的血症患者患有血症患者的血液测试之一。
2. 施用间接试验以确定是否存在对输血的潜在不良反应。
3. 血库使用间接组织测试来确定是否有对血液的不利反应被转发。
4. COMBS的试验用于检测抗RH抗体。
5. 它还用于检测布鲁氏菌病和其他疾病的不完全抗体。
6. 间接组织试验用于孕妇的产前试验。
7. 测试是在新生儿的血液样本上完成的，通常在伴有黄疸的新生儿的环境中。
8. 它有助于检测溶血性贫血，慢性淋巴细胞白血病，红细胞变性胎儿，传染性单核细胞增多症，mycoplasmal感染，梅毒，全身狼疮红斑等。

Coomb测试的局限性

• 有时，特别是在老年人身上，即使没有任何其他疾病或危险因素，Coomb的测试也会产生异常结果。
• 该测试只能易于用于诊断医疗条件。

参考文献

1. http://www.shareyouressays.com/knowledge/useful-notes-on-coombs-test/115418.
2. coombs，r .;哀悼，e .;Race，R. R.（1945）。“检测弱和不完全rh凝集素的新试验”。英国实验病理杂志。26：255-66。
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