表的内容
- 枸橼酸去氧胆酸琼脂是对Leifson配方的改进，推荐用于分离沙门氏菌和志贺氏杆菌spp。
- 相比之下，这种培养基类似于去氧胆酸琼脂，但由于枸橼酸和去氧胆酸盐浓度的增加，对肠道病原体的选择性有所提高。
- 脱氧胆酸钠在pH为7.3 ~ 7.5时对革兰氏阳性菌有抑制作用。配方中所含的柠檬酸盐浓度对革兰氏阳性细菌和大多数其他正常肠道微生物有抑制作用。
- 因此，它是一种选择性和差异培养基，通常用于肠道病原体的分离。
枸橼酸脱氧胆酸脂(DCA)的组成
| 成分 | Gms /升 |
| 嗨固体 | 10.00 |
| 眎蛋白胨 | 10.00 |
| 乳糖 | 10.00 |
| 钠脱氧胆酸盐 | 5.000 |
| 中性红 | 0.020 |
| 柠檬酸钠 | 20.00 |
| 枸橼酸铁铵 | 2.000 |
| 琼脂 | 13.50 |
最终pH(25°C) 7.5±0.2
脱氧胆酸盐琼脂(DCA)的原理
- HI固体是碳和氮的来源，对大肠菌群有抑制作用。
- 蛋白胨蛋白提供碳、氮、维生素和矿物质。
- 脱氧胆酸钠、柠檬酸钠和柠檬酸铁铵对大肠菌群和革兰氏阳性菌均有抑制作用或显著抑制作用。
- 磷酸二钾缓冲介质。
- 乳糖有助于区分肠道杆菌，因为乳糖发酵剂产生红色菌落，而乳糖非发酵剂产生无色菌落。
- 大肠菌群，如有则在培养基上形成粉红色的菌落。
- 乳糖的降解导致相关菌落周围介质酸化，pH指示剂中性红变红。由于培养基的酸化，这些菌落通常也被沉淀去氧胆酸的混浊带所包围。
- 去氧胆酸钠在酸性环境中与中性红结合，导致染料随着去氧胆酸盐的沉淀而离开溶液。
- 柠檬酸铁铵还原为硫化铁，形成黑色的硫化铁。
- 沙门氏菌和志贺氏菌不发酵乳糖，但沙门氏菌可产生H2S，形成无色菌落，有或没有黑色中心。
- 柠檬酸和铁(Fe)的结合对琼脂有很强的水解作用，在加热培养基时产生柔软无弹性的琼脂。
枸橼酸去氧胆酸琼脂(DCA)的制备及使用方法
- 将70.52克悬浮在1000毫升蒸馏水中。
- 加热至沸腾，使介质完全溶解。
注意:高压蒸汽。避免过度加热，因为这对介质有害。
- 冷却至45 - 50°C。充分混合后倒入无菌培养皿。
- 使用前将琼脂表面干燥。
- 用粪便或直肠拭子大量接种培养基，将原接种物的一部分展开，以便在培养皿的某些部分获得分离良好的菌落。
- 在35°C孵育18-24小时。
- 如果微生物发育较晚或没有观察到非乳糖发酵剂，再孵育24小时。
结果枸橼酸去氧胆酸琼脂(DCA)解释
乳糖非发酵剂产生透明、无色到浅粉色或棕褐色的菌落，有或没有黑色中心。
乳糖发酵剂产生红色菌落，有或没有胆汁沉淀。
| 生物 | 增长 |
| 大肠杆菌 | 可怜的增长;H呈粉红色，胆汁沉淀阴性2年代 |
| 沙门氏菌肠炎 | Good-luxuriant增长;无色;H阳性反应2美国以黑人为中心的殖民地 |
| 沙门氏菌沙门氏菌感染 | Good-luxuriant增长;无色;H阳性反应2美国以黑人为中心的殖民地 |
| 弗氏志贺菌 | 良好的增长;无色 |
| 沙门氏菌Abony | Good-luxuriant增长;无色;H阳性反应2美国以黑人为中心的殖民地 |
| 志贺氏杆菌sonnei | 菌落光滑，最初无色，在进一步培养时由于乳糖发酵晚期而变成淡粉色 |
| 肠杆菌属、克雷伯氏菌spp。 | 大的，苍白的粘液样菌落，粉红色的中心 |
脱氧胆酸盐琼脂(DCA)的用途
- 脱氧胆酸盐琼脂用于分离和分化革兰氏阴性肠道杆菌在实验室设置。
- 它对分离引起细菌性痢疾的微生物特别有用，沙门氏菌导致食物中毒和沙门氏菌甲型副伤寒。
枸橼酸脱氧胆酸琼脂(DCA)的局限性
- 怀疑的病原体必须在抑菌性较低的培养基上传代才能鉴定。
- 因为有很多细菌看起来也像沙门氏菌在DCA上，广泛推荐使用选择性更强的琼脂进行鉴定沙门氏菌，即赖氨酸脱氧胆酸木糖(XLD)琼脂。
- 这种生长介质是热敏性的，在加入去氧胆酸盐后，应尽快倒入并冷却，否则，它会变得非常软，难以处理。
- 大便、尿标本常规检查时，建议配合使用麦康凯琼脂、亚硫酸盐铋琼脂等培养基。
- 为确认物种，需要进行进一步的生化鉴定。
- 由于营养差异，一些生物体可能生长不良。
参考文献
- http://himedialabs.com/TD/M065.pdf
- https://www.usbio.net/culture-media
- https://www.bd.com/europe/regulatory/Assets/IFU/Difco_BBL/227410.pdf
- http://foodsafety.neogen.com/uk/deoxycholate-citrate-agar
- 陈建平(主编)，1984，食品微生物检验方法纲要，第2版，美国食品卫生协会，华盛顿特区
- https://www.thomassci.com/Laboratory-Supplies/Microbiological-Media/_/Deoxycholate-Citrate-Agar-Modified-Hynes
- https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/d7809?lang=en®ion=US