金云冷法的目的
耐酸鉴定分枝杆菌和寄生虫,如隐孢子虫而且Isoporaspp。
金云冷法原理
抗酸分枝杆菌的外膜含有分枝杆菌酸,使细胞呈蜡状,并能抵抗水性染色剂(如革兰氏染色剂)的染色。主要的染色剂,碳红素,应用于细胞和苯酚,使染色剂渗透到抗酸微生物的蜡状表面。用1%的硫酸处理除去多余的污渍。第二种染色,亚甲基蓝,然后应用于细胞。
金云冷法程序
- 染色前准备并固定标本涂片。
- 在室温下用炭黑素覆盖涂片3 - 5分钟。
- 用水轻轻冲洗载玻片。
- 在载玻片上运行1%硫酸脱色剂大约3分钟。
- 用水冲洗载玻片,再次脱色1至2分钟,直到溶液清澈。
- 用水冲洗幻灯片。
- 用亚甲基蓝二次染色剂或反染色剂覆盖涂片1分钟。
- 用水轻轻冲洗载玻片。
- 用吸水纸吸干载玻片。
金云冷法结果解释
抗酸的生物,分枝杆菌Spp .,将显示为粉红色。注:在单一痰液中鉴定单一抗酸杆菌被认为是诊断。
Nonacid-fast生物将显示为蓝色。此外,背景材料应染成蓝色。
金云冷法的局限性
1.可能没有Ziehl-Neelsen方法。
2.涂抹太厚可能不合适污渍。
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