DNA复制-定义,酶,步骤,机制,图表

什么是DNA?

脱氧核糖核酸(DNA)是一种核酸,它由三种成分组成:脱氧核糖糖、磷酸盐和含氮碱。脱氧核糖核酸,DNA是定义细胞的遗传物质。它是一种长分子,含有独特的编码,为合成所有身体蛋白质提供指令。

DNA复制
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DNA结构

  • DNA的结构模型最初由James Watson和Francis Click提出。
  • 他们发现,DNA是一个双螺旋结构,由两条核苷酸序列互补的成对DNA链组成。
  • 双链DNA分子有两条螺旋状的核酸链,它们被扭曲成双螺旋状。这种扭曲赋予了DNA的致密性。
  • DNA是由数百万核苷酸。核苷酸是由脱氧核糖糖组成的分子,其上有一个磷酸基和一个碱基。
  • 每个核苷酸与另一条链上的互补核苷酸紧密碱基配对,即腺嘌呤(a)与胸腺嘧啶(T)配对或鸟嘌呤(G)与胞嘧啶(C)配对,因此一条链的序列充当复制过程中形成的新链的模板。
  • 核苷酸通过磷酸二酯键相互结合形成糖-磷酸骨干。
  • 它们在脱氧核糖糖上的第三个碳原子之间形成了一个键它被命名为3 '(3 ')另一个糖上的第五个碳原子被命名为5 ' (5 ')
  • 在复制过程中,序列的任何部分都可以用来创建或识别邻近的核苷酸序列。
  • DNA通过紧密地包裹在称为染色质的紧密线圈中而与细胞核相匹配。在细胞分裂过程中,染色质浓缩形成染色体。
  • 在DNA复制之前,染色质会松开,使复制机制接触到DNA链。

DNA的详细结构和组成

图片来源:复利

读也:DNA-结构,性质,类型和功能

什么是DNA复制?

  • 这是发生在细胞分裂(间期,S期)期间的一个复杂过程,在细胞通过有丝分裂和减数分裂分裂之前,DNA进行复制。
  • DNA复制是一种半保留的过程其中一个亲代链(模板)被用来合成一个新的互补子链,使用的蛋白质元素包括酶和RNA分子。
  • DNA复制过程使用DNA聚合酶作为催化脱氧核糖核苷5 ' -三磷酸(dNTPs)连接形成生长的DNA链的主要酶。
  • 其他蛋白质也参与DNA的启动和复制过程,以及校对功能,以确保复制过程准确进行。
  • 因此,DNA复制是一个从DNA分子的单链中产生相同的DNA螺旋的过程。
  • DNA复制是促进细胞生长、修复和生物体繁殖的重要机制。

DNA复制的机制

图:DNA复制的机制。图像来源:MBInfo©2018新加坡国立大学

DNA复制的机制

总结DNA复制有三个主要步骤。

    1. 打开DNA的双链螺旋结构并分离链
    2. 模板链的引物
    3. 组装新形成的DNA片段。
  • 在DNA分离过程中,两股DNA在一个特定的位置展开,这个位置被称为起源.在几种酶和蛋白质的参与下,它们为复制准备(启动)链。
  • 在这个过程的最后,DNA聚合酶开始组织新DNA链的组装。
  • 这些是所有细胞DNA复制的一般步骤,但它们可能有具体的不同,取决于生物体和细胞类型。
  • 酶在DNA复制中起着重要作用,因为它们催化了整个过程中的几个重要阶段。
  • DNA复制是细胞功能最重要的机制之一,因此人们对其过程进行了深入的研究。
  • DNA复制的机制在大肠杆菌,这和真核细胞的情况类似。
  • 在大肠杆菌中,DNA复制开始于oriC位点(oriC),当ATP水解时,DnaA蛋白与oriC位点结合。

DNA复制酶和蛋白质

DNA聚合酶

  • DNA聚合酶是一种通过将核苷酸一个一个地添加到生长的DNA链中来合成DNA的酶。这种酶在模板链上加入互补的氨基酸。
  • DNA聚合酶存在于原核细胞和真核细胞中。它们都含有几种不同的DNA聚合酶,负责DNA复制和DNA修复机制的不同功能。

DNA解旋酶酶

  • 这是一种酶,参与解开DNA的双螺旋结构,允许DNA复制开始。
  • 它利用ATP水解过程中释放的能量,打破DNA碱基之间的氢键,分离DNA链。
  • 这在每个分离的链上形成了两个复制分叉,向相反的方向打开。
  • 在每个复制叉上,亲代DNA链必须展开,以暴露单链模板的新片段。
  • 解旋酶准确地解开链,同时保持DNA分子上的地形。

DNA引物酶酶

  • 这是一种RNA聚合酶,用于合成或生成RNA引物。RNA引物是作为DNA复制起始模板的短RNA分子。

DNA连接酶酶

  • 这种酶通过在核苷酸之间形成磷酸二酯键将DNA片段连接在一起。

核酸外切酶

  • 这是一组酶,可以去除DNA链末端的核苷酸碱基。

拓扑异构酶

  • 这是一种能解决解缠绕过程中产生的拓扑应力问题的酶。
  • 他们切断一条或两条DNA链,让DNA链在重新连接两端之前围绕彼此移动以释放张力。
  • 因此,酶通过连接断裂链来促进可逆断裂。
  • 拓扑异构酶又称DNA旋回酶大肠杆菌。

端粒酶

  • 这是在真核细胞中发现的一种酶,它在染色体分裂后将特定的DNA序列添加到染色体端粒中,使染色体随着时间稳定下来。

视频:DNA复制酶及其功能(Shomu 's Biology)

DNA复制步骤/阶段

初始化

  • 这是DNA复制开始的阶段。
  • DNA合成是在模板链内的一个被称为起源
  • 起源地点是由引发剂的蛋白质它会招募额外的蛋白质,帮助复制过程在DNA起源周围形成一个复制复合体。
  • DNA复制的起始点有几个,它们都被称为复制叉。
  • 形成的复制复合物包含DNA解旋酶,其功能是解开双螺旋,暴露两条链,作为复制的模板。
  • DNA解旋酶的机制是通过水解ATP来形成碱基之间的键,从而打破连接两条链的键。
  • 此外,在起始阶段,DNA引物酶合成小RNA引物,启动DNA聚合酶的功能。
  • DNA聚合酶通过生长新的DNA子链发挥作用。

伸长

  • 在这个阶段,DNA聚合酶将新的DNA子链附着在原始的未拉链的模板链和起始的短RNA引物上,从而生长出新的DNA子链。
  • DNA聚合酶能够合成与模板匹配的新链,通过在3 '端添加游离核苷酸来延长引物。
  • 其中一个模板在3 '到5 '方向读取,因此,DNA聚合酶在5 '到3 '方向合成新的链,这被称为前导链。
  • 沿着模板链,DNA引物酶在模板的5 '到3 '方向合成一个短RNA引物,启动DNA聚合酶继续合成新的核苷酸,延长新的DNA链。
  • 另一个模板(5 '到3 ')是通过添加短RNA引物,以反平行的方向拉长的,短RNA引物充满了其他连接片段,形成了新形成的滞后股。这些短片段被称为冈崎片段。
  • 滞后链的合成是不连续的,因为新形成的链是断开的。
  • 短RNA引物中的RNA核苷酸必须被移除并被DNA核苷酸取代,然后由DNA连接酶连接。

终止

  • 在连续型和断续型支架合成和延伸之后,一种被称为核酸外切酶的酶会从原链上去除所有的RNA引物。
  • 引物被正确的核苷酸碱基取代。
  • 当移除引物时,另一种核酸外切酶对新的支架进行校对,检查、移除和替换合成过程中形成的任何错误。
  • DNA连接酶连接冈崎片段形成一个单一的统一链。
  • 母链的末端由一个重复的DNA序列组成,称为端粒,端粒在染色体的末端起着保护帽的作用,阻止附近染色体的融合。
  • 端粒是由一种叫做端粒酶的特殊类型的DNA聚合酶合成的。
  • 它催化DNA末端的端粒序列。
  • 完成后,母链和互补链缠绕成双螺旋形,产生两个DNA分子,分别从母链和新链中传递一条链。

DNA复制视频动画(阿米巴姐妹)

冈崎片段

  • 两条DNA链以相反或反平行的方向运行,因此,要在复制叉处连续合成两条新链,需要一条在5'到3'方向合成,而另一条在相反方向3'到5'方向合成。
  • 然而,DNA聚合酶只能催化dNTPs在5 '到3 '方向的聚合。
  • 这意味着另一条相反的新链以不同的方式合成。但如何?
  • 通过从复制叉的运动方向向后合成的不连续的小DNA片段的连接。这些新DNA链的小片段或片段被称为Okasaki碎片。
  • 冈崎片段通过DNA连接酶的作用连接,形成一条完整的新DNA链,称为滞后链。
  • 滞后相不是由引发前导链合成的引物合成的。
  • 相反,一个短片段的RNA作为一个引物(RNA引物),用于启动滞后链的复制。
  • RNA引物是在RNA合成过程中形成的,它是从头开始的,一种称为引物酶的酶合成这些RNA短片段,长度为3-10个核苷酸,与复制叉上的滞后链模板互补。
  • 冈崎片段随后通过DNA聚合酶的RNA引物延伸合成。
  • 然而,新合成的后向链中含有一个RNA-DNA关节,这就确定了RNA在DNA复制中的关键作用。

冈崎片段

图:冈崎片段。图片来源:大卫O摩根

复制叉的形成及其功能

  • 复制叉是活跃的DNA合成位点,DNA螺旋解开,DNA单链复制。
  • 几个起始点代表复制叉。
  • 复制叉是在DNA链被解旋酶解开的过程中形成的,解旋酶暴露了复制的起源。短RNA引物由引物酶合成,DNA聚合酶进行延伸。
  • 复制叉向合成新链的方向移动。新的DNA链在两个方向合成,即3 '至5 '方向是先导链,5 '至3 '方向是滞后链。
  • 新DNA链的两端(前导链和后导链)在复制叉的两个相反方向进行复制。
  • 因此复制分叉是双向的。

DNA复制叉形成

图:DNA复制叉。图片来源:MDPI (Adam R. Leman和Eishi Noguchi)

主导股

  • 前导链是由DNA聚合酶不断合成的新DNA链。
  • 它是复制过程中合成的最简单的链。
  • 在DNA链被解开和分离后,合成就开始了。这就产生了一小段RNA,称为a底漆通过DNA引物酶。
  • 引物与链的3 '端(起始)结合,从而启动新链(前导链)的合成。
  • 前导链的合成是一个连续的过程。

滞后链

  • 这是由RNA引物不连续合成的模板链(5 ' - 3 ')。
  • 在前导链的合成过程中,它暴露出小的、短的链或模板,然后用于冈崎片段的合成。
  • 冈崎片段通过DNA聚合酶的活性合成滞后链,将DNA片段(冈崎片段)添加到引物之间的链中。
  • 滞后链的形成是一个不连续的过程,因为新形成的链(滞后链)是短DNA链的碎片。

视频讲座:DNA复制-前导链vs后导链&冈崎片段(有机化学导师)

为什么DNA复制很重要?

  • DNA复制发生在细胞分裂过程中,它通过从一个单亲基因组中复制两个基因组来实现DNA的增殖和分裂。
  • 因此,它的重要性在于产生新的和下一个DNA拷贝,从一个单亲细胞产生两个子细胞。
  • 每个新细胞都有自己的基因组。
  • 这通过繁殖和细胞分裂增强了遗传。

DNA复制的压力

在DNA复制过程中,DNA基因组会因其机制而承受各种压力。这些应力导致停滞复制和停滞复制叉的形成。有几个事件导致了这些压力,包括;

  • 不寻常的DNA结构
  • 不匹配的核苷酸
  • 由复制和转录的并发机制引起的张力
  • 重要复制因素的可用性不足
  • 复制DNA链上的脆弱位点
  • 癌基因的过度表达或结构性激活
  • 无法访问染色质

激酶调节蛋白,如ATM (ATM丝氨酸/苏氨酸激酶)和ATP是帮助减轻复制压力的蛋白质。这些蛋白质被DNA损伤吸收并激活。

如果调节蛋白不稳定,停滞不前的复制叉可能会崩溃,如果和当这种情况发生时,修复机制的重新组装复制叉发生。这有助于修复受损的DNA末端。

真核生物的DNA复制(与原核生物的差异)

原核生物和真核生物的DNA复制既有相似之处,也有不同之处。这取决于细胞大小和基因组大小。

原核生物和真核生物DNA复制的相似性

  • 原核生物和真核生物在DNA复制开始前的解开机制是相同的。
  • 在这两种生物体中,DNA聚合酶协调新DNA链的合成。
  • 此外,这两种生物都使用半保守复制模式,使前导链和滞后链向不同的方向。冈崎片段形成滞后链。
  • 最后,两种生物都使用短RNA引物启动DNA复制。

真核生物与原核生物DNA复制的差异

S.N.

真核生物DNA复制

原核DNA复制

1. 由于真核生物的体积很大,它们拥有的DNA是真核生物的25倍 由于体型小,它们的DNA非常少
2. 真核细胞有多个起源点,它们利用细胞核内的单向复制。 原核细胞有一个单一的起源点,复制在两个相反的方向同时发生,它发生在细胞质中。
3. 真核生物有四种或四种以上的聚合酶。 原核细胞具有一种或两种聚合酶。
4. 真核细胞的复制速度较慢,需要400小时。 原核细胞的复制速度更快,需要40分钟。
5. 真核生物有一个独特的过程来复制染色体末端的端粒。 原核生物具有环状染色体DNA,因此它们没有任何末端需要合成。
6. 真核细胞只在细胞周期的s期进行DNA复制。 原核生物的复制几乎是连续不断的。

引用和来源

  • 普雷斯科特的微生物学,第五版
  • 《细胞:分子方法》第二版。https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK9940/
  • https://www.khanacademy.org/science/biology/dna-as-the-genetic-material/dna-replication/a/molecular-mechanism-of-dna-replication
  • https://en.wikipedia.org/wiki/DNA_replication
  • TeachMePhysiology.wordpress
  • https://www.yourgenome.org/facts/what-is-dna-replication
  • https://www.thoughtco.com/dna-replication-3981005
  • https://bio.libretexts.org/Bookshelves/Biochemistry/Book%3A_Biochemistry_Free_and_Easy_ (Ahern_and_Rajagopal) / 3 a_dna_replication 05% 3 a_flow_of_genetic_information / 5.01%
  • https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK9940/
  • https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK9940/#A773
  • https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK9940/#A776
  • https://bio.libretexts.org/Bookshelves/Biochemistry/Book%3A_Biochemistry_Free_For_All_ (Ahern_Rajagopal_and_Tan) / 3 a_dna_replication 07% 3 a_information_processing / 7.03%
  • https://sciencing.com/evolutionary-relationships-between-prokaryotes-eukaryotes-8705633.html
  • https://www.toppr.com/guides/biology/cell-the-unit-of-life/dna-replication-in-prokaryotes-eukaryotes/
  • https://byjus.com/biology/difference-between-prokaryotic-and-eukaryotic-replication/
  • https://www.nature.com/scitable/topicpage/replication-fork-stalling-and-the-fork-protection-14435782/
  • https://scienceprimer.com/replication-fork
  • https://bio.libretexts.org/Bookshelves/Introductory_and_General_Biology/Book%3A_General_Biology_(无限)/ 3 a_dna_structure_and_function 14% / 14.3% 3 c % 3 a_dna_replication_in_eukaryotes a_dna_replication / 14.3
  • https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3941221/
  • https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK9926/#A3389
  • https://opentextbc.ca/anatomyandphysiology/chapter/3-3-the-nucleus-and-dna-replication/
  • https://en.wikipedia.org/wiki/ATM_serine/threonine_kinase
  • https://en.wikipedia.org/wiki/DNA_replication_stress

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