内藤琼脂-组成,原理,制备,结果,用途

  • Endo公司研制的Endo琼脂是在乳糖发酵的基础上区分革兰氏阴性菌,同时抑制革兰氏阳性菌。
  • 后者的抑制是在不使用传统的胆盐的情况下实现的。
  • Endo成功地抑制了革兰氏阳性细菌在他的培养基上加入亚硫酸钠和碱性品红。
  • 所得到的内藤琼脂,也被称为紫红亚硫酸盐和输液琼脂,用于分离伤寒杆菌。
  • 多年来,人们对这种媒体进行了许多修改。
  • 目前,对来自临床和非临床样本的大肠菌群成员的推定试验,推荐使用内藤琼脂作为选择性培养基进行确认。
Endo琼脂

内藤琼脂的组成

成分 Gms /升
蛋白胨 10.000
乳糖 10.000
磷酸钾 3.500
亚硫酸钠 2.500
基本的碱性品红 0.500
琼脂 15.000

最终pH(25°C): 7.5±0.2

内藤琼脂原理

  • 培养基中含有蛋白胨,可提供细菌生长所需的氮、碳、维生素和矿物质。
  • 亚硫酸钠和碱性品红通过抑制革兰氏阳性微生物使这种介质具有选择性。
  • 乳糖阳性菌落呈现红色,这是由醛与亚硫酸钠和碱性品红反应引起的。
  • 当微生物发酵乳糖产生醛类物质时,就会产生金属光泽。乳糖不发酵细菌形成清晰,无色菌落。
  • 因此,大肠菌群在乳糖发酵时产生粉红色菌落,而乳糖非发酵菌在培养基上产生无色菌落。
  • 大肠杆菌,当品红结晶时,这种反应非常明显,对菌落显示永久性的绿色金属光泽(品红光泽)。
  • 如果生长为无色、米色或非粉红色,则乳糖未被利用,可能为革兰氏阴性非大肠菌群。
  • 如果生长良好,呈粉红色/红色,则乳糖被利用,该细菌可能是革兰氏阴性大肠菌群。
  • 如果良好的粉红色/红色生长,有明亮的金属光泽,乳糖被高度利用,该细菌可能是革兰氏阴性大肠菌群。
  • (回想一下,如果它生长缓慢或者没有生长,它很可能是一种革兰氏阳性菌。)

内藤琼脂的制备及使用方法

  1. 将41.5克悬浮在1000ml蒸馏水中。
  2. 加热至沸腾使介质完全溶解。
  3. 在15磅压力(121°C)的高压灭菌15分钟。
  4. 搅拌均匀后倒入无菌培养皿。

注意:如果固化的培养基有点太红,然后添加几滴(最大。1毫升/升)新鲜配制的10%亚硫酸钠溶液,煮沸。

  1. 在实验室收到标本后,应尽快将其划一条。
  2. 条形平板主要用于从含有混合植物群的标本中分离纯培养物。
  3. 或者,如果材料是直接从拭子上培养的,将拭子滚动在表面边缘的一小块区域上;然后从这个接种区域划下来。
  4. 还必须接种非选择性培养基,如含5%羊血的哥伦比亚琼脂,以表明标本中存在其他生物。
  5. 培养板,避光,35±2°C, 18至24小时。

内藤琼脂的结果解释

生物 增长
克雷伯氏菌aerogenes Good-luxuriant增长;粉红色的殖民地
粪肠球菌 可怜的增长;小粉红殖民地
大肠杆菌 Good-luxuriant增长;粉红色到玫瑰红,带有金属光泽
克雷伯氏菌肺炎 Good-luxuriant;粉红色的黏液状的殖民地
变形杆菌属寻常的 Good-luxuriant增长;无色到淡粉色菌落
铜绿假单胞菌 Good-luxuriant增长;无色、不规则的殖民地
伤寒沙门氏菌 Good-luxuriant增长;无色到淡粉色
肠杆菌属下水道 良好的增长;粉红色的殖民地
鼠伤寒沙门氏菌 Good-luxuriant增长;无色的殖民地
肠炎沙门氏菌 Good-luxuriant增长;无色的殖民地
弗氏志贺菌 Good-luxuriant增长;无色的殖民地
肠杆菌属aerogenes 好到优秀的成长;绿色金属光泽

远藤琼脂的用途

  • 该培养基现在被用于乳糖发酵和非乳糖发酵肠道微生物的分化,特别是在大肠菌群假定试验的确认过程中。
  • 内多琼脂被美国微生物学会推荐为水、废水、乳制品和食品的微生物检测的重要培养基。
  • 内藤琼脂用于饮用水假定试验后大肠菌群的检测和计数。
  • 它也用于检测和分离大肠菌群和粪便大肠菌群从牛奶,乳制品和食品。
  • 内藤琼脂用于膜过滤法在实验室环境中对水中大肠菌群的计数。

内藤琼脂的局限性

  • 除了肠杆菌科,其他革兰氏阴性菌和酵母菌也可能生长。
  • 避免将介质暴露在光下,因为这可能会导致光氧化和降低介质的生产力。
  • 必须避免介质过热,因为它可能会破坏介质的生产力。
  • 必须进行进一步的生化测试以进一步确认。
  • 如果接种量过大,光泽可能会被抑制。
  • 偶尔,非大肠菌群可能产生典型的光泽菌落。大肠菌群有时也会产生非典型菌落,包括暗红色或无光泽有核菌落。

参考文献

  1. http://himedialabs.com/TD/M029.pdf
  2. http://www.oxoid.com/UK/blue/prod_detail/prod_detail.asp?pr=CM0479&org=64&c=UK&lang=EN
  3. http://www.labm.com/products/endo-agar-base.asp
  4. https://foodsafety.neogen.com/pdf/acumedia_pi/7724_pi.pdf
  5. http://spot.pcc.edu/~jvolpe/b/bi234/lab/differentialMedia/endo_agar.htm
  6. https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8974

关于“内囊琼脂——组成、原理、制备、结果、用途”的3个思考

  1. 好的内容。但是,在我看来,你也应该包括大肠杆菌快速测试验证(检测存在葡萄糖醛酸酶)和吲哚测试。这是因为一些非典型菌落也以某种方式产生蓝色荧光,以表明存在- Glucoronidase。

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