酶联免疫吸附试验（ELISA）

酶联免疫吸附试验（ELISA）

酶联免疫吸附试验（ELISA）利用酶系统显示抗原的特定组合与其抗体。它是量化固定在固体表面上的抗原的方法。ELISA使用具有共价偶联酶的特异性抗体。结合抗原的抗体的量与存在的抗原的量成比例，其通过通过分光光度测量通过偶联的酶测量透明物质与有色产品的转化来确定。ELISA技术首先概念化和开发Peter Perlmann.和eva.engvall.在斯德哥尔摩大学，瑞典。

ELISA的酶系统包括标记为特异性抗体或抗原的酶，以及在抗原 - 抗体反应后加入的发色基质。通过附着于抗原 - 抗体复合物的酶水解基材。ELISA测试使用免疫系统（例如IgG或IgM抗体）的组分和用于检测体内免疫应答的化学品。ELISA测试涉及一种酶（催化生化反应的蛋白质）。它还涉及抗体或抗原（免疫分子）。ELISA测试的用途包括诊断感染如艾滋病毒（人免疫缺陷病毒）和一些像食物过敏的过敏疾病。ELISA测试也称为免疫吸附测定。

抗原抗体反应后，对酶特异的发色底物（用于过氧化物酶，碱性磷酸酶对硝基苯基磷酸酶的o-苯基二胺二羟基氯​​化物等）被添加。通过附着在抗原 - 抗体复合物上用酶作用（通常是水解）的基材以产生颜色变化。可以在视觉上读取反应中的颜色，或者通过使用微型读者读取器读取光密度（比色度估计）来检测反应。ELISA读卡器。通常，制备基于已知浓度的抗原或抗体的标准曲线，从中计算了未知量。

抗原或抗体涂覆在固体表面上，例如塑料管或微量滴定板阱。因此，在抗原和抗体组合后（形成抗原 - 抗体复合物），在随后的洗涤阶段期间它们保持牢固地连接到固体表面。

酶免疫测定（EIAS）可用于检测血清中的抗原或抗体和患者的其他体液。在EIA技术中，使用用酶标记的抗原或抗体。碱性磷酸酶，辣根过氧化物酶和β-半乳糖苷酶是在EIA测试中使用的酶。

有不同类型的ELISA可用于检测和定量血清和其他体液中的抗原或抗体。有四种类型的ELISA测试：

直接ELISA.

抗原附着在聚苯乙烯板上。加入酶标记的抗体，其可以与抗原和可以测量的底物反应。

间接Elisa.

抗原附着在聚苯乙烯板上。添加初生抗体，然后是酶标记的抗体，其可以与初抗体和底物反应。

三明治盟友

将捕获抗体连接到聚苯乙烯板上，然后添加抗原，其特异性地附着或捕获抗原。第二抗体，对抗原的特异性，但不加入与捕获抗体相同，并“夹心”抗原。然后将该第二抗体接着，其特异于第二抗体的酶标记的抗体，其可以与可以测量的底物反应。

竞争力的ELISA

该测试就像夹心ELISA，但在加入第二抗体时涉及添加竞争抗体或蛋白质。这导致产生的基板信号的降低。该测试被认为提供良好，高度特定的结果。