Giemsa染色原理，程序，结果，解释

介绍

Giemsa染色法是一个德国化学家采用的名字，因为他应用了一种试剂组合来证明疟疾中寄生虫的存在。

它属于一群被称为罗曼沃斯基污渍。这些是由氧化亚甲基蓝色，氮杂物和eosin Y的混合物组成的中性污渍，并且它们在用甲醇后固定的风干载玻片上进行。罗曼德斯基污渍适用于细胞的分化，样品的病理检查，如血液和骨髓薄膜和寄生虫的示范疟疾。有四种类型的Romanoswsky污渍：

• Giemsa污渍
• 詹纳污点
• 赖特污点
• May-Grunwald污点
• 全新的污点

吉氏染色的目的

• 准确准备吉氏染色原液
• 染色并鉴定血细胞
• 从细胞质中分化血细胞核

原则

Giemsa染色是一种金标准染色技术，用于薄涂片和厚涂片检查血液中是否有疟疾寄生虫，这是对其他血液寄生虫的常规检查，并从形态学上区分红细胞、白细胞、血小板和寄生虫的核和细胞质。

像任何一种罗曼诺夫斯基色斑一样，它由酸性和碱性两种染料组成，与酸性和碱性的亲和力有关血液细胞。天蓝色和亚甲基蓝，一种碱性染料与酸核结合，产生蓝紫色。伊红是一种酸性染料，它被细胞质和细胞质颗粒所吸引，而细胞质和细胞质颗粒是碱性的，能产生红色。必须用水将染料缓冲到pH值6.8或7.2，使染料沉淀，以结合简单的材料。

经典上，Giemsa染色是一种差异染色，其由广泛用于细胞遗传学和组织病理学的试剂（氮杂，亚甲基蓝色和曙红染料）的组合来组成：

1. 疟疾，螺旋形和其他血液寄生虫
2. Chlamydia Thachomatis.包涵体
3. 博福雷莱仕达屋优先计划
4. yersinia pestis.
5. 血液组织活血仕达屋优先计划
6. 耶氏肺孢子菌囊肿

试剂使用

• 甲醇
• Giemsa粉末
• 甘油
• 水（缓冲液）

程序

制备Giemsa染色液（500ml）

1. 250ml甲醇中加入3.8g吉姆沙粉溶解。
2. 将溶液加热到60度^O.C
3. 然后，将250ml甘油加入溶液中，缓慢。
4. 过滤解决方案并将其置于使用前约1-2个月。

制备工作解决方案

1. 将10ml原液加入80ml蒸馏水和10ml甲醇中

染色步骤1:薄膜染色

1. 在干净干燥的显微镜载玻片上，将标本(血液)制成薄膜，然后晾干。
2. 将涂片（2-3次）浸入纯甲醇中以固定涂片，留到空气干燥30秒
3. 用5%吉姆沙染色液浸泡玻片20-30分钟。
4. 用自来水冲洗并晾干

笔记：紧急情况下，将吉姆萨染色液放置5-10分钟

染色程序2：厚膜染色

1. 加一层厚厚的血片，在染色架上风干1小时。
2. 将厚血涂片浸入稀释的吉氏染色液中(取1ml原液，加入49ml磷酸盐缓冲液或蒸馏水配制，但结果可能不同)。
3. 通过将蒸馏水的缓冲水浸入3-5分钟的缓冲水中洗涤涂片
4. 让它晾干

结果

血细胞的细胞质和细胞质颗粒在颜色上显得红色，而核看起来是蓝紫色的。

红细胞呈粉红色

• 嗜酸性粒细胞有蓝紫色的细胞核，淡粉色的细胞质和橘红色的颗粒。
• 中性粒细胞细胞核呈紫红色，胞浆呈粉红色。
• 嗜碱性粒细胞将具有紫色核和蓝色颗粒。
• 淋巴细胞有深蓝色的细胞核和浅蓝色的细胞质。
• 单核细胞将具有紫色核和粉红色的细胞质。
• 血小板将有紫色颗粒。

图片来源:维基百科

解释

天蓝色和亚甲基蓝，一种碱性染料与酸核结合，产生蓝紫色。曙红是一种酸性染料，被碱性产生红橙色着色的细胞质和细胞质颗粒被吸引。

应用吉姆沙染色剂

1. Giemsa染色是DNA的磷酸盐基团的特异性。它将其自身附着到具有大量腺嘌呤胸腺嘧啶键的DNA区域。
2. 吉氏染色用于吉氏染色(g显带)，用于染色染色体，它通常用于创建染色体的图解表示(idiogram)。
3. Giemsa染色是一种鉴别染色，可以用来研究致病菌对人体细胞的粘附，将人体细胞区分为紫色，细菌细胞区分为粉红色。
4. 它可用于疟疾的组织病理学诊断和一些螺旋体和原生动物血液寄生虫。
5. 它也用于沃尔巴赫组织染色，即染色的造血组织和鉴定细菌和立克次体
6. Giemsa染色是一种经典的血膜染色，适用于外周血涂片和骨髓标本。红细胞染色粉红色，血小板染色浅苍白粉红色，​​淋巴细胞细胞质污渍天蓝色，单核细胞细胞质污渍淡蓝色，白细胞核染色质污渍污渍洋红色。
7. 吉姆萨染色法也被用于可视化染色体，识别染色体异常，如易位和重排，
8. Giemsa染色真菌组织血症，衣原体细菌，可以用来识别肥大细胞。

优势

• 随时可用，易于准备，维护和使用

限制

• 工作姬姆萨染色剂必须在使用前立即准备好。

参考文献

1. 染色技术：Kathleen P Freeman的Giemsa，Karen L Gerber：Vetstream
2. 护理人员;血液学应用/吉氏染色技术
3. Romanowsky污渍如何工作以及为什么他们保持有价值 - 包括拟议的普通罗马韦斯基机制和Horobin Rw./ncbi.nlm.nih.gov的理性故障排除计划

互联网资源

• 13%,https://en.wikipedia.org/wiki/Giemsa_stain
• 3%——http://pathonet.com/pathonet/education-stainings
• 1%——https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC540181/
• 1％ - https://clinicalgate.com/preparation-and-stainsaing-methods-for-blood-and-bone-marrow-films/
• <1％ - https://www.researchgate.net/publication/24346194_histopathology_for_the_diagnosis_of_infectious_diseases
• < 1%, https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1453983/
• <1％ - https：//chorline.americanchemisty.com/science-center/chorine-compound-of-tht-the-month-library/methyle-blue-part--chemists - indicator/
• <1％ - https://answers.yahoo.com/question/index?qid=20080712002122aaahrqk

Giemsa染色原理，程序，结果，解释