Hektoen肠琼脂

  • Hektoen肠内琼脂是一种选择性和差异化的培养基,设计用于分离和分化物种成员沙门氏菌而且志贺氏杆菌从其他肠杆菌科。
  • 这种媒介于1968年由西尔维娅·金和威廉·梅茨格提出。他们在芝加哥Hektoen研究所工作时,配制了HE琼脂培养基,以增加回收率沙门氏菌而且志贺氏杆菌从临床标本。

Hektoen肠琼脂

Hektoen肠内琼脂的组成

成分 Gms /升
蛋白酶蛋白胨 12.00
酵母提取物 3.000
乳糖 12.00
蔗糖 2.000
水杨苷 9.000
胆汁盐混合物 9.000
氯化钠 5.000
硫代硫酸钠 5.000
枸橼酸铁铵 1.500
酸碱性品红 0.100
溴麝香草酚蓝 0.065
琼脂 14.00

最终pH值(25°C): 7.5±0.2

Hektoen肠内琼脂原理

  • Hektoen enteric (HE)琼脂是一种依靠使用胆盐进行选择性抑制和两个指示系统的培养基:
    • 溴百里酚蓝和酸性品红作为碳水化合物异化的指标
    • 作为硫代硫酸盐形成硫化氢的指示物的铁。
  • HE琼脂可以很好地生长志贺氏杆菌因为胆盐对这些生物的抑制作用通过加入相对大量的蛋白胨和碳水化合物而减弱。
  • 该培养基提供了良好的菌落分化,并抑制了一些大肠菌群和其他非乳糖发酵细菌,从而有利于鉴定沙门氏菌而且志贺氏杆菌从食物产品。
  • HE琼脂由蛋白蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、乳糖、蔗糖、水杨苷、溴百里香酚蓝、酸性品红、硫代硫酸钠、柠檬酸铁铵、胆盐、琼脂和蒸馏水或去离子水组成。
  • 在他琼脂,沙门氏菌产生透明的绿色或蓝绿色菌落,有或没有黑色中心,看起来几乎完全是黑色菌落。
  • 志贺氏杆菌产生绿色、透明的菌落。当其他生物形成类似于沙门氏菌而且志贺氏杆菌需要进行生化和血清学确认试验。
  • 乳糖、蔗糖或水杨苷发酵革兰氏阴性菌产生鲑鱼色菌落。

Hektoen肠内琼脂的制备和使用方法

  1. 将72.66克悬浮在1000ml纯化/蒸馏水中。
  2. 加热至沸腾,使介质完全溶解。

注意:不要高压灭菌。

  1. 冷却至45 - 50°C。
  2. 混合均匀后倒入无菌培养皿。
  3. 用新鲜的接种培养基粪便悬浮在冒名顶替者直接用直肠拭子溶液或接种
  4. SpreaD接种物以获得分离良好的菌落
  5. Incubate在37°C下放置18-24小时
  6. FurtheR的孵化将促进分化沙门氏菌而且志贺氏杆菌

Hektoen肠内琼脂的结果解释

  • 快速乳糖发酵剂(如大肠杆菌)被适度抑制,并产生亮橙色到鲑鱼粉色的菌落。
  • 沙门氏菌菌落呈蓝绿色,典型的黑色中心来自硫化氢气体。
  • 志贺氏杆菌出现绿色的比沙门氏菌,颜色逐渐消退到蜂群的外围。
  • Proteus菌株受到一定程度的抑制;形成的菌落是小的透明的和更多的闪光或水的外观比种沙门氏菌志贺氏杆菌
生物 增长
沙门氏菌沙门氏菌感染 蓝绿色带黑色或不带黑色中心
沙门氏菌Abony 蓝绿色带黑色或不带黑色中心
沙门氏菌肠炎 蓝绿色带黑色或不带黑色中心
沙门氏菌伤寒 蓝绿色带黑色或不带黑色中心
大肠杆菌 橙色(可能有胆汁沉淀)
弗氏志贺菌 青蓝色的
志贺氏杆菌sonnei 成长好到优秀;殖民地亮绿色
普罗透斯 变异,蓝绿色到蓝色或鲑鱼色,大多数品系黑色中心或完全黑色
肠杆菌属、克雷伯氏菌 大型,黄色至橙黄色

Hektoen肠内琼脂的用途

  • Hektoen肠道琼脂培养基推荐用于鉴别和选择性分离沙门氏菌而且志贺氏杆菌根据美国药典从肠道病理标本中提取的物种。
  • 2009年美国药典推荐这种介质用于检测存在的沙门氏菌在膳食补充剂。
  • 这种介质推荐用于测试沙门氏菌在食品样品中采用各种标准。
  • HE琼脂目前被用作粪便标本的直接和间接镀膜介质,以提高菌种的回收率沙门氏菌而且志贺氏杆菌从大量的混合正常粪便菌群。
  • 它被用作胃肠道病原体恢复的电镀介质,如沙门氏菌而且志贺氏杆菌从怀疑含有这些生物体的食物、水和粪便样本中。

Hektoen肠内琼脂的局限性

  • 单一的培养基很少能够恢复样本中所含的所有病原体。因此,附加介质进行隔离沙门氏菌和/或志贺氏杆菌而且可能对其他肠道病原体必须接种标本。
  • 变形杆菌菌落在这种培养基上可能类似沙门氏菌。
  • 某些志贺氏杆菌菌株可能需要42至48小时的孵育。
  • 虽然某些诊断试验可以直接在这种培养基上进行,但为了完全鉴别,必须使用纯培养物进行生化和免疫试验。
  • 殖民地被怀疑是沙门氏菌志贺氏杆菌必须在生物化学和血清学上进行确认和鉴定。

参考文献

  1. http://www.austincc.edu/microbugz/hektoen_enteric_agar.php
  2. https://microbeonline.com/hektoen-enteric-agar-composition-principle-uses/
  3. http://www.himedialabs.com/TD/MU467.pdf
  4. https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0079635203800565
  5. https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8970
  6. http://www.oxoid.com/UK/blue/prod_detail/prod_detail.asp?pr=CM0419&org=124&c=UK&lang=EN

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