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实验室诊断的嗜肺性军团菌
标本:呼吸分泌物(痰、支气管吸出液或洗液)，以及胸膜液、肺活检或尸检材料。
显微镜
- 临床标本中的军团菌革兰氏染色效果差，细胞内的小细菌很少被识别。
- 生物体将用非特异性方法染色，如Dieterle银染色，但该染色用于组织标本，而不是痰。
- 在显微镜下检测临床标本中军团菌最灵敏的方法是使用直接荧光抗体检测，其中荧光素标记的单克隆或多克隆抗体针对军团菌物种。
- 使用单克隆试剂的试验具有特异性;然而，假阳性反应是常见的多克隆试剂。
- 不幸的是，DFA试验的敏感性很低，因为(1)抗体制剂是血清型或物种特异性的，(2)必须有许多生物体才能被检测。
- 后一个问题是细菌相对较小的体积和主要位于细胞内的结果。
- 由于DFA试验存在问题，在大多数实验室中，显微镜已被抗原检测试验所取代。
文化
- 在缓冲炭酵母提取物(BCYE)培养基上进行培养，添加或不添加抗生素以抑制其他呼吸道菌群。
- 可能被污染的物质，如痰或死后材料，也可以在50°C加热30分钟，以减少可能抑制培养中军团菌生长的热稳定性较差的呼吸道微生物的生长。
- 在严重感染中，BCYE培养基在36°C的空气中培养48小时后可能出现生长，最好是用2.5%的二氧化碳富集。
- 菌落直径为3 - 4mm，灰白色到蓝绿色，发光，凸，圆形，在平板显微镜下可能表现为切割玻璃型内部颗粒斑点菌落，具有“切割玻璃”外观，那些在紫外线下发出蓝白色荧光的菌落被革兰氏染色，并传代到血琼脂或半胱氨酸缺乏的培养基上，以表明它们会不在这些媒体上成长。
- 培养物通过免疫荧光试验中使用特异性抗血清或通过基因测序进行鉴定。
抗原检测
- 快速检测军团菌用酶免疫分析(EIA)和免疫层析法测定了尿液和其他体液中的抗原。
- 抗原可能在前驱症状期和症状出现后3天出现。
- 用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测尿液中的军团菌抗原是一种快速、特异的鉴别方法退伍军人可能是肺炎的原因。
- 现在，大多数军团菌感染都是通过尿液抗原检测来诊断的，但未能检测到尿液抗原并不排除军团菌感染l瞭解血清组1。
血清学
- 尽管抗体在感染发生后至少需要8天才能产生，但一些患者可能直到这段时间过去才到医院，因此值得检查血清中的抗体l瞭解在入院时
- 每隔一段时间应进一步采集血清，以显示抗体的发展或抗体滴度的上升。
- 抗体通常在发病8-10天后产生，然后滴度增加，但一些患者可能在几周或很少几个月后才产生抗体。
- 在典型的临床病例中，抗体滴度上升4倍或更多表明感染
- 单个滴度大于或等于256则推定为感染。
- 大多数军团菌病患者都是通过检测抗-抗体上升四倍来进行回顾性诊断的军团菌用间接荧光抗体(IFA)检测抗体。
- 血清标本的检测间隔不应超过2周。
- 随着急性期和恢复期配对血清的收集和检测，与血清学检测相关的诊断效果增加。
- 应在疾病出现后的4、6和12周收集恢复期血清。
- 当滴度上升四倍至128以上时，疾病就被证实了。
- 如果一份血清的效价大于256，且临床表现具有特征性，则可以推定为军团病;然而，由于多达12%的健康人滴度高达1:6 6 6，因此强烈不鼓励这种做法。
核酸扩增
- 分子方法主要以研究为基础，在参考和公共卫生实验室中越来越可用。
- BD Probe Tec检测仅适用于痰标本并检测血清型。
- 直接检测军团菌通过常规和实时聚合酶链式反应(PCR)检测核酸，有可能提供快速结果，并比现有方法提高呼吸和尿液样本的灵敏度。
军团病的治疗
- 静脉注射大环内酯(通常是阿奇霉素)是标准的治疗方法军团菌
- 在严重的情况下，通常添加氟喹诺酮类药物(通常是环丙沙星)或利福平。
- 氨基糖苷类和β-内酰胺类抗生素无效。
- 大环内酯类(红霉素、阿奇霉素、特利霉素和克拉霉素)、喹诺酮类(环丙沙星和左氧氟沙星)和四环素类(多西环素)是有效的。
- 根据临床情况，可能需要延长治疗，最长可达3周。
- 在患者发热48-72小时之前，不应停止治疗。
军团病的预防和控制
- 军团菌病的预防需要确定微生物的环境来源和减少微生物负担。
- 对供水进行高氯化处理和维持较高的水温已证明是相当成功的。
- 由于单个军团菌病病例可能反映更大规模的爆发，临床诊断往往是预防的关键第一步。