梅毒螺旋体所致梅毒的实验室诊断

实验室诊断梅毒所致梅毒螺旋体

标本

  • 从溃疡和损伤处收集的样本不应被血液、微生物或组织碎片污染。
  • 聚合酶链反应(Polymerase chain reaction, PCR)样品应采用无菌涤纶或棉签采集,并置于含有核酸转运介质或通用转运介质的冷冻管中。
  • 淋巴结组织或针吸液应置于10%缓冲福尔马林室温下。
  • 对于先天性梅毒,收集一小段脐带,并将其固定在福尔马林中或冷藏直至处理。
  • 血清是血清学的首选标本。
  • 脑脊液(CSF)

显微镜

  • t .螺旋体太薄了,用光学显微镜无法看到,因此必须使用暗场显微镜或特殊的荧光染色。
  • 通过暗视野显微镜检查皮肤病变的渗出物以诊断原发性、继发性或先天性梅毒。
  • 直接荧光抗体试验是一种比较有用的检测方法t .螺旋体。
  • 在DFA-TP中,使用荧光素标记的抗梅毒单克隆抗体对细菌进行染色。
  • DFA-TP用荧光素异硫氰酸酯(FITC)标记的抗体在载玻片上显示标本t . pallidurn外观明显,轮廓清晰,苹果绿色荧光色杆菌。

图:梅毒螺旋体在直接荧光抗体测试中文化

  • 文化的努力t .螺旋体不应尝试体外培养,因为有机体不能在人工培养中生长。

核酸检测

  • 已发展了核酸扩增试验(即聚合酶链反应[PCR])用于检测t .螺旋体在生殖器病变、婴儿血液和脑脊液(CSF)中,但只在研究或参考实验室中提供。
  • 用分子方法直接检测临床资料中的螺旋体脱氧核糖核酸(DNA),在诊断疑难梅毒或不典型病例中可能有未来的作用。

血清学

  • 梅毒螺旋体病的血清学试验测定两种类型的抗体:梅毒螺旋体抗体和非梅毒螺旋体抗体。
  • 密螺旋体抗体是针对生物体本身的抗原产生的,而非密螺旋体抗体,通常被称为reagin抗体,是在感染患者体内产生的针对哺乳动物细胞成分的抗体。

梅毒螺旋体所致梅毒的实验室诊断

非特异性抗体检测/非梅毒螺旋体抗体检测

  • 非密螺旋体试验测量免疫球蛋白(IgG)和IgM抗体(也称为免疫抗体),这些抗体是针对疾病早期受损细胞释放的脂质的,出现在密螺旋体的细胞表面。
  • 用于非梅毒螺旋体检测的抗原是心脏磷脂,它是从牛肉心脏中提取的。
  • 非梅毒螺旋体试验被普遍用作梅毒的筛查试验和检查治疗效果。

a) VDRL(性病研究实验室)检测

  • 测定量的心磷脂抗原取管或载玻片
  • 血清加热使补体失活
  • 被称为reagin的抗心磷脂抗体(IgG, IgM或IgA)与心磷脂抗原反应,通过试管或载玻片上的液体絮凝显示。

b) RPR (Rapid Plasma regin)检测

  • 血清不加热灭活补体。
  • 在RPR中,添加氯化胆碱以防止补体。
  • 玻片絮凝观察。

c)甲苯胺红未加热血清试验(TRUST)

  • TRUST抗原悬液与VDRL抗原相同,但含有甲苯胺红色素。
  • 当样本中含有抗体时,TRUST抗原会凝集,反应在测试卡的白色背景下出现红色团块。
  • 如果抗体不存在,试验混合物仍然是淡红色,没有凝集发生。

d)未加热血清恢复试验(USR)

  • USR与VDRL相似,只是用EDTA作为抗原稳定剂。
  • 氯化胆碱用于抑制血清中的非特异性抑制剂。

特异性抗体检测/密螺旋体抗体检测

答:Microhemagglutination梅毒螺旋体(MHA-TP)测试

  • 在MHA- TP中,加热的血清与超声处理的非致病性Reiter菌株混合,并与涂有超声处理的绵羊红细胞孵育梅毒螺旋体尼科尔斯菌株在微量滴定板上。
  • 如果抗体梅毒螺旋体出现时,它们与致敏的红细胞反应,产生一层均匀薄的凝集细胞层,覆盖整个井底。

B。梅毒螺旋体红细胞凝集试验(TPHA)

  • TPHA是一种间接的血凝试验,当暴露于阳性患者血清时,使用致敏的红细胞聚集。
  • 在该测试中,T。螺旋体抗原被包裹在红细胞表面,测试血清中的特定抗体引起血凝。

C。梅毒螺旋体粒子凝集(TPPA)

  • 苍白球颗粒凝集(TPPA)试验原理与TPHA相同,但密螺旋体抗原是涂在彩色明胶颗粒上,而不是涂在红细胞上。

D.荧光梅毒抗体被吸收(FTA abs)

  • 患者血清与吸附剂/吸收剂混合(测试的“ABS”部分)。
  • 该吸附剂含有非致病性密螺旋体的提取物,梅毒phagedenis生物型立达。
  • 这种吸收剂的目的是去除对梅毒细菌没有特异性的抗梅毒抗体。
  • 将病人的血清分层在先前涂有灭活T
  • 然后应用荧光素结合的抗人抗体试剂作为患者血清中特异性抗梅毒螺旋体抗体的标记物,然后在荧光显微镜下检查载玻片。

e .酶lmmunoassays

  • 已研制出用于梅毒诊断的特异性IgG和IgM ELISA试剂盒。
  • 它们具有极好的敏感性和特异性。
  • IgM ELISA诊断先天性梅毒较IgM FTA-ABS敏感。

f .免疫印迹

  • 免疫印迹法可分别检测lgG和IgM抗体。
  • 它具有高度的敏感性和特异性。

g类属特异性的测试

  • 瑞特蛋白补体固定试验(RP-CFT):
    • 它的工作原理是CFT。
    • 检测组或属特异性密螺旋体抗体,对抗可培养的瑞特菌株制备的蛋白抗原。
    • 它的灵敏度很低,现在已经过时了。

治疗梅毒

  • 不能培养密螺旋体,因此不进行药敏试验。
  • 青霉素是治疗的首选药物t .螺旋体感染。
  • 长效苄星青霉素用于早期梅毒,青霉素G用于先天性和晚期梅毒。
  • 除早期梅毒外,头孢曲松在大多数梅毒病例中也高度活跃。
  • 强力霉素或四环素或红霉素或氯霉素可作为青霉素过敏患者的替代抗生素。
  • 然而,治疗方法因疾病阶段和宿主(如儿童或成人、艾滋病毒感染者或先天梅毒感染者)而异。
  • 只有青霉素可用于治疗神经梅毒。因此青霉素过敏患者必须进行脱敏。
  • 对于不应该使用四环素治疗的孕妇来说也是如此。

预防和控制梅毒

没有保护性疫苗,因此预防和控制可以通过

  • 病例和接触者(性伴侣)的治疗
  • 关于安全性行为的教育
  • 预防性使用屏障避孕方法

实验室诊断、治疗、预防和控制引起的梅毒梅毒螺旋体

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