目录
脂肪酶测试的目标
- 目的是鉴定能够产生脱酶脂肪酶的细菌。
- 脂肪酶试验用于检测和枚举脂肪溶解细菌，特别是在高脂肪乳制品中。
- 各种其他脂质衬底，包括玉米油，橄榄油和大豆油，用于检测成员之间的差异特征enterobacteriaceae.那Clostridium.那葡萄球菌， 和奈梅里亚。
- 几种真菌物种也表现出脂肪溶解能力。
脂肪酶测试原理
脂肪由酯连杆形成的三分三分脂肪酸和一个甘油分子。简单的脂肪被称为甘油三酯或三酰基甘油。甘油三酯由甘油和三个长链脂肪酸组成。将简单脂肪分成其组分脂肪酸和甘油的酶称为脂肪酶。许多细菌可以根据其产生和分泌脂肪酶的能力来分类。可以使用各种简单的脂肪来实现这种测定，具体取决于所测试的生物的类型;然而，Tributyrin是最简单的天然存在的甘油三酯，因此是脂肪酶测试介质的常见组成部分。
Tributyrin太大而不能进入细胞，因此在细胞摄取之前释放脂肪酶以将其分解。水解后，甘油可以转化为二羟基丙酮磷酸酯，糖醇的中间体。脂肪酸通过称为β-氧化的方法分解，并且可以转化为可被能量生产或其他过程中的细胞使用的各种最终产物。Tributyrin油是一种称为甘油三酯的脂质。其他脂肪酶测试使用不同的脂肪来源，如玉米油，橄榄油，花生油，蛋黄和大豆油。
Tributyrin琼脂是一种差异介质，其测试生物体产生exo-酶的能力，称为水解呋喃林油的脂肪酶。Tributyrin琼脂制备为乳液，使琼脂显得不透明。当用脂肪酶阳性生物体接种板时，将在生长周围出现透明区域作为脂肪酶活性的证据。如果没有明显的区域，有机体是脂肪酶阴性的。
脂肪酶测试中使用的媒体
Tributyrin琼脂：动物组织的消化物消化5.0 GM / L，酵母提取物3.0 GM / L，琼脂15.0GM / L，最终pH（25°C）7.5±0.2
脂肪酶测试程序
- 用单线线圈接种Tributyrin琼脂培养基。
- 在将脉袋罐中刺穿并转移到35-37的培养箱中立即孵育O.C对于Anaerobes和Aerobes的24-48小时，在35-37℃孵育板O.C 24-48小时。
- 观察细菌生长周围的透明区域。
脂肪酶测试的解释
阳性脂肪酶测试：细菌生长周围清晰的区域
阴性脂肪酶测试：在细菌生长周围没有透明区域
脂肪酶测试的局限性
- 不透葡萄糖发酵杆的不透明度区域。
- 一些微生物可能需要最多需要1周才能产生阳性脂肪酶反应。
脂肪酶测试的质量控制
金黄色葡萄球菌ATCC 25923，核心周围的阳性，清澈的区域
产气荚膜梭菌ATCC 12924，负面，在殖民地周围没有清晰的区域
Clostridium Sporogenes.ATCC 11437，积极，污水区周围殖民地。
参考资料和来源
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