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脂质水解试验的目标
- 确定生物体水解脂质的能力。
- 鉴定能够产生脱酶脂肪酶的细菌。
脂质水解试验原理
脂质通常是在水中不溶于良好的非极性分子。脂肪是一种类型的脂质,其是脂肪酸和甘油的大型聚合物,其太大而不能进入细胞膜。为了利用脂肪,细菌细胞分泌exozymes.被称为脂肪酶以外的细胞外,将脂质水解给脂肪酸和甘油。能够产生脱酶脂肪酶的这些细菌称为脂肪溶解细菌。脂质形成乳液,当琼脂分配时,产生不透明度,同时其水解的最终产物,甘油和脂肪酸不会形成这种乳液,它们不会产生这种不透明度。相当产生透明度。
在脂质水解试验中,测试细菌在含有Tributyl作为脂基底的琼脂平板上生长。Tributyrin油在琼脂培养基中形成不透明的悬浮液。如果细菌具有水解脂质的能力,则细菌菌落在围绕其溶解甘油和脂肪酸(丁酸)的区域中的培养基中将呋喃啉水解,而板块的其余部分含有未脱水的呋喃蛋白。水解的结果作为菌落周围的透明透明区域,并且板的其余区域保持不透明,这表明未脱水的呋喃丁区域。
脂质水解试验中使用的介质
Tributyrin琼脂:动物组织的消化物消化5.0 GM / L,酵母提取物3.0 GM / L,琼脂15.0GM / L,最终pH(25°C)7.5±0.2
脂质水解试验的程序
- 用单线条纹接种呋喃林琼脂培养基
- 立即在烧结后立即在燃气PAK罐中孵育并转移到35-37的培养箱中O.C对于Anaerobes和Aerobes的24-48小时,在35-37℃孵育板O.C 24-48小时。
- 观察细菌生长周围的透明区域。
脂质水解试验的结果解释
- 阳性测试:细菌生长周围清除区域。
- 负面测试:在细菌生长周围没有清晰的区域。
脂质水解试验的质量控制
产气荚膜梭菌ATCC 12924 - 负测试,群体周围缺乏清晰区
Clostridium Sporogenes.ATCC 11437 - 正面测试,殖民地附近的清晰区
枯草芽孢杆菌ATCC 6633 - 菌落周围的阳性测试
奇妙