赖氨酸铁琼脂

赖氨酸铁琼脂(LIA)是一种用于测试生物体脱胺赖氨酸或脱羧赖氨酸能力的差异培养基。赖氨酸脱氨是一个好氧过程，发生在培养基的倾斜。赖氨酸脱羧是发生在培养基尾部的厌氧过程。

爱德华兹和法夫在1961年设计了LIA来推测沙门氏菌物种，包括乳糖发酵沙门氏菌亚洲人，这一切涉及胃肠炎的食源性爆发。

赖氨酸铁琼脂（LIA）的组成

原料	Gms /升
蛋白胨	5.000
酵母提取物	3.000
葡萄糖（葡萄糖）	1.000
赖氨酸	10.00
柠檬酸铁铵	0.500
硫代硫酸钠	0.040
溴甲酚紫	0.020
琼那	15.000

最终pH值(25°C): 6.7±0.2

赖氨酸铁琼脂原理（LIA）

• 赖氨酸铁琼脂含有赖氨酸，百分点，少量葡萄糖，柠檬酸铁铵和硫代硫酸钠。
• 培养基有一种好氧倾斜和厌氧屁股。介质被刺伤到杆的底部并在倾斜上划线。
• 当发酵葡萄糖时，培养基的对接成为酸性（黄色）。
• 如果生物体产生赖氨酸脱羧酶，就形成尸胺。尸胺中和由葡萄糖发酵形成的有机酸，介质的末端恢复到碱性状态(紫色)。
• 如果不产生脱羧酶，则对接保持酸性（黄色）。
• 如果发生赖氨酸的氧化脱氨酸，则形成化合物，在柠檬酸铁铵存在下，在柠檬酸铵的存在下，黄蛋白单核苷酸在倾斜上形成勃艮第的颜色。
• 如果没有发生脱胺，则Lia倾斜仍然是紫色的。溴甲酚紫，pH指示剂，在pH5.2处或低于pH 5.2或紫色pH 6.8的紫色。

蛋白胨和酵母提取物提供必要的营养素。葡萄糖是可发酵碳水化合物的来源。柠檬酸铁和硫代硫酸钠是h的指标₂S形成。产生硫化氢的培养物引起介质的黑化引起的硫化物生产。

赖氨酸铁琼脂的制备及使用方法（LIA）

1. 将34.56克悬浮在1000ml蒸馏水中。
2. 加热至沸腾，使介质完全溶解。
3. 分配到管和灭菌通过高压灭菌在15磅压力(121°C) 15分钟。
4. 将管子冷却在倾斜位置，形成斜槽的倾斜。
5. 通过直接接种针，通过介质的中心到管的底部，将Lia两次刺伤，然后将倾斜条纹刺伤。
6. 将试管盖紧，在环境空气中35°-37°C孵育18至24小时。
7. 在18 - 24小时和40 - 48小时检查管臀和管斜的生长和颜色变化，以及管斜的顶端发黑。

结果解释赖氨酸铁琼脂（LIA）

生物	生长
Citrobacter Freundii.	华丽的增长;对接:酸性反应，介质变黄;倾斜:碱性反应，呈紫色或无颜色变化;h的正反应2S，介质变黑
大肠杆菌	华丽的增长;屁股：碱性反应，紫色或无颜色变化;倾斜:碱性反应，呈紫色或无颜色变化;H的负反应2S.
Proteus mirabilis.	华丽的增长;对接:酸性反应，介质变黄;偏:深红色，赖氨酸脱氨;h的正反应2S，介质变黑
沙门氏菌Arizonae	华丽的增长;屁股：碱性反应，紫色或无颜色变化;倾斜:碱性反应，呈紫色或无颜色变化;h的正反应2S，介质变黑
Salmonella Entnitidis.	华丽的增长;屁股：碱性反应，紫色或无颜色变化;倾斜:碱性反应，呈紫色或无颜色变化;h的正反应2S，介质变黑
Salmonella typhimurium.	华丽的增长;屁股：碱性反应，紫色或无颜色变化;倾斜:碱性反应，呈紫色或无颜色变化;h的正反应2S，介质变黑
Shigella Flexneri.	华丽的增长;对接:酸性反应，介质变黄;倾斜:碱性反应，呈紫色或无颜色变化;H的负反应2S.

赖氨酸铁琼脂的用途（LIA）

• 推荐用于肠道生物的分化，基于其脱羧酸或脱胺赖氨酸和形成硫化氢(H2S)的能力。
• 该培养基是一种敏感介质，用于检测乳糖发酵和乳糖非发酵沙门氏菌
• 琼脂特别适用于区分不同的革兰氏阴性杆菌 - 特别是在肠杆菌膜中。
• 蛋白质和Providencia物种可以在这种培养基上推定，因为它们产生一个红色的斜面和一个碱性的屁股。

赖氨酸铁琼脂（LIA）的局限性

• 建议对来自纯培养的菌落进行生物化学，免疫，分子或质谱测试以完全鉴定。
• 刺伤介质的屁股很重要。未能刺伤映射无效此测试。
• 与其他含铁介质相比，LIA在检测硫化氢时不像硫化铁吲哚运动（SIM）培养基和TSIA一样敏感。
• 蛋白质产生硫化氢的物质不会使介质变黑。
• 某些菌种或菌株可能产生延迟反应或完全不能按规定的方式发酵碳水化合物。
• 气体生产可能是不规则或抑制的生物体以外的生物枸橼酸杆菌属SPP。

参考文献

1. http://himedialabs.com/TD/M377.pdf
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