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赖氨酸铁琼脂试验的目的
基于脱羧或赖氨酸的脱氨基分化革兰氏阴性杆菌和硫化氢的形成（H.2s）。
赖氨酸铁琼脂试验原理
赖氨酸铁琼脂（LIA）含有赖氨酸，辣椒，少量葡萄糖，柠檬酸铁铵和硫代硫酸钠。培养基有一种好氧倾斜和厌氧屁股。赖氨酸脱氨酸是一种在介质的倾斜上发生的有氧过程。赖氨酸脱羧是一种发生在介质的对接中的厌氧过程。LIA中的指标是紫色紫色。溴甲酚紫，pH指示剂，在pH5.2处或低于pH 5.2或紫色pH 6.8的紫色。当发酵葡萄糖时，培养基的对接成为酸性（黄色）。如果生物体产生赖氨酸脱羧酶，则形成卤素。狍子中和通过葡萄糖发酵形成的有机酸，并且培养基的对接恢复到碱性状态（紫色）。如果不产生脱羧酶，则对接保持酸性（黄色）。 Organisms that deaminate lysine, form alpha – ketocarboxylic acid, which reacts with iron salt near the surface of the medium under the influence of oxygen to form reddish-brown compound. If deamination does not occur, the LIA slant remains purple. Sodium thiosulfate is incorporated into this medium as the source of hydrogen sulfide and acts as the substrate for enzymatic reduction and the resultant colorless hydrogen sulfide gas reacts with ferric ammonium citrate to produce ferrous sulfide, an insoluble black precipitate that blackens the medium.
赖氨酸铁琼脂试验培养基
| L-赖氨酸盐酸盐 | 10.0通用 |
| 蛋白胨 | 5.0通用 |
| 酵母抽提物 | 3.0克 |
| 葡萄糖 | 1.0克 |
| 枸橼酸铁铵 | 0.5克 |
| 硫代硫酸钠 | 0.04克 |
| Bromcresol紫色 | 0.02克 |
| 琼那 | 15.0通用 |
最终pH 6.7 +/- 0.2在25ºC。
赖氨酸铁琼脂测试的程序
- 通过直接接种针，通过将介质的中心刺到管的底部，然后在取出针头时将倾斜旋转，接种LIA。
- 在35-37℃下含有松散的帽子孵育管18-48小时并检查培养基的反应。
赖氨酸铁琼脂试验的结果解释
赖氨酸脱羧(在对接检测):
阳性测试：紫色倾斜/紫色对接（碱性），对接反应可以通过H2S生产掩盖
负面测试:紫色斜面/黄色屁股(酸性)，仅发酵葡萄糖
赖氨酸脱胺(斜面检测):
阳性测试：红色倾斜
负面测试:倾斜仍然是紫色
硫化氢生产:
阳性测试：黑色的沉淀
负面测试:无黑色显影
天然气生产：通过培养基中的气泡或裂缝的存在证明
赖氨酸铁琼脂测试的局限性
- 建议对来自纯培养的菌落进行生物化学，免疫，分子或质谱测试以完全鉴定。
- 捅媒体的屁股是很重要的。如果无法插入对接，则此测试无效。刺时必须保持琼脂的完整性。在测试过程中必须松开瓶盖，否则将产生错误结果。
- 与其他含铁介质相比，LIA在检测硫化氢时，LIA在检测硫化氢中，例如硫化物吲哚运动（SIM）培养基和TSIA。H2S生产可能没有看到不产生赖氨酸脱羧酶的生物，例如Proteus SPP。，因为对接中的酸可以抑制H2S形成。
- 某些物种或菌株可以给予延迟反应或完全不能以规定的方式发酵碳水化合物。然而，在大多数情况下，如果生物体未在48小时内未能发酵葡萄糖，并且肯定存在生长，则生物体很可能不在肠杆菌痤疮家族中。
- 与摩氏摩根氏菌的倾斜反应在24小时的培养后可能是可变的，可能需要更长时间的培养。
- 气体生产可能是不规则或抑制的生物体以外的生物枸橼酸杆菌属spp。
- 沙门氏菌血清塞洛娃Paratyphi A.不产生赖氨酸脱羧酶。
赖氨酸铁琼脂试验的质量控制
紫色斜面，黄色对接:H2S阳性:Citrobacter Freundii.（ATCC8090）
紫色倾斜和屁股，H2S阴性：大肠杆菌（ATCC25922）
紫色斜臀，H2S阳性:沙门氏菌Typhimurium（ATCC14028）
红斜黄臀，H2S阴性:Proteus mirabilis.（ATCC12453）
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