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MacConkey琼脂是第一个固体微分介质,由阿尔弗雷德·西奥多·麦康基在20世纪开发。麦康凯琼脂是最早用于大肠菌群培养的选择性和差异培养基。它用于非挑剔的革兰氏阴性杆菌的分离和分化,特别是肠杆菌科和属的成员假单胞菌.
MacConkey琼脂的组成
成分 | 数量 |
蛋白胨(明胶的胰腺消化剂) | 17克 |
蛋白质蛋白胨(肉和酪蛋白) | 3克 |
乳糖一水 | 10通用 |
胆汁盐 | 1.5通用 |
氯化钠 | 5通用 |
中性红 | 0.03通用 |
结晶紫 | 0.001通用 |
琼脂 | 13.5通用 |
MacConkey琼脂原理
明胶和蛋白胨(肉类和酪蛋白)的胰腺消化提供微生物生长所需的基本营养素、维生素和含氮因子。一水乳糖是碳水化合物的可发酵来源。这种培养基的选择性作用归因于结晶紫和胆盐,它们对大多数革兰氏阳性细菌具有抑制作用。氯化钠维持介质中的渗透平衡。
乳糖发酵菌株生长为红色或粉红色。红色是由于乳糖产生酸、吸收中性红以及介质pH值低于6.8时染料的后续颜色变化。非乳糖发酵细菌,如沙门氏菌,普罗透斯,铜绿假单胞菌和志贺菌不能使用乳糖,将使用蛋白胨。这就形成了氨,它提高了琼脂的pH值,并导致在平板上形成白色或无色的菌落,细菌周围的琼脂保持相对透明。这些蜂群看起来也可能是金黄色到棕色的,中间是深色的。
乳糖在培养基中可以被其他糖替代,替代糖可以用来测试革兰氏阴性菌发酵替代糖的能力。例如,山梨糖醇可作为麦康基琼脂的替代糖,以协助肠道致病菌的分离和分化大肠杆菌血清型,如大肠杆菌O157:H7,通过存在非山梨醇发酵的白色圆形菌落。
MacConkey琼脂的制备
- 将49.53克脱水培养基悬浮于1000ml蒸馏水中。
- 加热至沸腾,使介质完全溶解。
- 在15磅压力(121°C)下高压灭菌15分钟。
- 冷却至45°C-50°C。
- 倒入无菌培养皿前充分混合。
结果麦康基琼脂释义
生物 | 增长结果 |
大肠杆菌 | 粉红色至玫瑰红菌落(可能被胆汁沉淀区包围) |
肠杆菌 | 黏液状的,粉红色的殖民地 |
普罗透斯 | 无色的菌落,成群生长 |
沙门氏菌、志贺氏杆菌 | 无色菌落,有时为中等颜色:橙色至琥珀色 |
假单胞菌 | 不规则,无色到粉红色的菌落 |
麦康基琼脂的用途
- 麦康凯琼脂用于革兰氏阴性肠道细菌的分离。
- 它用于区分乳糖发酵的革兰氏阴性菌和乳糖非发酵的革兰氏阴性菌。
- 它用于食品的微生物检验和直接电镀/接种水样进行大肠菌群计数。
- 用于牛奶和奶制品的检验。
- 英国药典推荐这种培养基用于传代培养和鉴定细菌大肠杆菌。
麦康凯琼脂的局限性
- 所描述的群体特征仅能对分离的生物体进行假定鉴定。为了最终鉴定,需要进行传代培养和生化等其他确认试验。
- 有些菌株可能会在这种培养基上生长不良或不能生长。
- 有报道称,在CO2增加的条件下,麦康基琼脂平板的培养可降低一些革兰氏阴性杆菌的生长和恢复。
- 一些变形杆菌菌株可能在这种培养基上聚集。
工具书类
- https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/Content/hugo/MacConkeyAgar.htm
- http://www.himedialabs.com/TD/M081B.pdf
- http://www.himedialabs.com/TD/M008S.pdf
- https://www.teknova.com/category-s/504.htm
- http://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8978
- https://microbeonline.com/macconkey-agar-mac-composition-preparation-uses-and-colony-characteristics/
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它是有帮助的。但如果麦康凯琼脂有黑色殖民地呢?
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