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丙二酸盐测试的目的
- 测试生物利用丙二酸作为唯一碳源的能力。
- 丙二酸盐测试最初是为了区分埃希氏杆菌属,它不会在介质中生长,并且肠杆菌属.
- 它作为鉴别培养基的用途现在已经扩大到包括肠杆菌科的其他成员。
丙二酸盐测试原理
同时利用丙二酸钠作为碳源和硫酸铵作为氮源的生物由于形成氢氧化钠而产生碱性。丙二酸利用试验的培养基为丙二酸肉汤。它含有矿物盐、碳的丙二酸钠和氮的硫酸铵。pH指示剂是溴百里酚蓝,在中性p点是绿色的H,黄色在酸性pH<6.0并在碱性(基本)p下蓝色H> 7.6。有机物同时利用丙二酸和硫酸铵产生氢氧化钠,从而导致碱性反应,并使指示剂从原来的绿色变成浅蓝色或普鲁士蓝。不能利用丙二酸和硫酸铵以及不发酵葡萄糖的生物不会产生颜色变化。丙二酸阴性的生物体,但确实发酵葡萄糖,导致发展黄色的颜色,由于增加酸度的培养基。
丙二酸盐试验用培养基
丙二酸肉汤(1000 ml)
丙二酸酯钠 | 3.0通用 |
硫酸铵 | 2.0通用 |
氯化钠 | 2.0通用 |
酵母提取物 | 1.0通用 |
磷酸钾 | 0.6通用 |
磷酸二氢钾 | 0.4gm. |
葡萄糖 | 0.25gm. |
溴麝香草酚蓝 | 0.025通用 |
最终pH 6.7 +/- 0.2,25ºC。
丙二酸酯试验的程序
- 用18-24小时的生物体接种含有丙酸盐液的管。
- 将帽帽松动的试管在35ºC有氧环境中培养24-48小时。
- 观察介质的颜色变化。
结果丙二酸酯试验解释
积极的测试:在培养基中显影一种蓝色
负面测试:由于葡萄糖发酵,介质仍然是绿色的或变黄
丙二酸盐试验的局限性
- 试验生物必须是在纯培养和18-24小时。
- 一些丙二酸盐阳性的生物体只产生轻微的碱度,这使得解释困难。可疑和可疑的结果应与未接种的丙二酸管进行比较。任何蓝色的痕迹都表明孵育48小时后检测呈阳性
- 酵母提取物和葡萄糖是刺激某些植物生长所必需的沙门氏菌
生物体,但对其他物种来说通常不是必需的。
丙二酸酯检测的质量控制
Klebsiella肺炎,ATCC13883-阳性试验,肉汤变成深蓝色。
大肠杆菌, ATCC25922-阴性,肉汤保持绿色。