麦克法兰标准-原则,准备,用途,限制

什么是麦克法兰标准?

麦克法兰标准作为参考,以调整液体/细菌悬液在小瓶或试管在微生物实验室的浊度。它有助于维持和/或确保细菌的数量将在一个给定的范围内,以标准化微生物测试。McFarland标准品的浓度可从0.5到4不等,根据浓度的不同,细胞计数密度也不同。然而,最常用的浓度为抗菌药物敏感性试验文化传媒性能测试通常在微生物实验室按0.5麦克法兰标准进行。

麦克法兰标准原则

麦克法兰标准是氯化钡和硫酸的化学溶液。这两种化学物质之间的化学反应产生了硫酸钡的细沉淀物。摇匀后,麦克法兰标准的浊度在视觉上可与已知浓度的细菌悬浮液相媲美。麦克法兰浊度标准品是将不同体积的1%硫酸和1%氯化钡混合,得到具有特定光密度的溶液。通过调节这两种化学试剂的体积,可以制备不同浊度的麦克法兰标准品,代表不同的细菌密度或细胞计数。0.5麦克法兰浊度标准提供的光密度可与1.5 × 10^8菌落形成单位(CFU/ml)的细菌悬浮液密度相媲美。

麦克法兰标准-原则,准备,用途,限制

图片来源:Bioanalytic GmbH是一家

麦克法兰标准

1%氯化钡(毫升)

1%硫酸(毫升)

近似细胞计数密度(x10^8细胞)

0.5 0.05 9.95 1.5 x 10 ^ 8
1.0 0.1 9.9 3.0 x 10 ^ 8
2.0 0.2 9.8 6.0 x 10 ^ 8
3.0 0.3 9.7 9.0 x 10 ^ 8
4.0 0.4 9.6 12.0 x 10 ^ 8

麦克法兰标准的制定

  1. 制备1%无水氯化钡(BaCl2)和1%硫酸(H2SO4)溶液
  2. 将氯化钡和硫酸溶液混合并完全混合,形成浑浊的悬浮液。
  3. 将产生的混合物放入箔盖螺旋盖管中。
  4. 不使用时,在室温(25°C)下保存麦克法兰标准。麦克法兰标准密度溶液会随着时间的推移而沉淀和结块,在每次使用前都需要剧烈搅拌(旋涡)或摇动。注:在管上做记号,标明液位,使用前检查,确保没有蒸发。
  5. 在良好的光照下,将细菌样本和麦克法兰标准试管与附在卡片上的黑白条对比,直观地比较浊度。
  6. 在浊度较重的情况下,通过无菌移液管添加肉汤或盐水,调整细菌悬液的对数生长的浊度,使其与已知的麦克法兰等效标准的浊度匹配。
  7. 如果试验悬浮液太轻,用其他微生物接种或用试管培养,直到浊度符合标准。

麦克法兰标准的使用

  1. 它用于抗菌药物敏感性测试程序,细菌悬液与标准麦克法兰比较,然后擦拭MHA培养基。
  2. 检测和调节菌悬液浓度是质量控制的一部分,可用于菌悬液的鉴定和药敏程序。

麦克法兰标准的局限性

  1. 在有色介质的情况下,它可能不能提供适当的对比与麦克法兰等效标准发生不正确的结果或不正确的密度。
  2. 旧培养物(>24小时)的细菌悬液可能无法与预期的细菌计数相比。
  3. 麦克法兰标准已经通过分光光度计分析进行了调整。在测试过程中,使用任何其他仪器都不能给出可靠的结果。
  4. 当使用乳胶标准,悬挂管应该是相同直径的麦克法兰乳胶标准管。
  5. 在贮存时间内,麦克法兰标准品暴露于光下会影响浊度测量。

参考文献

  1. 麦克法兰J(1907)。浊度计:用作培养基的仪器,用来估计悬浮液中细菌的数量,用以计算调理指数和疫苗。J Am Med Assoc 14:1176-1178。
  2. Dalynn生物制剂(http://www.dalynn.com/dyn/ck_assets/files/tech/TM53.pdf)
  3. Himedia (http://himedialabs.com/TD/R092.pdf)
  4. Pro-Lab诊断(https://www.pro-lab.com/wp-content/uploads/2017/01/SD2300-SD2350_en.pdf)
  5. Becton, Dickinson, and Company (https://legacy.bd.com/europe/regulatory/Assets/IFU/US/8808421(0205)_en.pdf)

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