改良的塞尔·马丁琼脂

塞耶和马丁报告说巧克力琼脂配方中含有抗菌素万古霉素,粘菌素和制霉菌素,以减少污染物的过度生长,抑制腐生植物的生长奈瑟氏菌属并能促进致病性奈瑟菌的生长。Martin和Lester后来添加了抗生素甲氧苄氨嘧啶,使培养基更具选择性,并显示出在抑制变形杆菌方面的价值普罗透斯群集。由此产生的介质被称为改良的塞耶马丁。它是一种选择性富集培养基,用于分离和培养奈瑟氏菌属来自混合菌群的Sp.,抑制大多数其他革兰氏阴性双球菌、革兰氏阴性杆菌、革兰氏阳性有机体和酵母。

改良的塞尔·马丁琼脂

图片来源:Hardy Diagnostic

作文

成分
酪蛋白胨 7.5克
肉胨 7.5克
玉米淀粉 1.0克
磷酸钾 4.0克
磷酸二氢钾 1.0克
氯化钠 5.0克
琼脂 12.0克
血红蛋白溶液 10.0克
IsovitaleX浓缩 10.0毫升
万古霉素 300μg
粘菌素 750μg
制霉菌素 12日,50 U
甲氧苄氨嘧啶 5.0毫克
去除矿物质水 1000.0毫升

最终pH=7.2±0.2在25°C

IsovitaleX浓缩

葡萄糖 100.0克
维生素B12 0.01克
谷酰胺 10.0克
盐酸硫胺 0.003克
l -胱氨酸 1.1克
腺嘌呤 1.0克
p-aminobenzoic酸 13.0克
Cocarboxylase 0.1克
胱氨酸盐酸 25.9克
盐酸鸟嘌呤 0.03克
河畔 0.25克
硝酸铁 0.02克
软化水 1000.0毫升

准备

  1. GC琼脂碱的制备
  • 向蒸馏水中加入气相色谱培养基碱的组分,使体积达到73.0 ml。彻底拌匀。慢慢加热至沸腾。在121°C高压灭菌15分钟。冷却至45 - 50°C。
  1. 血红蛋白溶液的制备
  • 将血红蛋白加入蒸馏水中,体积至250毫升。彻底混合。在121°C高压灭菌15分钟。冷却至45 - 50°C。
  1. IsoVitaleX富集液的制备(10ml)
  • 向蒸馏水中加入组分,体积至10.0ml。彻底混合。过滤消毒。
  1. VCNT抗生素溶液(10ml)的制备
  • 向蒸馏水中加入组分,体积至10.0ml。彻底混合。过滤消毒。
  1. 培养基的制备
  • 取73.0 ml冷却、无菌GC琼脂碱,无菌加250ml无菌血红蛋白溶液。IsoVitaleX富集10.0ml和VCNT抗生素溶液10.0ml。充分混合后倒入无菌培养皿或放入无菌试管中。

原则

改进的塞马丁琼脂是基于巧克力II琼脂,其中包含改进的GC琼脂碱,牛血红蛋白和富集。GC II基含有酪蛋白和肉蛋白胨形式的氮营养物质,维持pH值的磷酸盐缓冲液和玉米淀粉,它中和琼脂中可能存在的有毒脂肪酸。添加葡萄糖以增强淋球菌的生长。血红蛋白提供X因子(hemin)。IsovitaleX富集是一种限定补充品,提供V因子(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,NAD)、维生素、氨基酸、辅酶、葡萄糖、铁离子等促进致病菌生长的因子奈瑟氏菌属.这些选择性培养基含有抗菌药物,万古霉素,粘菌素和制霉菌素(V-C-N抑制剂)抑制正常菌群。万古霉素主要对革兰氏阳性菌有活性。粘菌素抑制革兰氏阴性菌,包括假单胞菌物种。改良赛亚马丁琼脂所含的已被证明具有抑制作用白色念珠菌.甲氧苄啶可抑制蜂群普罗透斯物种。

结果解释

这些媒介上典型的殖民形态如下:

  • 淋病奈瑟氏菌:小的,灰白色到无色的黏液,平滑,边缘清晰,直径一般为0.5 - 1.0毫米。
  • 脑膜炎奈瑟氏菌:中到大,蓝灰色,黏液状。

使用

  • 采用塞氏-马丁琼脂法分离病原菌奈瑟氏菌属来自细菌和真菌混合菌群的标本。
  • 它是用来隔离和培养的奈瑟氏菌属物种。

限制

  • 建议进行额外的生化和血清学检测以作最后确认。
  • 文化的致病性奈瑟氏菌属应该在3-7%的二氧化碳中培养。高浓度的二氧化碳可能对某些菌株有抑制作用。
  • 致病性选择性培养基奈瑟氏菌属可抑制其他致病菌,例如:嗜血杆菌
  • 菌株的存在n球菌有报道称V-C-N抑制剂和乳酸甲氧苄氨嘧啶的成分对其有抑制作用。
  • 而“腐生的”奈瑟氏菌属一般是被选择性介质抑制,偶尔恢复n lactamica在塞尔-马丁选择琼脂上有报道。
  • 的一些压力Capnocytophaga当接种口咽标本时,菌种可在这些选择性培养基上生长。

参考文献

  1. Himedia
  2. Thermofisher
  3. 贝克顿,迪金森公司
  4. 哈代的诊断
  5. 塞耶·JD,弗兰克·PF,马丁·杰(1965)。采用赛亚-马丁选择性培养基培养脑膜炎奈瑟氏菌从鼻咽。公共卫生与国家卫生。55(6):923-927。
  6. 罗纳德·m·阿特拉斯和詹姆斯·w·斯奈德(2014)。临床和公共卫生微生物学媒介手册。CRC出版社。Taylor & Francis Group, LLC.第419-420页

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