穆勒亨顿琼脂（MHA）

经过

穆勒亨顿琼脂（MHA）介绍

Mueller和Hinton于1941年开发了Mueller Hinton琼脂（MHA），以分离致病性奈梅里亚物种。Mueller Hinton琼脂是一种微生物生长培养基，通常用于使用Kirby-Bauer光盘扩散方法的抗生素易感性测试。建议使用CLSI批准标准中所述的琼脂凝胶浸渍在纸盘上的抗微生物剂的扩散。在临床和实验室标准研究所（CLSI）中列出了针对致病微生物的每种抗微生物测定，中间体和敏感结果建立的区域直径。穆勒Hinton琼脂用5％绵羊血液和穆勒亨龙琼脂，已经推荐用于血红蛋白的抗微生物易感性测试肺炎链球菌肺炎料和嗜血杆菌流感。MHA已被CLSI选择了几个原因：

  • 它展示了易受影响测试的良好的批量批量再现性。
  • 它在磺酰胺，三甲基吡啶和四环素抑制剂中低。
  • 它支持最严重的细菌病原体的生长。
  • 已经记录了许多数据和对其性能的经验。

为什么MHA用于抗生素易感性测试？

  1. 它是一种非选择性的非差异介质。这意味着几乎所有在这里镀的生物都会生长。
  2. 它含有淀粉。已知淀粉吸收从细菌释放的毒素，因此它们不能干扰抗生素。它还通过琼脂介导抗生素的扩散速率。
  3. 这是一个松散的琼脂。这允许比大多数其他板更好地扩散抗生素。更好的扩散导致更彻底的抑制区域。
  4. MHA显示可接受的批量批量批量再现性，用于易感性测试。
  5. MHA在磺酰胺，三甲基吡啶和四环素抑制剂中（即抑制剂浓度抑制剂胸苷和胸腺嘧啶低）。
  6. 在莫勒斯迁移率琼脂中的对氨基苯甲酸（PABA）和胸腺嘧啶/胸苷含量均降至最低，因此当培养基用于测试细菌分离物与这些抗微生物的敏感性时，显着降低磺胺酰胺和三甲基洛的灭活。

Mueller Hinton琼脂的原理（MHA）

Mueller hinton琼脂培养基含有牛肉提取物，酪蛋白，淀粉和琼脂的酸水解产物。牛肉提取物和酪蛋白的酸水解产物提供氮，维生素，碳，氨基酸，硫和其他必需的营养素。淀粉充当胶体和添加以吸收任何产生的有毒代谢物。淀粉水解产率葡萄糖，其用作能量源。琼那是凝固剂。控制四环素和磺酰胺抑制剂，胸苷，胸腺嘧啶，镁和钙离子的水平，以免干扰易感性测试并产生良好的生长。使用合适的培养基来测试微生物的易感性磺胺酰胺和三甲基洛是必不可少的。对磺胺酰胺活性的拮抗作用对氨基苯甲酸（PABA）及其类似物。减少活动Trimethoprim.那导致较小的抑制区和内侧菌落，在不合适的穆勒林顿培养基上证明了具有高水平的胸苷。这俩PABA和胸腺嘧啶/胸苷Mueller Hinton琼脂中的含量降至最低，因此显着降低了灭活磺胺酰胺和三甲基洛当培养基用于测试细菌分离物与这些抗生素的易感性时。

Mueller hinton琼脂（MHA）的组成

原料 GMS /升
牛肉提取物 2.0
酪蛋白的酸水解产物 17.5
淀粉 1.5
琼那 17.0

最终pH 7.3 +/- 0.1，25ºC。

Mueller hinton琼脂（MHA）的制备

  1. 悬浮于1000毫升蒸馏水中的38克培养基。
  2. 热量搅拌且煮沸一分钟以完全溶解培养基。
  3. 在121℃下高压釜15分钟。冷却到室温。
  4. 将冷却的Mueller hinton琼脂倒入无菌培养皿上，水平表面均匀深度。
  5. 让冷却到室温。
  6. 将板储存在2-8ºC。

结果穆勒亨顿琼脂（MHA）

结果穆勒亨顿琼脂（MHA）

抗生素周围观察到抑制区

Mueller hinton琼脂（MHA）的用途

  1. Mueller Hinton琼脂的主要使用是用于抗菌易感性测试。它已成为BAUER KIRBY方法的标准介质，其性能由NCCLS指定。
  2. 它可以用来培养奈梅里亚。
  3. 它在FDA细菌学分析手册中指定了用于食物检测，以及常见于有氧和兼性厌氧细菌进行的程序。

Mueller hinton琼脂（MHA）的局限性

  1. 许多因素会影响结果：接种率，生长率，培养基配方和pH。需要严格遵守协议，以确保可靠的结果。
  2. 接种物密度可能影响区域尺寸。沉重的接种物可能导致较小的区域或太少的接种物可能导致更大的区域。
  3. 尖锐的生物可能不会在这种培养基上生长，可能需要补充血液。
  4. 巨大的anarobes可能不会在这种媒介上生长。
  5. 磁盘扩散方法不应用于义务厌氧，生长缓慢生物和山藻藻。这种方法是用于致力生物或快速生长的环境的标准化。
  6. 药物灭活可能是由于缓慢种植者所需的长期孵育时间。
  7. 二价阳离子浓度的变异，主要是钙和镁的变化会影响氨基糖苷，四环素和Colistin试验的结果P.铜绿假单胞菌隔离。

参考

  1. 阿特拉斯丽和斯奈德J.W.2014.临床和公共卫生微生物学的媒体手册。CRC压力机。泰勒＆弗朗西斯集团。6000张声音池塘NW，套房300 Boca Raton，FL 33487-2742。第324-325页
  2. https://en.wikipedia.org/wiki/mueller-hinton_agar.
  3. http://himedialabs.com/td/m173.pdf.
  4. https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/content/hugo/muellerhintonmed.htm.
  5. https://microbiologyinfo.com/mueller-hinton-agar-mha-composition-princifle-uses-and-preparation/
  6. https://microbreonnline.com/why-mueller-hinton-agar-is-used-in-routine-antibiotic-spseibility-testing/

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