营养琼脂-原理，组成，制备，结果，用途

什么是营养琼脂？

营养琼脂是一种常用于非初始性微生物培养的基本培养基，以及生物化学或血清学检测前的质量控制和检查纯度。

• 营养培养基也可用于培养挑剔的微生物，用血清或血液充实培养基
• 营养琼脂是演示和教学目的的理想培养基，因为它可以使培养物在环境温度下存活更长的时间，而不会出现营养更丰富的培养基可能出现的过度生长的风险。
• 该介质具有相对简单的公式，该配方已被保留，并且仍然广泛用于各种样品的微生物检查中，并且还被标准方法推荐。
• 营养琼脂是一种主要用于常规培养的通用介质，或者确保微生物的延长存活。
• 它是常规培养微生物的最重要和常用的非选择性培养基之一。
• 营养琼脂已被用来培养和计数许多不特别挑剔的细菌。
• 通过添加不同的生物液，诸如马或绵羊血液，血清，蛋黄等的不同生物液，可以使培养基适于培养其他严重的生物体。

营养琼脂原理

• 营养琼脂是由各种营养物质制成的，这些营养物质可以生长各种各样的微生物，而这些微生物通常不需要特定的营养物质或补充物。
• 培养基的主要成分是蛋白质，牛肉提取物和琼脂。除了这些营养素之外，还添加了一些维生素和细菌生长所需的一些痕量成分。
• 蛋白胨是用作细菌的氨基酸源的氮气或蛋白质的来源。
• 牛肉提取物是碳的主要源，对于在细菌中形成碳水化合物至关重要。它还含有一些维生素，不同的微量矿物，有机化合物和盐等其他组分，进一步增强了不同生物的生长。
• 此外，将氯化钠添加到培养基中，以保持培养基的渗透平衡并防止在生长过程中培养基的pH变化。
• 蒸馏水提供了一种溶解营养物质的介质，使细菌更容易吸收它们。
• 琼脂是一种固化剂，为生物体的生长提供了稳定的表面，可以观察菌落的形态和枚举生物体。
• 该培养基由基本营养素组成，对于各种各样的生物来说是必不可少的，这使其成为可用于各种目的的一般媒体。

营养琼脂的组成

• 目前实验室使用的营养琼脂大多是由不同厂家提供的脱水琼脂粉配制而成。然而，媒体的组成仍然保持不变。
• 如果有必要的培养基成分，也可以在实验室中制备。
• 以下是营养琼脂的组成：

S.N.	原料	克/升
1.	蛋白胨	5.0
2.	酵母抽提物	1.5
3.	牛肉膏	1.5
4.	氯化钠	5.0
5.	琼那	15.0
最终pH在25°C: 7.4±0.2

营养琼脂的制备

1. 在烧杯中，将28克脱水粉末或实验室制备的介质加入1000毫升蒸馏水或去离子水中。
2. 然后将悬浮液加热至沸腾，使介质完全溶解。
3. 溶解的介质然后在15磅压力(121°C)下蒸压15分钟。
4. 一旦自动灭菌过程完成，将烧杯取出并冷却至约40-45℃的温度。
5. 如果需要富集，可以在高压灭菌过程后进行血液或生物流体的添加。
6. 然后在无菌条件下将培养基倒入无菌培养皿中。
7. 一旦介质凝固，板就可以在较低的热环境下放置在热空气烘箱中几分钟以在使用前除去板上存在的任何水分。

营养琼脂储存

• 粉状介质应储存在10 ~ 30℃的密闭容器中，配制的介质应储存在20 ~ 30℃。
• 打开后，在干燥后，应适当地储存产品，紧紧地覆盖瓶子以防止块状形成，因为培养基本质上吸湿，因此相对迅速地吸收水分。
• 容器应储存在受到极端温度和点火源的干燥通风区域中。
• 该产品应在标签上的到期日之前使用。

结果营养琼脂解释

图像来源：Eukaryotica.和TM媒体。

培养基冷却后在培养皿上形成淡黄色的透明到微乳状凝胶。下表显示了重要医用细菌在营养培养基上的生长及其菌落形态:

S.N.	生物	增长	殖民地形态学
1.	大肠杆菌	豪华	灰色到白色的圆形和凸起的大菌落;光滑和粗糙的殖民地。
2.	沙门氏菌伤寒	豪华	光滑无色落层菌落，直径范围为2-4毫米。
3.	金黄色葡萄球菌	豪华	金黄色圆形、凹凸光滑的菌落直径范围为2-4毫米;不透明的殖民地。
4.	链球菌Pyogenes	豪华	圆形，直径尺寸为0-5至1mm的圆形菌落;浅黄色彩色，低凸起高度;在毒性菌株中的遮光表面但在非毒性菌株中看到光泽表面;在胶囊生产的情况下粘液菌落。
5.	铜绿假单胞菌	豪华	大，不透明，扁平的菌落，边缘不规则，明显的果味;变量色素生产;毒性菌株可能产生粘液样菌落。
6。	Klebsiella肺炎	豪华	圆形，圆顶形，粘液，半透明或不透明的灰白色菌落;直径2-3毫米
7。	yersinia pestis.	豪华	微小的、几乎看不见的、闪亮的灰色半透明“斑点”;1 - 2毫米不规则，灰白色至微黄色，呈凸起状，不规则，“煎蛋”状，随文化年龄增长而突出。

营养琼脂的用途

• 营养琼脂可作为一般培养基用于培养不太挑剔的生物体。
• 它还用于从水，食物甚至空气中的典型环境样品的微生物常规培养。
• 营养琼脂通常用于演示和教学目的，因为它不含有害物质，可用于分离多种微生物。
• 使用标准方法推荐使用营养琼脂，因为它具有简单的组合物，甚至可以在实验室内制备。
• 它还可以用于在延长的时间内保存微生物而不会污染，这可能在更营养的培养基中发生。
• 它在不同的生物化学测试和血清学检测之前用作纯度测试方法。
• 它是用于从环境样品枚举细菌的最常见媒体之一。
• 在营养琼脂中加入生物液体，如马血或羊血、血清、蛋黄等，可使培养基对某些挑剔的生物体更具选择性。

营养琼脂的局限性

• 不同的生物可能在其增长要求中不同，并且可以在媒体上显示可变的生长模式。这使得媒体在隔离期间非常不可靠。
• 由于营养介质支持许多微生物的生长，在隔离期间污染的机会相当高。
• 它不能作为培养有特殊营养需求的挑剔微生物的选择性培养基。
• 营养琼脂大多只允许分离细菌，而不能分离真菌等其他微生物。
• 在某些情况下，某些微生物可能在营养琼脂上表现出相似的菌落形态，这使得不经显微镜检查很难区分它们。

参考资料和来源

• 营养琼脂．TM媒体。
• 4%,//www.kirikcitarim.com/enterobacteriaceae-文化 - 特征
• 4%,http://www.himedialabs.com/td/m001.pdf.
• 2％ - http://himedialabs.com/td/ec002m.pdf
• 1%——https://www.sigmaaldrich.com/analytical-chromatography/microbiology/microbiology-products.html?TablePage=17997595
• 1％ - https://us.vwr.com/assetsvc/asset/en_us/id/8040947/contents
• 1%——https://microbeonline.com/nutrient-agar-composition-preparation-uses/
• 1%——https://mafiadoc.com/3-materials-and-methods-shodhganga_5ba00edc097c471a388b4623.html
• 1%——http://www.himedialabs.com/TD/MV1058.pdf
• 1%——http://www.himedialabs.com/TD/M351.pdf
• < 1%, https://www.slideshare.net/UmeshMaskare/culture-media-for-different-microorganism
• <1％ - https://www.sigmaaldrich.com/analytical-chromatatogrous/microbiology/microbiology-products.html?tablepage=18176518
• <1％ - https://www.sas.upenn.edu/labmanuals/biol275/table_of_contents_files/2-preparationofmedia.pdf
• <1％ - https://www.researchgate.net/post/what_are_the_differences_between_peptone_tryptone_tryptone_peptone_trypticase_and_trypticase_peptone2
• <1％ - https://quizlet.com/125332332/exercise-19-enumeration-of-bacteria-flash-cards/
• <1％ - https://microbiologyinfo.com/nutirient-agar-composition-preparation-ant-uses/
• <1％ - //www.kirikcitarim.com/nutrient-agar-principle-comation-preparation-ant-uses/
• <1％ - https://med.libretexts.org/courses/american_public_university/apus%3a_an_introduction_to_nutrition_ (byerley）/text/10％3a_water%2c_electrolytes%2c_acid-base_balance/10.05%3a_electytes_important_for_fluid_balance
• <1％ - https://legacy.bd.com/europe/regulatory/assets/ifu/difco_bbl/274610.pdf
• <1％ - https：//courses.lumenlearning.com/microbiology/chapter/media-used-for-bacterial-growth//
• < 1%, http://www.personal.psu.edu/faculty/k/h/khb4/enve301/301labs/lab4pureculture.html
• <1％ - http://eacharya.inflibnet.in.in/data-server/eacalea-documents/53e0c6cbe413016f234436f5_infiep_17/7/t/17-7-et-v1-s1__l-7_theory_the_preeservation_of_microbes.pdf