保利测试-定义，原理，过程，结果，使用

保利的测试定义

保利试验是一种用于检测酪氨酸和组氨酸的生化试验，试剂与胺、酚和咪唑基团偶联。这种测试是由德国化学家赫尔曼·保利发现的，并以他的名字命名。保利的测试是专门针对蛋白质以酪氨酸和组氨酸为试剂进行重氮化，并带有芳香基团。反应是在低温条件下进行的，因为重氮化合物只能在低温下形成。该测试是蛋白质的一种特定测试，用于进一步区分氨基酸和蛋白质。

保利测验的目的

• 检测含有酪氨酸和组氨酸的蛋白质的存在。
• 将组氨酸和酪氨酸区别于其他氨基酸。

保利测验原理

保利的测试是基于氨基酸和试剂中形成的重氮离子之间的偶联原理。波利试剂由溶于浓盐酸的磺胺酸组成。磺胺酸在硝酸钠和盐酸的存在下进行重氮化。重氮化反应的结果是重氮盐(对苯重氮磺酸盐)。重氮盐在碱性条件下与组氨酸分子形成偶联，形成暗红色或樱桃色的化合物。当溶液变成酸性时，颜色可能会减弱并变成橙色。以酪氨酸为例，形成类似的樱桃红色的复合物，稀释后变成黄色，酸化后变成古铜色。每一分子组氨酸和酪氨酸与两摩尔重氮化合物反应生成一摩尔双(偶氮苯磺酸)组氨酸或双(偶氮苯磺酸)酪氨酸。

反应

磺胺酸+ HNO₂+ HCl→重氮盐+ 2H₂O

重氮盐+酪氨酸→偶氮染料(红色)

需求

试剂

• 1%磺胺酸(冷冻)
• 10%的盐酸
• 5%亚硝酸钠(冷冻)
• 10%的碳酸钠
• 冷冻样品(1%酪氨酸，1%组氨酸)

所需的材料

• 冰浴
• 涡
• 试管
• 试管架
• 吸量管

保利测试程序

• 在试管中加入1ml冷冻的磺胺酸，几滴预先冷冻的亚硝酸钠在涡流中混合。
• 一毫升氨基酸样本立即加入试管中，在涡流中混合。
• 少量的碳酸钠一滴一滴地加入试管中，直到颜色开始出现。

保利测验的结果与解释

• 积极的结果:阳性结果通过出现一个红色的复合物证明，表明溶液中存在组氨酸和酪氨酸。
• 负面结果:阴性结果是由于没有红色溶液，表明样品中不存在组氨酸和酪氨酸。

保利测验的使用

• 保利测试用于检测酪氨酸和组氨酸蛋白的存在。
• 该测试还允许从其他氨基酸中区分组氨酸和酪氨酸。

保利测试的局限性

• 重氮盐的形成发生在低温下;因此，测试应该在有冰的情况下进行。
• 该测试不允许区分组氨酸和酪氨酸。米伦氏试验可以进行，因为组氨酸在米伦氏试验中给出了阴性结果。

参考文献

• D(2012)。生物化学。14版。学术出版商。加尔各答。
• 女子,a(2015)。实际的生物化学。兰伯特学术出版社。
• https://www.onlinebiologynotes.com/paulys-test-objective-principle-reagents-procedure-and-result/