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苯丙氨酸脱氨酶试验的目的
- 确定生物体对氧化脱氨酸苯丙氨酸的能力。
- 根据革兰氏阴性杆菌从苯丙氨酸中产生苯丙酮酸的能力来区分肠道革兰氏阴性杆菌。
苯丙氨酸脱氨酶试验的原理
苯丙氨酸脱氨酶培养基测试生物体产生酶脱氨酶的能力。能够生产苯丙氨酸脱氨酶的微生物从苯丙氨酸中除去胺（NH2），并将胺基释放为游离氨。氧化酶的苯丙氨酸的序列导致苯吡咯酸的形成。1950年，Hendriksen展示了这一点蛋白质能将氨基酸苯丙氨酸转化为苯丙酮酸。后来，Buttiaux等人开发了一种培养基，用于检测苯基丙氨酸的形成蛋白质那Providencia,莫加尔格拉团体。该培养基通过Bynae和后来通过Ewing等人进行了进一步修饰。通过省略培养基中的蛋白质蛋白质来简化Bynae的配方。通过加入几滴10％氯化氯化氯化氯化氯化物产生的苯丙氨酸脱氨酶产生的苯基吡咯酸，该氯化氯化物导致在试管倾斜的这两种化合物之间形成绿色色肤化合物，这表明正检测结果。没有这种绿色的复合物是表明不存在脱氨酶酶意味着阴性测试结果。
苯丙氨酸脱氨酶测试中使用的培养基
苯丙氨酸琼脂
| 氯化钠 | 5.0gm / L. |
| 酵母抽提物 | 3.0gm / L. |
| 苯丙氨酸 | 2.0GM / L. |
| 磷酸二钾 | 1.0gm / L. |
| 琼那 | 12.0通用/ L |
最终pH在25ºC时7.3 +/- 0.2。
苯丙氨酸脱氨酶试验的方法
- 使用从18-24小时的纯培养物中的鞘膜，用无菌接种线条纹倾斜表面。
- 在35°-37℃下在35°-37℃下孵育接种的倾斜，在环境空气中用盖帽松散。
- 孵育后，将4-5滴10％将10％的氯化物溶液直接加入倾斜。在1-5分钟内轻轻地搅拌管道并观察绿色的开发。
结果解释苯丙氨酸脱氨酶试验
阳性测试：在氯化铁试剂施用后1-5分钟内在1-5分钟内开发光线。
负面测试:由于氯化铁的颜色，缺乏绿色反应或黄色着色。
苯丙氨酸脱氨酶测试的局限性
- 必须对纯培养的菌落进行生化、免疫学、分子或质谱检测以进行完全鉴定。
- 正面测试的绿色反应迅速淡化。因此，测试结果必须在氯化铁或假阴性结果施用后5分钟内解释。
- 含有氯化铁的管的轻微搅拌将使表面菌落脱落并产生更快的更明显的颜色反应。
苯丙氨酸脱氨酶测试的质量控制
积极的：Proteus mirabilis.（ATCC12453）
负面:大肠杆菌（ATCC25922）
参考文献
- Tille下午2014.贝利和斯科特的诊断微生物学。十三个版本。Mosby，Inc。是elsevier Inc.3251 Riverport Lane的联盟。圣路易斯。密苏里州63043
- Snyder JW，Atlas RM。临床微生物学的媒体手册
- 朱俊华、朱俊华、朱俊华(1971)。脲酶和苯丙氨酸脱氨酶生产的快速检测。应用微生物学那21.（3），545。