该方法由安德森和帕克修改。
- 准备食物蛋白水中的连续十倍稀释液。
- 无菌转移无菌纤维素乙酸盐膜到表面或干谷氨酸琼脂。
- 使用无菌玻璃Drigalski吊具将每种稀释剂的再转移重复的1.0mL等分试样用于纤维素膜,将流体分布在整个膜上(外围除外)。
- 将板4小时孵育在35℃(促进复苏)。
- 将每个膜转移到蛋白质胆汁琼脂板上,并在44℃下孵育18小时。
- 去除板的盖子。
- 将3 ml Kovacs试剂加入每个盖子中。
- 从琼脂中取出膜并将试剂浸入5分钟。
- 去除膜并沥干过量的试剂。
- 在UV灯下干燥膜。
- 在30分钟内计算粉红色染色的菌落。
- 计算I类型的数量大肠杆菌通过选择稀释度给予平均值
20-50粉红色菌落和两个膜和稀释因子的总数。