盐耐量试验

目标

  • 以确定有机体在高浓度盐中生长的能力。
  • 它用于区分肠球菌和非肠球菌。

原则

盐作为一种选择剂,干扰膜的渗透性和渗透平衡。耐盐培养基是一种选择性和差异性的培养基,在这种培养基中,耐盐微生物将在48小时内在肉汤和固体琼脂上大量生长。Hajna设计了第一个耐盐培养基的配方。高盐浓度抑制了一系列细菌,但允许耐盐微生物如肠球菌在培养基中生长。Quadri配方包括可发酵的碳水化合物、葡萄糖和颜色指示剂溴甲酚紫。能够在高盐度培养基中生长的生物体,利用糖和释放酸作为它们在培养基中代谢的副产物。由于pH值的下降,指示剂溴甲酚紫色由紫色变为黄色。肠球菌对高盐浓度具有抗性,在含盐的培养基中也能生长。粪肠杆菌,酵母菌,液体肠杆菌,e·杜兰肠球菌耐盐物种。

媒体

可以使用氯化钠(NaCl)6.5%培养基,或者可以使用脑心输注肉汤(BHI)以加入NaCl和指示剂染料代替各组分。

组件:心脏消化(10 g)、动物组织酶消化(10 g)、NaCl (65 g)、葡萄糖(1 g)、溴甲酚紫(0.016 g),每1000 mL。

过程

  1. 将18 ~ 24小时培养的1 ~ 2个菌落接种到无指示剂或含指示剂的6.5% NaCl培养液中。
  2. 将试管置于35°C -37°C环境空气中培养48小时。
  3. 检查浊度/生长的培养基或在没有指示器的培养基上存在菌落的存在,或者用指示器检查介质的介质从紫色变为黄色。

结果

盐耐量试验

阳性测试:肉汤中可见的浑浊,颜色从紫色或黄色变化

负面测试:无浑浊,无颜色变化

限制

  • 加入6.5% NaCl的肉汤可能会产生缓慢反应,使测试解释困难。
  • 链球菌agalactiae(B组)将在介质中生长,但不产生酸反应。在介质中观察到浑浊,但不会出现颜色变化。
  • 在接种肉汤时,必须使用轻接种剂。接种重菌可能产生浑浊,从而导致假阳性结果。
  • 建议对纯培养的菌落进行生化、免疫学、分子或质谱检测以进行完全鉴定。

质量控制

积极的:粪肠球菌(ATCC29212):生长,颜色变黄

消极的:链球菌Bovis.(ATCC9809):抑制作用,不变色

参考

  1. Tille 2014点。贝利和斯科特的诊断微生物学。13版。Mosby, Inc.是Elsevier Inc. 3251 Riverport Lane的子公司。圣路易斯。密苏里州63043
  2. Snyder JW,Atlas RM。媒体手册临床微生物学。CRC压力机。泰勒&弗朗西斯集团。6000张声音池塘,套房300.Boca Raton,FL 33487-2742。
  3. 哈伊娜,A.A.和C.A.佩里,1943年。美国公共卫生杂志;33:550-58

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