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西蒙斯柠檬酸盐琼脂是一种选择性和差异培养基,用于测试生物体使用柠檬酸盐作为唯一的碳源和铵离子作为唯一的氮源的能力。它用于根据柠檬酸盐的利用来区分革兰氏阴性菌。这对于选择以枸橼酸为主要碳源和能量源的生物具有重要意义。最初是由Koser开发的柠檬酸盐培养基,以铵盐作为唯一的氮源,以柠檬酸盐作为唯一的碳源来区分大肠杆菌和肠杆菌属aerogenes由IMViC测试。后来西蒙斯通过添加琼脂和溴百里酚蓝对科瑟的配方进行了修改。
枸橼酸席梦斯琼脂的组成
成分 | Gms /升 |
硫酸镁 | 0.200 |
磷酸二氢铵 | 1.000 |
磷酸钾 | 1.000 |
柠檬酸钠 | 2.000 |
氯化钠 | 5.000 |
溴麝香草酚蓝 | 0.080 |
琼脂 | 15.000 |
最终pH(25°C) 6.8±0.2
席梦思柠檬酸琼脂的原理
西蒙斯柠檬酸琼脂用于测试生物体利用柠檬酸作为能量来源的能力。磷酸二氢铵和柠檬酸钠分别作为唯一的氮源和碳源。磷酸钾作为一个缓冲.氯化钠维护渗透平衡的媒介。硫酸镁是多种代谢反应的辅助因子。溴百里酚蓝是pH指示剂。细菌学的琼脂是固化剂。
能够利用磷酸二氢铵和柠檬酸盐的生物体将在这种培养基上不受限制地生长。如果使用柠檬酸盐,微生物就会积累碱性/碱性的副产品。可以在这种培养基上生长的细菌会产生一种酶,citrate-permease,能转换的柠檬酸来丙酮酸.丙酮酸那么能否进入机体的代谢周期进行生产能源.生长表明枸橼酸的利用,中间代谢物克雷布斯循环.柠檬酸的利用依赖于生物体产生的一种酶,它将柠檬酸分解为草酰乙酸和乙酸。这些产物后来转化成丙酮酸和二氧化碳。产生的二氧化碳与钠和水结合形成碳酸钠,一种碱性产品。介质的碱度是由pH指示剂的颜色变化来表示的。pH值的变化使溴麝香草酚蓝指标在介质中绿色,蓝色pH值超过7.6,这是阳性测试。
枸橼酸席梦思琼脂的制备
- 将24.28克悬浮在1000ml蒸馏水中。
- 加热至沸腾,使介质完全溶解。
- 混合均匀并放入试管或烧瓶中。对于管,分配4.0至5.0毫升到16毫米管。
- 在15磅压力(121°C)下用高压灭菌15分钟。
- 在倾斜的位置凉爽(长倾斜,浅臀部)。
- 试管应保存在冰箱中,以确保保质期为6 - 8周。
- 由于样品的pH值和溴百里酚蓝色,未接种的培养基将是深森林绿色。
结果枸橼酸席梦思琼脂解释
结果 | 观察 | 生物 |
积极的测试 |
|
沙雷氏菌属大多数的肠杆菌,柠檬酸杆菌,克雷伯氏菌,变形杆菌和Providencia物种 |
负面的测试 |
|
大肠杆菌,志贺氏杆菌、鼠疫、爱德华菌属物种, |
西蒙斯柠檬酸琼脂的用途
- 以柠檬酸盐作为唯一的碳源,用于肠杆菌科和产气菌群成员的区分。
- 西蒙斯枸橼酸琼脂可用于鉴别枸橼酸阳性肠炎沙门氏菌和沙门氏菌亚属II, III和IV来自柠檬酸阴性伤寒沙门氏菌,副伤寒沙门氏菌一个,沙门氏菌pullorum和沙门氏菌gallinarum.
西蒙斯柠檬酸琼脂的局限性
- 用水前,请确保水的pH值在6.5 ~ 7.0之间。如果忽略上述预防措施,介质的初始颜色可能会偏离预期颜色。
- pH值影响介质的性能,必须正确监测。
- 培养基应该是新鲜准备的,因为在干燥的条件下,甚至在接种前,颜色就可能出现变化,特别是在斜面底部。
- 有些生物体能在柠檬酸盐上生长而不产生颜色变化。生长被认为是一个积极的柠檬酸利用试验,即使在没有颜色变化。
- 接种物应该是纯的,在固体培养基上过夜培养,而不是从肉汤悬浮液。
- 建议对纯培养的菌落进行生化、免疫学、分子或质谱检测以进行完全鉴定。
- 如果培养管帽松动,可能导致假阴性结果。
- 用轻微的接种物在斜面上划线;大量接种可能导致假阳性结果。
- 当接种来自同一培养物的多种生化物质时,应先接种该培养基,或在划线前先用火焰接种针。葡萄糖或其他营养物质转移到这种培养基上可能导致假阳性结果。
参考文献
- 赛默费雪科学公司,脱水培养基-西蒙斯柠檬酸琼脂。
- 西斯科研究实验室有限公司-西蒙的柠檬酸琼脂(59437)。
- 哈迪诊断-西蒙斯柠檬酸琼脂(L80)。
- 直观系统,公司-西蒙斯的柠檬酸琼脂倾斜。
- 默克微生物手册第12版-西蒙斯柠檬酸琼脂。
- Dalynn生物制品-西蒙斯柠檬酸琼脂(TS62)。
- 柠檬酸琼脂(西蒙斯)。
- Sigma-Aldrich, Inc.- SIMMONS CITRATE AGAR (S3681)。
- HiMedia Laboratories pv . Ltd.- Simmons Citrate Agar (M099)。
- Acumedia制造商,Inc.-西蒙斯柠檬酸琼脂(7156)。
- Neogen食品安全。西蒙斯柠檬酸琼脂。http://foodsafety.neogen.com/en/simmons-citrate-agar
- http://www.austincc.edu/microbugz/citrate_test.php
- Atlas R.M和Snyder J.W. 2014。临床和公共卫生微生物学媒体手册。CRC出版社。Taylor & Francis集团,佛罗里达州博卡拉顿市破碎之声公园大道NW 6000号,300套房,33487-2742。
- 2003年Aneja投资者。微生物学、植物病理学和生物技术实验,第四修订版,New Age International (P) limited, Ansari road, Daryaganj,新德里-110002。