山梨糖醇Macconkey Agar.

介绍

麦康凯山梨醇琼脂是基于Rappaport和Henigh描述的配方。为山梨糖醇非发酵检测提供了选择性和差别化的培养基大肠杆菌O157血清型:H7与出血性结肠炎相关。大肠杆菌血清型O157:H7是与出血性结肠炎相关的人病原体,其由Shiga样毒素(SLT)的作用产生。在含标准乳糖的Macconkey琼脂上,该菌株与其他乳糖发酵难以区分大肠杆菌。与大多数不同大肠杆菌菌株,大肠杆菌O157:H7发酵山梨糖醇慢慢地或根本不。因此,具有山梨糖醇的Macconkey琼脂允许识别大肠杆菌O157:粪便培养中H7。头孢克肟和碲酸盐的加入是抑制奇异变形杆菌、非o157的更有选择性和差异的培养基大肠杆菌在尝试分离期间需要筛选的菌株和其他山梨糖醇的菌株大肠杆菌O157:H7。

作品

原料 通用汽车/ L
蛋白胨 17.0g
眎蛋白胨 3.0克
D-山梨糖醇 10.0G.
氯化钠 5.0G.
胆汁盐混合物 1.5克
中性红色 0.03g
水晶紫色 0.001克
琼那 13.5G.

最终pH 7.1 +/- 0.2在25ºC时

准备

  • 在1000ml蒸馏水中悬浮50.03g粉末。混合彻底。
  • 热量频繁搅拌并煮沸1分钟,以完全溶解粉末。
  • 在121℃下高压釜15分钟。
  • 冷却至45-50°C,倒入无菌培养皿

原则

MacConkey山梨糖醇琼脂只有轻微的选择性,因为胆盐抑制革兰氏阳性微生物的浓度比其他肠道培养基低。蛋白胨和蛋白蛋白提供了必需的营养物质,如氮和碳化合物、长链氨基酸、矿物质、维生素和微生物生长所需的微量成分。结晶紫的存在抑制革兰氏阳性细菌的生长,特别是肠球菌和葡萄球菌。氯化钠维持渗透平衡。中性红色为指示灯。山梨醇是一种可发酵的碳水化合物。通过山梨糖醇和中性红色指示剂的结合来实现肠道微生物的分化。的增长E.coli.o157:H7在山梨糖醇的Macconkey琼脂上显示无色菌落和大多数粪群发酵山梨糖醇,呈粉红色。根据分离物发酵碳水化合物山梨糖醇的能力,产生无色或粉红色的红色菌落。

结果和解释

山梨糖醇Macconkey Agar.

图A:大肠杆菌ATCC 25922;图B:大肠杆菌O157:H7。
来源:卡尔罗斯Oxoid

  • 孵育18-24小时后,板材应显示在斑纹区域中的分离菌落,并在沉重的接种区域中汇合生长。

山梨糖醇发酵:粉红色到红色殖民地,一些被沉淀胆区的区域包围

山梨糖醇非发酵罐:无色的殖民地。

使用

  • 用于肠致病菌的分离和检测大肠杆菌O157:H7与出血性结肠炎(HC)和溶血性尿毒症综合征(HUS)相关的初级血管。
  • 它有助于区分大肠杆菌O157:来自其他菌株的H7,尤其是乳糖发酵罐大肠杆菌。

限制

  • 据报道,一些肠杆菌和假单胞菌铜绿假单胞菌在富含CO 2富集的气氛中孵育时抑制在Macconkey琼脂上。
  • 培养的延长孵育可能导致大肠杆菌血清型O157的菌落:H7失去其特征无色外观,也可以褪色的山梨糖醇阳性菌落的颜色,使它们难以区分山梨糖醇阴性菌落。
  • 长时间的培养可导致粉红色山梨醇阳性菌落褪色,使解释更加困难。经过长时间的潜伏期,一些菌株大肠杆菌O157:H7能发酵山梨醇,产生粉红色菌落。
  • 还有额外的散热革兰阴性棒,其不会发酵山梨糖醇。
  • 虽然大多数非O157:H7科利发酵山梨糖醇,约6%的分离物不。这些非典型菌株以及其他山梨糖醇无发酵细菌如莫加尔格拉哈菲娅与O157:H7菌落相同,因此可能需要确认测试。
  • 存在O157:H7以外的血清型山梨醇阴性菌株,它们可能或可能不会产生毒素和临床症状。带有山梨醇的麦康基琼脂不能区分产生毒素和不产生毒素的菌株大肠杆菌o157。
  • 然而,Macconkey山梨糖醇琼脂不仅应仅用于检测致病大肠杆菌O157:H7菌株,因为一些无毒菌株也不会发酵山梨糖醇。克染色,生物化学测试和血清学程序应进行确认结果。

参考文献

  1. Himedia
  2. Dalynn生物学
  3. 哈迪诊断
  4. 赛默费雪科学公司
  5. 贝克顿,迪金森公司
  6. 公园实验室
  7. Tille P.M(2014)Bailey And Scott的微生物学,Thirteen Edition,Mosby,Inc。,Iselsvier Inc.的联盟,3251 Riverport Lane,St.Louis,Missouri 63043
  8. 罗纳德·m·阿特拉斯和詹姆斯·w·斯奈德(2014)。临床和公共卫生微生物学媒介手册。CRC出版社。Taylor & Francis Group, LLC.第287页。

Macconkey山梨糖醇琼脂

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