现场吲哚测试 - 目标,原则,程序,结果和局限性

现场吲哚测试的目的

确定生物体生产能力吲哚通过色氨酸酶的作用。

现场吲哚试验原理

细胞内酶色氨酸酶通过对氨基酸色氨酸的水解活性介导吲哚的产生。产生酶色氨酸酶的细菌能够将氨基酸色氨酸降解成丙酮酸,氨和吲哚。通过其与某些醛结合以形成有色化合物的能力来检测吲哚。对于吲哚阳性细菌,通过吲哚与肉桂醛反应形成的蓝绿色化合物很容易被视为。反应通过蛋白质的酸分裂形成的缩合方法进行。没有酶导致没有颜色产生暗示吲哚负反应。

现场吲哚测试的程序

  1. 用1%p-二甲基氨基氨基醌醛试剂饱和一张滤纸。
  2. 使用木棍或细菌学回路从琼脂表面去除细菌菌落的一小部分,并在滤纸上擦样品。
  3. 在1到3分钟内观察色彩开发

结果解释现货吲哚测试

结果解释现货吲哚测试

积极的测试:在1到3分钟内开发蓝色

负面测试:没有颜色开发或略微粉红色

点吲哚测试的局限性

  • 作为葡萄糖抑制吲哚生产,仅测试在没有葡萄糖的培养基上培养的菌落。
  • 细菌接种物不应选择在MacConkey琼脂和EMB琼脂上,因为该培养基上乳糖发酵菌落的颜色会影响试验的解释,且培养基中的指标可能导致假阳性结果。
  • 某些菌株Proteus Ventgaris,Providencia航空罗马斯SPP。将对吲哚测试产生假阴性反应。
  • 由于相邻的菌落可能占用扩散吲哚,因此如果测试纯培养物,阳性测试仅适用于纯培养物。
  • 在进行现场试验时,KOVACS吲哚试剂可用作现场试验试剂的替代品。然而,当用作现货试剂时,Kovacs Indole试剂在检测吲哚(DMaca)时对吲哚敏感的敏感性。

现场吲哚测试的质量控制

积极的:大肠杆菌(ATCC25922)

负面:肺炎克雷伯菌(ATCC13883)

参考文献

  1. Tille下午2014.贝利和斯科特的诊断微生物学。十三个版本。Mosby,Inc。是elsevier Inc.3251 Riverport Lane的联盟。圣路易斯。密苏里州63043
  2. Miller JM,Wright JW。1982.现场吲哚试验:评估四种试剂。临床微生物学的jounal。589-592卷。15,No.4 0095-1137 / 82 / 040589-04 $ 02.00 / 0。http://jcm.asm.org/content/15/4/589.full.pdf.

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