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铺设板技术
- 已经开发了各种技术用于分离微生物,主要是细菌,来自样品或样品培养物。
- 涂抹板方法是将含有细菌的液体样品板的技术,使细菌易于计数和分离。
- 成功的涂抹板将具有可数数量的分离的细菌菌落,均匀地分布在板上。
- 传播板培养技术是用于分离细菌的最广泛使用的培养技术之一。
原则
在该技术中,使用含有2或更多细菌或微生物(混合培养)的连续稀释的样品,其在诸如无菌L形玻璃棒(吊具)的帮助下,在固化的琼脂介质板上以薄层涂布在薄层上媒体板在转盘上旋转。
该方法背后的原理是,当介质板被旋转时,在某个阶段,单个细胞将用弯曲玻璃棒(吊具)沉积到琼脂介质的表面上。存在于样品/稀释的样品中的一些细胞将彼此分离,其足以允许显影群体彼此自由的菌落。
程序
- 从样品中制作稀释系列。
- 将0.1mL从适当的所需稀释序列输液到琼脂平板表面的中心。
- 将L形玻璃涂布器浸入醇中。
- 将玻璃吊具(曲棍球棒)燃烧在Bunsen燃烧器上。
- 使用无菌玻璃涂布器将样品均匀地涂抹在琼脂表面上,同时仔细旋转培养皿下面的培养皿。
- 将板在37℃孵育24小时。
- 计算样品的CFU值。一旦您计算菌落,乘以适当的稀释因子以确定原始样品中的CFU / ml的数量。
应用程序
- 与串行稀释液结合的涂抹板技术是一个有价值的研究工具。
- 证明细菌的文化特征(例如颜色,质地,尺寸,高度等)。
- 将细菌与含有超过1个细菌的标本中的离散菌落分离。
- 用于测定细菌朝向特定药物/抗生素或测试物质的敏感性和/或抗性。
- 获得足够的生长各种生化和其他测试的细菌。
- 估计标本中的细菌的可行计数。
- 保持股票培养。
- 运输或短期储存样品(例如刺伤培养物)。
好处
- 热敏微生物不受影响。
- 在涂抹板中没有地下殖民地出现,因此容易分离生物体。
限制
- 严格的环境受到青睐,同时微苯胺趋于发光较慢。
- 殖民地拥挤使得枚举困难。
- 使用移液器的精确稀释液应制成。
- 不大于0.1毫升的体积可以在营养琼脂平板上涂布,因为它不会浸泡,并且可能导致菌落在形成时聚结。
参考
- https://www.micro.iastate.edu/video/microbiology-004-spread-plate-method.
- http://www.expertsmind.com/questions/explain -Advantages-and-disAdvantares-of-spread-plate-method-30175983.aspx.
- https://www.quora.com/what -Advantares-does-pour-plate-method-haveover-the-spread-plate-method.
- https://aslopubs.onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.4319/lo.1960.5.1.0078
- Hartman D.(2011)。完善你的涂抹板技术。微生物学与生物学教育,12(2),204-5。DOI:10.1128 / jmbe.v12i2.324
- https://paramedicsworld.com/microbiology-culture-techniques/spread-plate-culture-method-isolation-bacteria-microorganism-pure-culture/medical-paramedical-studynotes#.xgfykfwzbiu.
- https://microbreonnline.com/spread-plate-technique-princifle-procedure-results/
- https://microbiologyinfo.com/spread-plate-technique-princifle-procedure-ant-uses/
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