Thioglycolate肉汤是一种多用途、富集、差异化的培养基,主要用于测定微生物的需氧量。它作为浓缩肉汤,是最常用于诊断细菌学。这种肉汤支持厌氧菌,好氧菌,微嗜氧菌和挑剔的微生物的生长。
图片来源:乔治王子社区学院
表的内容
巯基乙酸酯肉汤的组成
成分 | Gms /升 |
l -胱氨酸 | 0.50 |
氯化钠 | 2.50 |
葡萄糖 | 5.50 |
酵母提取物 | 5.00 |
酪蛋白的胰腺消化 | 15.0 |
巯乙酸钠 | 0.5 |
最终pH值(25°C): 7.1±0.2
巯基乙酸酯肉汤的原理
- 葡萄糖、酪蛋白胰消化液、酵母提取物、l -胱氨酸提供了细菌增殖所需的生长因子。
- l -胱氨酸和巯基乙酸钠允许梭状芽胞杆菌和其他严格的厌氧菌在这种培养基中生长,即使在有氧条件下。
- 巯基乙酸钠作为还原剂,中和介质中形成的汞类防腐剂和过氧化物的毒性作用,从而促进厌氧,使介质适合测试含有重金属的材料。
好氧和厌氧细菌可以通过在巯基乙酸盐肉汤的试管中培养来识别:
- 专性需氧菌需要氧气,因为他们不能发酵或无氧呼吸。它们聚集在氧气浓度最高的管子顶部。
- 专性厌氧生物被氧气中毒,所以它们聚集在管子底部氧气浓度最低的地方。
- 兼性厌氧菌可以在有氧或无氧条件下生长,因为它们可以通过好氧或厌氧代谢能量。它们主要聚集在顶部,因为有氧呼吸比发酵或无氧呼吸产生更多的ATP。
- 微量需氧的需要氧气,因为他们不能发酵或无氧呼吸。然而,它们会被高浓度的氧气毒害。它们聚集在试管的上部,而不是最顶部。
- 耐氧的生物不需要氧气,因为它们厌氧代谢能量。不过,与专性厌氧菌不同的是,它们不会被氧气毒害。它们均匀地分布在整个试管中。
巯基乙酸酯肉汤的制备和使用方法
- 将29克悬浮在1升蒸馏水中。
- 煮沸并完全溶解介质。
- 分配到管或瓶,用高压灭菌在121°C 15分钟。
注意:在使用前准备新鲜的或煮沸并冷却介质 - 按照无菌技术接种培养基。
- 接种后,应尽快在35-35°C的温度下培养肉汤。
巯基乙酸酯肉汤测定结果的解释
生物 | 增长 |
白色念珠菌 | 羊毛状的增长 |
sporogenes梭状芽胞杆菌 | 混浊生长和或菌落 |
消化链球菌属anaerobius | 混浊生长和或菌落 |
perfringens梭状芽胞杆菌 | 混浊生长和或菌落 |
脆弱拟杆菌 | 混浊生长和或菌落 |
拟杆菌vulgatus | 混浊生长和或菌落 |
金黄色葡萄球菌无性系种群。葡萄球菌 | 混浊生长和或菌落 |
铜绿假单胞菌 | 混浊生长和或菌落 |
微球菌危害 | 混浊生长和或菌落 |
链球菌引起的肺炎 | 混浊生长和或菌落 |
大肠杆菌 | 混浊生长和或菌落 |
沙门氏菌沙门氏菌感染 | 混浊生长和或菌落 |
沙门氏菌Abony | 混浊生长和或菌落 |
巯基乙酸酯肉汤的用途
- 推荐用巯基乙酸盐肉汤培养好氧、微嗜氧和厌氧微生物。
- 它允许区分专性需氧菌、专性厌氧菌、兼性厌氧菌、微嗜氧菌和耐氧生物。
- 它用于无菌检测某些生物产品是浑浊的或其他不易于在硫代甘酸酯培养基中培养,因为它的粘度。
- 推荐用于抗生素、生物制品和食品的无菌检验,以及测定苯酚系数和消毒剂的杀孢效果。
- 当怀疑厌氧菌感染时,建议使用巯基乙酸酯培养基将严格的厌氧菌从血液中分离出来。
- 利用巯基乙酸酯肉汤,根据各种细菌的需氧量,找出它们的生长特性。
巯基乙酸酯肉汤的局限性
- 介质必须是新鲜制备的,或在使用后4小时内煮沸冷却。
- 低温储存可增加氧的吸收。
- 巯基乙酸酯介质不应再次加热超过一次,因为在加热过程中会形成有毒的氧基。
参考文献
- https://www.sciencedirect.com/topics/immunology-and-microbiology/thioglycollate-broth
- http://www.oxoid.com/UK/blue/prod_detail/prod_detail.asp?pr=CM0391&cat=&c=UK&lang=EN
- http://himedialabs.com/TD/M009.pdf
- http://www.austincc.edu/microbugz/fluid_thioglycollate_medium.php
- http://iws2.collin.edu/dcain/CCCCD%20Micro/thioglycollatebroth.htm
有些建议在37℃保存2周后再使用
你怎么看?