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- 性病病研究实验室测试(VDRL)是对螺旋细菌引起的性传播感染 - 梅毒的筛查试验Treponema pallidum.。
- 它是一种非继发性测试,可检测抗体IgM.和IgG.对受损宿主细胞释放的类脂物质和脂蛋白样物质的抗体,以及可能从密螺旋体释放的心磷脂的抗体。这些抗体传统上被称为“reagins”。
- 因此,VDRL试验是一种玻片微絮凝试验,除用于诊断梅毒的更具体试验外,还用于筛查梅毒。
- (初级病变)Chancre的外观后,VDRL测试变为阳性1-2周。在初级梅毒的后期测试变为反应性(50-75%),在二次梅毒中变得高度反应性(100%),然后反应性降低(75%)。
VDRL测试原理
性病研究实验室(VDRL)试验是玻片微絮凝试验,用于检测梅毒患者体内受损宿主细胞释放的抗原产生的抗体。
它使用含有0.03%心磷脂、0.21%卵磷脂和0.9%胆固醇的抗原(称为VDRL抗原)。该抗原悬浮在缓冲盐水溶液中,当与梅毒患者血清或脑脊液中的类脂抗体结合时形成絮凝物。
对于试验,首先将一滴抗原放在载玻片上,然后将一滴血清添加到载玻片上。旋转幻灯片以混合内容。如果试验呈阳性,则会发生絮凝现象,并使用显微镜进行读取。结块或凝集表明反应性标本或患者标本中存在自身抗体,而非反应性标本显示为均质悬浮液。
VDRL测试的要求
患者的血清,水浴,新鲜制备的心吡啶抗原,VDRL滑块,机械旋转器,移液器和皮下注射器,带有无卷合针和显微镜。还需要已知的反应性和非反应性血清对照。
VDRL试验程序
可以定性和定量地执行测试。通过定性测试反应的那些试验进行定量测试以确定抗体滴度。
定性方法
- 患者血清在56℃加热灭活O.C在水浴中30分钟以去除非特异性抑制剂(如补码)。
- VDR1抗原悬浮液(组织心脂脂或化学合成的心脂蛋白),对照和样品被带到室温。
- 将一滴(50µl)试样、阳性和阴性对照品用移液管移到一次性载玻片的单独反应圈上。
- 将一滴稀释的抗原悬浮液加入到测量的样本体积,阳性和阴性对照中。
- 使用混合棒的测试样品和VDRL试剂混合,使得它在整个反应圈上均匀地铺平。
- 以180转/分的速度,手动或在机械转子上轻轻地连续旋转滑块。
- 大约8分钟后,使用10倍物镜和目镜在显微镜下检查絮凝情况。
定量方法
- 将血清样品稀释至终点滴度。可在一张载玻片上通过1:8稀释对3份血清样本进行定量试验。
- 将50μl0.9%盐水置于2到4的圆圈中。不要涂盐水。
- 使用安全移液管装置,将50µl血清放入第1圈,将50µl血清放入第2圈。
- 通过在安全移液管中上下吸取混合液八次,在循环2中混合生理盐水和血清。
- 将50µl从循环2(1:2)转移至循环3,并混合。
- 将50μL从圆形3转移到圆4,混合,然后丢弃最后50μL。
- 轻轻地重新悬浮抗原悬浮液。
- 在每个循环中加入1滴(17µl)抗原悬浮液。
- 将滑块放在机械旋转器上。将滑块以180±2 rpm旋转4分钟。
- 旋转后立即阅读测试。
- 如果测试的最高稀释度(1:8)为反应性,则继续如下操作:
- 在试管中制备1:8稀释度的试样。将0.1 ml血清添加到0.7 ml 0.9%生理盐水中。充分搅拌。
- 将50μl0.9%的盐水放入石蜡2,3和4中。为强反应性标本制备额外的连续稀释液。
- 将50μl的1:8稀释于石蜡11和2中的试样稀释。
- 用环2开始准备串行双重稀释液2.如上所述完成测试。
VDRL试验结果解释
- 阳性试验:试验圈中心或外围出现抗原抗体团块,表明VDRL试验呈阳性。
- 阴性试验:没有抗原抗体丛。表示光滑,甚至浅灰色外观,没有聚集体。
- 所有反应性和弱反应性血清都需要连续稀释来估计抗体滴度。滴度报告为最高稀释的倒数,显示出阳性测试结果。
VDRL测试的应用
- 它主要用于梅毒感染的筛查试验。
- 梅毒筛查是妊娠试验的常规部分。
- 如果被用于其他STI,如淋病,感染HIV,或者如果从事高风险的性活动,也可以进行梅毒测试的VDRL试验。
- 如果已经对梅毒进行治疗,则VDRL用于对疾病控制和预防中心(CDC)的建议进行后续测试。
VDRL测试的优点
- VDRL测试最广泛应用于梅毒的简单和快速测试。
- VDRL测试速度快,易于执行,非常适合样本筛选。
- VDRL测试也有助于诊断先天性梅毒。
- 因为,有机体Treponema pallidum.不能在人造媒体中培养,通过血清学检测筛选梅毒,例如VDRL变得重要。
- 患者不需要梅毒的症状进行这种测试准确。它可以检测患者的梅毒,没有症状。
- 由于它是一种非培养性测试(非特异性测试),它用于调查梅毒以及其他串麦芽糖,伴侣和分枝杆菌。
VDRL测试的局限性
- 如果没有其他一些证据诊断梅毒,则VDRL等反应性非继发试验不确认苍白球感染。必须用特异性或培养型试验证实任何反应性VDRL测试,如TPHA,FTA-ABS测试。
- 检测到的抗脂质抗体不仅是由梅毒和其他培养疾病而产生的,而且还可以响应于急性和慢性自然的非克切性疾病而产生的,其中发生组织损伤。
- VDRL测试并不总是准确的。例如,如果一个人患梅毒的时间少于三个月,可能会出现假阴性结果,因为身体产生抗体可能需要很长时间。这种检测在晚期梅毒中也不可靠。
- 另一方面,在艾滋病毒,莱姆病,疟疾,肺炎,肺炎血管,IV药物用途和结核病等条件下,可以看到假阳性结果。
- 梅毒感染产生的抗体即使在梅毒治疗后也能留在体内。
- 可能会发生促兴反应。在促滤脉反应中,抑制与未稀释的血清的反应性。当样品仅在定性测试中仅产生弱反应性或粗糙的不反应导致时,可以怀疑PROZONE现象。
- VDRL可能在偏航流行的区域的人员中有反应。通常,来自这些感染的残留滴度为<1:8。
参考
- 哈里斯A,罗森博格AA,里德尔LM。用心脏肽抗原进行梅毒微絮凝试验:初步报告。J Vener Dis Notify 1946;27: 159–172.
- https://www.cdc.gov/std/syphilis/manual-1998/chapt8.pdf
- https://laboratoryinfo.com/vdrl/
- http://www.onlinebiologynotes.com/vdrl-test-princifle-procedure-result-interpretation-application/
- https://www.microrao.com/micronotes/vdr.pdf.
- https://www.healthline.com/health/vdrl-test#outlook.