大肠菌群是指所有需氧和兼性厌氧，革兰氏阴性，非孢子形成杆状细菌，在35°C 48小时内发酵乳糖与气体和酸形成。检测、列举和推定大肠菌群的程序用于检测食品和乳制品。一种进行大肠菌群推定试验的方法是紫红色胆汁琼脂(VRBA)。紫红胆汁琼脂(VRBA)是一种选择性培养基，用于检测和列举乳糖发酵大肠菌群微生物。
目录
作文的紫红胆脂(VRBA)
| 成分 | Gms /升 |
| 动物组织的消化性消化 | 7.000 |
| 酵母提取物 | 3.000 |
| 氯化钠 | 5.000 |
| 胆盐混合物 | 1.500 |
| 乳糖 | 10.00 |
| 中性红 | 0.030 |
| 结晶紫 | 0.002 |
| 琼脂 | 15.00 |
最终pH值(25°C): 7.4±0.2
的原则紫红胆脂(VRBA)
- 它依赖于选择性抑制成分结晶紫和胆盐以及指示系统乳糖和中性红的使用。
- 结晶紫和胆盐主要抑制革兰氏阳性菌群的生长。
- 乳糖降解为酸是由pH值指示中性红色(颜色变为红色)和胆汁酸沉淀指示的。
- 这样，许多不需要的有机体的生长就被抑制了，而需要的细菌则可以初步鉴定出来。
- 快速攻击乳糖的生物体产生紫色菌落，周围有紫色光晕。非发酵剂或晚期乳糖发酵剂产生带绿色带的苍白菌落。
红色，周围有淡红色降水带，直径1-2毫米乳糖阳性肠杆菌科:大肠菌群;大肠杆菌．
粉色针状菌落:Enterococci,可能克雷伯氏菌。
无色:Lactose-negative肠杆菌科
- 动物组织的消化性消化和酵母提取物是碳、氮、维生素和其他必需生长营养素的来源。
- 乳糖是可发酵的碳水化合物，利用它会产生酸。
- 中性红色指示剂检测形成的酸度。
- 结晶紫和胆盐混合物有助于抑制伴随的革兰氏阳性菌群和无关菌群。氯化钠维持渗透平衡。
VRBA的制备和使用方法
- 将41.53克悬浮在1000毫升蒸馏水中。
- 加热，搅拌至沸腾，使介质完全溶解。
注意:不要高压灭菌。 - 冷却至45°C，倒入含有接种物的无菌培养皿中。
- 将1毫升的测试样品转移到培养皿中。
- 加入10毫升紫红色胆汁琼脂(48°C)，旋转混合。
- 让培养基凝固，然后在35°C孵育18 - 24小时;乳制品使用32°C。
- 检查直径0.5 mm(或更大)的紫红色菌落，周围有胆汁酸沉淀区。
- 继续对典型生物体的菌落进行确认性测试。
紫红胆汁琼脂(VRBA)检测结果的解释
| 生物 | 增长 |
| 肠杆菌属aerogenes | 黏液，粉红色至粉红色 |
| 大肠杆菌 | 粉红色伴胆汁沉淀 |
| 沙门氏菌肠炎 | 无色至橙黄色 |
| 鼠伤寒沙门氏菌 | 公平有利于良好的增长;无色的殖民地 |
| 金黄色葡萄球菌 | 部分抑制到完全抑制 |
紫红色胆汁琼脂(VRBA)的应用
- VRBA用于分离、检测和枚举水、牛奶和其他乳制品和临床样本中的大肠杆菌产气细菌。
紫红胆汁琼脂(VRBA)的局限性
- 紫红胆汁琼脂并不完全针对肠道疾病;其他伴随的细菌也会产生同样的反应。
- 由于营养需求的不同，一些菌株可能会在这种培养基上生长不良或不能生长。
- VRBA可能对革兰氏阳性菌没有完全抑制作用，会生长除肠杆菌科成员以外的革兰氏阴性杆菌。进行革兰氏染色和生化测试以确定分离株。
- 煮沸介质超过2分钟会降低支持生长的能力。
- 建议对来自纯培养的菌落进行生化、免疫、分子或质谱检测以进行完全鉴定。
- 肠球菌可能会生长，如果是这样，通常会出现细小的大小和玫瑰色。
- 紫红胆汁琼脂不用于人类疾病或其他疾病的诊断。
参考文献
- http://www.himedialabs.com/TD/M049.pdf
- http://www.labm.com/products/violet-red-bile-agar-vrba.asp
- https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/Content/hugo/VioletRedBileAgar.htm
- https://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm062976.htm
- https://foodsafety.neogen.com/pdf/acumedia_pi/7165_pi.pdf
- https://www.humeau.com/media/blfa_files/TC_211695-Violet-Red-Bile-Agar_EN_110909.pdf