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VP测试的目的
区分两种主要类型的兼性厌氧肠道细菌基于中性产品的生产。
VP测试原理
VOGES PROSKauer测试，通常称为VP试验，用于确定一些生物体从葡萄糖发酵产生中性最终产品（例如，2,3-丁二醇或乙酰蛋白）的能力。Endmden-Meyerhof途径可以将肠杆菌菌的所有成员转化为丙酮酸转化为丙酮酸，但细菌可以通过两种不同的途径进一步代谢丙酮酸。通过混合酸途径代谢丙酮酸的生物将产生更多的酸终产物，例如乳酸和乙酸，并保持酸性环境。如果生物体产生大量的有机酸，包括葡萄糖发酵的甲酸，乙酸，乳酸和琥珀酸，加入甲基红色后，肉汤培养基将保持红色，pH指示剂。然而，Mr-阴性生物进一步通过脱羧剂来代谢初始发酵产物以产生中性乙酰甲基丙烯醇（丙酮蛋白），这导致培养基中的酸度降低，并将pH升高到中性（pH6.0或更高）。先生和VP测试同时进行，因为它们是生理相关的并且在MRVP肉汤上进行。
细菌发酵糖通过丁二醇途径产生乙酰丙酮(即乙酰甲醇或3-羟基丁酮)作为中间体，可进一步还原为2,3-丁二醇。
2丙酮酸=丙酮酸+ 2CO2
丙酮蛋白+ nadh + h+= 2,3-丁二醇+ NAD+
在KOH的存在下，中间的丙酮被氧化成双乙酰，这一反应是由α -萘酚催化的。在培养基中，二乙酰与蛋白胨提供的分子相结合的胍基反应，形成粉红色的产物。在巴瑞特对VP试验的改进中，α -萘酚作为一种颜色增强剂。
VP测试使用的介质
MRVP肉汤
缓冲蛋白胨7.0 gm / l，右旋糖5.0 gm / l，磷酸二钾5.0 gm / l，最终pH（在25°C）6.9±0.2
VP测试程序
- 用该微生物的纯培养物接种MRVP肉汤。
- 在35°-37°C环境空气中至少培养48小时。
- 加入6滴VP试剂I(α -萘酚)和2滴VP试剂II(40% KOH)。
- 观察肉汤中的颜色变化。
VP测试结果解释
积极的:深红色至宝石红色(红色)
消极的：颜色没有变化
VP测试的局限性
- Voges-Proskauer试验可用于革兰氏阴性菌的鉴定。建议使用纯培养进行额外的生化检测以进行完全鉴定。
- 由于乙酰甲基甲基甲醇的分解，延长孵育（35℃的35℃）的延长孵育（在35℃下）的某些VP阳性菌株导致假阴性反应。
- 试剂的加入顺序是非常重要的。顺序的颠倒可能导致微弱的阳性反应或假阴性反应。
- MR-VP试验应与其他验证性试验一起使用，以区分肠杆菌科中的微生物。
VP测试的质量控制
积极:副总裁肠杆菌属aerogenes(ATCC13048)
VP消极：大肠杆菌(ATCC25922)
参考
- Tille p.m. (2014)Bailey and Scott 's diagnostic microbiology, 13版，Mosby, Inc.， Elsevier Inc.的附属公司，3251 Riverport Lane，圣路易斯，密苏里州63043
- Aneja K.R(2003)，《微生物学实验，植物病理学和生物技术》第四修订版，New Age International (P) limited, Ansari road, Daryaganj，新德里-110002。
- 麦克德维特s . 2009。甲基红和voges-proskauer测试方案。http://www.asmscience.org/content/education/protocol/protocol.3204