鼠疫的选择性琼脂

• 鼠疫选择性琼脂最早由Schiemann提出，是麦康凯琼脂和其他常用培养基的替代品鼠疫enterocolitica，是肠胃炎的病原体。
• 鼠疫enterocolitica是一种重要的食物或水传播的肠道病原体，据报道曾在各种动物中引起腹泻、淋巴结病、肺炎和自然流产的流行病暴发。
• 鼠疫选择琼脂是一种支持水稻生长的选择性和差异培养基y enterocolitica和一些鼠疫spp。

图片来源:Biomerieux，热费希尔科学，卡尔罗斯，南方集团实验室，Toliopoulos诊断，默克公司．

耶尔森菌选择琼脂的组成

成分	Gms /升
蛋白胨、特殊	20.000
酵母提取物	2.000
甘露醇	20.000
丙酮酸钠	2.000
氯化钠	1.000
硫酸镁	0.010
钠脱氧胆酸盐	0.500
中性红	0.030
结晶紫	0.001
琼脂	12.500

最终pH(25°C): 7.4±0.2

注意:鼠疫选用琼脂与头孢磺啶、新生霉素进行分离鼠疫enterocolitica在实验室环境中。

耶尔森菌选择琼脂的原理

• 培养基区分甘露醇发酵菌和非发酵菌。
• 发酵甘露醇的微生物使培养基酸化，导致菌落周围的pH值局部下降。
• 在中性红色存在时，蜂群呈红色。由于局部pH值下降，也可能出现胆汁沉淀区。
• 甘露醇阴性的生物形成无色半透明的菌落。
• 该培养基是选择性的，由于脱氧胆酸钠和结晶紫的存在，抑制革兰氏阳性和一些革兰氏阴性细菌。
• 添加抗生素补充剂使其对耶尔森菌具有高度选择性。
• 典型的殖民地y enterocolitica会形成深红色的蜂群，类似于牛眼，通常被透明的边界包围。
• 菌落大小、光滑度和边界直径与中心直径的比值在不同血清型之间可能有所不同。
• 氯化钠维持介质的渗透平衡。丙酮酸钠和硫酸镁刺激生物生长。琼脂是固化剂。

耶尔森菌选择琼脂的制备及使用方法

1. 将29.02克悬浮在500毫升蒸馏水中。
2. 加热至沸腾，使介质完全溶解。
3. 在15磅压力(121°C)下用高压灭菌15分钟。
4. 冷却至45-50℃，无菌地添加1瓶耶尔森菌选择性补品的重组内容物，或无菌地添加10ml无菌水溶液，其中包含4mg头孢磺啶和2.5 mg新生霉素。
5. 倒入无菌培养皿前充分混合。
6. 在实验室收到样品后，尽快对其进行条纹检查。划线板主要用于从含有混合菌群的标本中分离纯培养物。
7. 或者，如果材料是直接从拭子中培养的，将拭子在边缘的一小块表面上滚动;然后从接种区划线。
8. 在22-32°C孵育24-48小时或将样品(食物、粪便等)悬浮在无菌磷酸盐缓冲盐水中，在4°C孵育21天(4)。
9. 定期传代样品上鼠疫用琼脂板按上述方法孵育。

结果耶尔森菌选择琼脂解释

鼠疫enterocolitica菌落呈半透明或半透明，中心呈深粉红色。菌落边缘完整或不规则。孵育48小时后，菌落呈深粉红色，边缘半透明，周围可能有胆汁沉淀区。非耶尔森菌的生长被标记为完全抑制。

生物	增长
鼠疫enterocolitica	半透明，中心呈深粉红色，有胆汁沉淀(牛眼菌落)
鼠疫的伪	生长中心呈深粉红色，有胆汁沉淀。殖民地周围没有透明区域。

耶尔森氏菌选择琼脂的使用

• 推荐用于选择性隔离和枚举鼠疫enterocolitica从临床样本和食物样本。
• 耶尔森氏菌选择琼脂也可用于其他耶尔森氏菌种的分离y enterocolitica,例如y伪。

耶尔森菌选择琼脂的局限性

• 沙雷氏菌属liquefaciens，枸橼酸杆菌属freundi和肠杆菌属agglomerans可能类似于y enterocolitica可以通过生化测试进一步确定
• 还应接种选择性较低的培养基，如麦康凯琼脂(并在35 +/- 2℃下孵育)，用于检测涉及感染的其他病原体。
• “冷浓缩”程序有时可能是必要的隔离鼠疫enterocolitica从粪便标本和食物等其他物质中提取。
• 生化和血清学确认是必要的，以完全鉴定可疑菌株。
• 鼠疫选择琼脂不打算用于诊断疾病或人类的其他条件。
• 由于营养差异，一些菌株可能会在这种培养基上生长不良或不能生长。还需要进一步的测试来确认鼠疫spp。
• 的增长弗雷氏耶尔森菌，克里斯滕森菌，假结核耶尔森菌和y媒介物在完全培养基上不受抑制。这些有机体的菌落必须加以区分y enterocolitica基于附加的特性。

参考文献

1. http://himedialabs.com/TD/M843.pdf
2. https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8992
3. http://www.oxoid.com/UK/blue/prod_detail/prod_detail.asp?pr=CM0653&cat=&c=UK&lang=EN
4. https://foodsafety.neogen.com/en/yersinia-selective-agar
5. https://foodsafety.neogen.com/pdf/acumedia_pi/7257_pi.pdf
6. http://www.oxoid.com/UK/blue/prod_detail/prod_detail.asp?pr=CM0653&cat=&c=UK&lang=EN