厌氧血琼脂

  • 厌氧血琼脂是一种固体培养基,推荐用于定性程序的初级分离和厌氧微生物的培养,包括挑剔的菌株。
  • 这种媒介是由佐治亚亚特兰大疾病控制和预防中心的V.R.道尔和T.M.霍金斯发明的。
  • 厌氧血琼脂支持挑剔和缓慢生长的厌氧菌良好的生长和典型的色素沉着,以及其他具有重要临床意义的厌氧菌。

厌氧血琼脂

厌氧血琼脂的组成

成分 Gms /升
酪蛋白水解酶 15.000
Papaic消化的大豆 5.000
酵母提取物 5.000
氯化钠 5.000
半胱氨酸 0.500
氯高铁血红素 0.005
琼脂 13.50

最后的pH值:7.4±0.2

厌氧血琼脂的原理

  • 厌氧血琼脂是一种营养的,非选择性的培养基,不仅可以培养挑剔的厌氧菌,而且还可以培养好氧菌微量需氧的微生物。
  • 它含有蛋白胨,为厌氧细菌的生长提供必需的氮物质和氨基酸。
  • 酵母提取物提供复合维生素b和作为生长促进剂。
  • 血红素、维生素K和羊血能刺激拟杆菌等厌氧菌的生长革兰氏阳性孢子载体,如梭状芽胞杆菌。
  • 氯化钠是必需电解质的来源,并维持渗透平衡。
  • 血液的补充提供了营养,并有助于区分溶血性生物。

厌氧血琼脂的制备及使用方法

  1. 将44.0克悬浮在1000ml蒸馏水中。
  2. 加热至沸腾,使介质完全溶解。
  3. 加入1瓶维生素K1溶液的再水化内容物。
  4. 在15磅压力(121°C)下用高压灭菌15分钟。
  5. 冷却至45 - 50°C。
  6. 无菌添加5% v/v无菌去纤维羊血。
  7. 充分混合后倒入无菌容器中佩特里盘子。
  8. 使用前,将平板置于室温厌氧环境中至少24小时。
  9. 标本在实验室收到后尽快接种在选择性和非选择性培养基上进行厌氧培养;用划线板隔离。
  10. 在33-37°C厌氧培养48-72小时。
  11. 通过传代培养确认厌氧生长厌氧血琼脂板。

结果厌氧血琼脂的解释

生物 增长
脆弱拟杆菌 植物生长茂盛
拟杆菌melaninogenicus 植物生长茂盛
消化链球菌属anaerobius 植物生长茂盛
perfringens梭状芽胞杆菌 生长,双区β溶血
梭菌属nucleatum 增长
普氏菌melaninogenica 经济增长;颜料(从棕褐色到棕色)
大肠杆菌 增长
金黄色葡萄球菌 增长

使用

  • 推荐使用厌氧血琼脂培养基培养厌氧的微生物,包括临床标本中非常挑剔的微生物。
  • 它促进了两种典型色素的形成拟杆菌melaningenicus并显示双溶血性反应perfringens梭状芽胞杆菌加入血液到培养基中。
  • 该介质支持典型的颜料生产色素普氏菌Porphyromonas

限制

  • 在使用前,必须在无氧条件下准备、分配和包装介质,以防止氧化产物的形成。
  • 厌氧血琼脂将不能提供完整的信息鉴定细菌分离。需要额外的测试程序和介质来进行完全的鉴定。
  • 临床标本接种选择性培养基如含卡那霉素和万古霉素的厌氧布鲁氏菌血琼脂和/或含苯乙醇的厌氧布鲁氏菌血琼脂,以保证所有物种的生长。

参考文献

  1. http://himedialabs.com/TD/M975A.pdf
  2. 道,小种内观浪漫。。T.M.霍金斯》1974。厌氧细菌学的实验室方法,CDC实验室手册。美国卫生与公众服务部和疾病预防控制中心,亚特兰大,乔治亚州。
  3. https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/LSG/manuals/IFU1040.pdf
  4. https://anaerobesystems.com/products/plated-media/anaerobe-blood-agar-cdc/
  5. https://www.fishersci.ca/shop/products/remel-anaerobic-blood-agar/p-4523658

对“厌氧血琼脂”的思考

  1. 这就跟你问声好!谢谢你提供的信息。我只是想知道如何创造厌氧培养条件。谢谢提前

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