目录
- 生物保护是保留细胞的完整性和功能的过程。
- 大多数细菌学实验室维持股票培养微生物的教育，研究，生物测定，工业或其他目的。
- 各种各样的技术可用于保存细菌，可能难以选择特定菌株的方法，这不仅可以确保存活率，而且还使得这种基因型和因此独特的特性不会改变。
- 培养保存的主要目的是维持生物体活着，未污染的，无需变异或突变，即，在与原始隔离物保持尽可能靠近的条件下保持培养物。
琼脂倾斜的文化
- 所有微生物学实验室都在琼脂倾斜上保留微生物。
- 琼脂倾斜被接种并孵育，直至出现良好的生长。
- 然后将无菌矿物油覆盖至倾斜表面尖端1cm的深度。
- 将倾斜孵育24小时或更高，然后储存在冰箱中。
- 这些培养物定期转移到新鲜媒体上。
- 通过去除充满生长的环路来进行转移，将环路触摸到玻璃表面以排出过量的油，接种新鲜培养基然后保持初始股票培养物。
- 随着转移的时间间隔而随着生长的起源和条件而变化。
- 这是一种简单而最经济的保存细菌和真菌的方法，在室温下，它们在几年内保持可行。
冷藏
- 纯培养物可以在冰箱或冷藏室成功储存在0-4°C。
- 该方法适用于短期短的持续时间（细菌2-3周，真菌3-4个月），因为微生物的代谢活性大大放缓但未停止。
- 因此，它们的生长缓慢，利用营养物和培养基释放的废物。这导致了，最后，有时候微生物死亡。
石蜡方法
- 这是一种维持细菌和真菌纯文化的简单和最经济的方法。
- 在该方法中，在培养的裂解（斜坡）上倒入的无菌液体石蜡并在室温下直立储存。
- 石蜡层确保厌氧条件并防止介质的脱水。
- 这种条件有助于微生物或纯培养物保持在休眠状态，因此，培养物保存了几年。
盐悬浮液
- 高浓度的氯化钠通常是细菌生长的抑制剂。
- 细菌悬浮在1％盐溶液中（螺旋帽管中的亚致死浓度以防止蒸发）。
- 管子在室温下储存。每当需要时，转移都在琼脂倾斜上进行。
冷冻保存
- 冷冻保存（即，在-196°C液氮中冷冻）有助于纯培养物存活长储存时间。
- 在该方法中，培养的微生物在-196℃下在稳定剂如甘油的存在下在-196℃下在液氮中快速冷冻，这防止形成冰晶并促进细胞存活。
冷冻干燥（冷冻干燥）
- 在该方法中，培养物在非常低温（约-70℃）下迅速冷冻，然后通过真空脱水。
- 在这些条件下，微生物细胞脱水，其代谢活性停止;结果，微生物进入休眠状态并保持活力多年。
- 冻干或冷冻干燥的纯培养物，然后在冰箱中在4℃下密封并储存在黑暗中。
- 冻干方法是文化收集中心最常用的技术。
冻干过程
- 在该过程中，微生物悬浮液置于小瓶中。
- 通过将干冰（固体二氧化碳）和醇的混合物旋转，或丙酮在-78的温度下旋转薄膜在小瓶的内表面上冷冻。O.C 。
- 小瓶立即连接到高真空线。这在仍然冷冻时干燥有机体。
- 最后，在具有小火焰的真空中密封了安瓿。
- 这些培养物可以在40°C下储存几年。
- 该方法还用于保存毒素，血清，酶和其他生物材料。
- 为了恢复微生物培养，仅需要无菌地打开小瓶，加入合适的陈旧介质，并在孵育后进一步转移。
- 该过程允许维持培养数量的培养数量，而不会变化培养的特征，大大降低了污染的危险。
在非常低温下保存
- 生物体悬浮在含有15％甘油的营养肉汤中。
- 将悬浮液冷冻并储存在-15°C至-30°C。
通过真空干燥的保存
- 生物体在真空中用氯化钙干燥并储存在冰箱中。
参考
- http://www.biologydiscussion.com/micro-biology/preserving-microbial-cultures-top-5-methods/17821
- http://www.biologydiscussion.com/microorganisms/culture-microorgans/maintanue-and-preservation-of-pure-cultores-4-methods/55037
- http://www.asmscience.org/content/book/10.1128/9781555817497.chap473
- https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9629607.
- gc11.ac.in/wp-content/uploads/2017/02/preservation-of-cultures.ppt.