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亮氨酸氨基肽酶(LAP)试验
客观的
对检测存在的亮氨酸氨基肽酶进行初步鉴定过氧化氢酶阴性,革兰氏阳性球菌,特别是非乙型溶血性球菌。
亮氨酸氨基肽酶(LAP)检测原理
亮氨酸氨基肽酶(LAP)试验是一种快速检测亮氨酸氨基肽酶的试验方法。一般来说,链球菌引起的肺炎而且酿脓链球菌,片球菌属,Lactococcus,肠球菌sps都是LAP阳性,而其他乙型溶血性链球菌,气球菌属sps而且明串珠菌属sps圈是负面的。以亮氨酸- β-萘丙胺浸渍盘为底物对亮氨酸氨基肽酶进行检测。LAP酶水解底物产生β-萘胺,在添加对二甲、氨基醛酸试剂后形成高可见的红色席夫碱。
LAP测试的程序
- 将LAP膜片无菌放置在无菌培养皿中,加热至室温。
- 用少量无菌蒸馏水湿润LAP磁盘。
- 用隔夜培养板上的几个菌落接种。
- 室温孵育5分钟
- 加入一滴肉桂醛试剂
- 观察硬盘颜色的变化
LAP检测结果
图片来源:Universe84a.com
积极的测试:在加入肉桂醛试剂后1分钟内显现出红色。
负面测试:颜色无变化或发展为微黄色。
LAP测试的局限性
- 测试结果取决于衬底浸渍盘的完整性。
- LAP试验常与PYR和其他生化试验结合使用,以帮助区分过氧化氢酶阴性、革兰氏阳性球菌。
质量控制
积极的:粪肠球菌(ATCC29212)
负面:草绿色气球菌属(ATCC11563)