快速血浆里根(RPR)试验

• 快速血浆反应(RPR)就像性病研究实验室(VDRL)试验梅毒是一种由螺旋体细菌引起的性传播感染，是否需要进行筛查测试梅毒螺旋体．
• 这是一种快速的非密螺旋体检测，在患者血液中寻找可能提示梅毒感染的非特异性抗体。
• 该测试并不寻找针对致病细菌本身的抗体，而是寻找抗体IgM而且免疫球蛋白对抗从受损的宿主细胞中释放的脂蛋白样物质t .螺旋体可能还有密螺旋体释放的心磷脂。这些抗体传统上被称为“雷根抗体”。
• 检测抗原由一种改良的性病研究实验室(VDRL)抗原悬液制备而成，其中含有氯化胆碱(消除了对血清的热灭活)、乙二胺四乙酸(EDTA)(增强了悬液的稳定性)和细粒炭颗粒作为显色剂。

RPR测试原理

快速血浆里根试验是一种宏观的、非密螺旋体絮凝卡试验，用于检测梅毒患者体内受损宿主细胞释放的抗原所产生的抗体。在测试中，RPR抗原与未加热或加热的血清或未加热的血浆混合在塑料涂层卡片上。用于检测的抗原除氯化胆碱、EDTA和木炭颗粒外，还含有0.03%的心磷脂、0.21%的卵磷脂和0.9%的胆固醇。如果抗体存在，它们会与抗原的脂质颗粒结合，使其凝集。木炭颗粒与抗体结合在一起，在白色卡片上形成黑色的团块。如果抗体不存在，测试混合物是均匀的灰色。

RPR测试要求

患者血清/血浆，RPR抗原悬液，对照血清样本，塑料涂层RPR卡，机械旋转器，移液器。

RPR测试程序

测试可以定性和定量地进行。定性试验反应性好的试验，再进行定量试验，以确定抗体滴度。

定性的方法

1. 将阳性和阴性对照的测试样品的1滴(50 μ l)移液到卡片的单独反应环上。
2. 一旦扩散顺利，一滴稀释的抗原悬液被添加到标本的测量体积中，阳性和阴性对照。抗原不扩散或移动。
3. 将卡片轻轻地放在自动旋转器上，以100±2转的转速连续旋转8分钟。
4. 在旋转之后，进行简短的手旋转和卡片的倾斜(三或四次来回运动)，以帮助区分无反应结果和最低反应结果。
5. 在高强度光源下对絮凝进行宏观检查。

定量方法

1. 将定性试验中粗略无反应结果的血清标本稀释至终点滴度。测试每个样品未稀释(1:1)，并在1:2,1:4,1:8，和1:16稀释。
2. 将50 μ l的0.9%盐水按编号为2至5的圆圈放置。不要喷洒生理盐水。
3. 用移液管将50µl的血清置于第1圈，50µl的血清置于第2圈。
4. 将盐水和血清在第2圈中混合，用移液管上下抽8次，避免产生气泡。
5. 从圆2(1:2)中取出50µl至圆3，混合。
6. 从第3个圆(1:4)中取出50 μ l至第4个圆，混合。
7. 将循环4(1:8)中50µl转移到循环5(1:16)中，混合，然后丢弃最后50µl。
8. 在每个循环中加入1滴自由落体抗原悬液(17 μ l)。不能混为一谈。
9. 将卡放在加湿盖下的旋转器上，以100±2rpm的转速旋转卡8分钟。
10. 立即将卡从旋转器中取出;用手简单地旋转和倾斜卡片(来回运动三或四次)
11. 如果测试的最高稀释度(1:16)是反应性的，继续如下:
    1. 在0.9%生理盐水中准备1:50稀释的无反应血清，用于对待测标本进行1:32或更高稀释。
    2. 将0.1ml血清加入1.5ml 0.9%生理盐水中，配制成1:16稀释剂。彻底混合。
    3. 将50 μ l的1:50无反应血清稀释液置于RPR卡的第2至第5圈。
    4. 使用一次性针尖的安全移液器，将1:16稀释液的50µl置于第1圈，50µl置于第2圈。
    5. 使用同一移液管和针尖，进行连续两次稀释。按照上述步骤完成测试。

RPR试验结果解释

积极的测试:检测圈中心或周边出现特征性抗原抗体团块(黑色)提示RPR检测阳性。

负面测试:抗原-抗体团块的缺失。表面粗糙，无聚集。

• 所有反应性血清均需连续稀释以估计抗体效价。滴定度报告为最高稀释度的倒数，显示阳性检测结果。
• 当对梅毒患者进行RPR定量卡检测时，重复标本中滴度上升4倍可能提示感染、再感染或治疗失败;早期梅毒治疗后滴度下降四倍通常表明治疗是充分的。

RPR测试的应用

1. 它主要用于梅毒感染的筛查试验。结合特异性抗体检测，RPR检测可确认活动性感染的诊断并开始治疗。
2. 梅毒筛查是妊娠检查的常规部分。
3. 如果正在治疗淋病等其他性传播疾病，感染艾滋病毒，或从事高风险性活动，也要进行梅毒检测。

RPR测试的优点

• RPR试验是一种有效的、易于执行和快速的筛选试验。
• 本手册备有套装供选购。
• 观察结果不使用显微镜。
• 除了梅毒筛查外，效价还可以用来跟踪疾病的发展和对治疗的反应。
• 以来,生物梅毒螺旋体由于梅毒不能在人工培养基中培养，因此通过RPR等血清学检测进行梅毒筛查就变得重要起来。
• 病人不需要有梅毒的症状，这个测试是准确的。它可以非常有效地检测梅毒患者没有症状。
• 由于这是一种非密螺旋体检测(非特异性检测)，它被用于检查梅毒和其他密螺旋体病、雅司病和平塔病。
• 比VDRL试验更有效的筛选。

RPR测试的局限性

• 在没有其他梅毒诊断证据的情况下，反应性非密螺旋体检测如RPR不能证实螺旋体感染。任何反应性RPR测试必须通过特征性或密螺旋体测试如TPHA、fas - abs测试来确认。
• 检测到的抗脂质体抗体不仅是梅毒和其他密螺旋体疾病产生的结果，而且也可能是对发生组织损伤的急慢性非密螺旋体疾病的反应产生的。
• RPR测试并不总是准确的。例如，如果一个人感染梅毒不到三个月，就可能出现假阴性结果，因为身体产生抗体可能需要很长时间。该测试在梅毒晚期也不可靠。
• 另一方面，假阳性结果可以在艾滋病毒、莱姆病、疟疾、肺炎、系统性红斑狼疮、静脉吸毒和结核病等疾病中看到。
• 梅毒感染产生的抗体可以在梅毒治疗后留在体内。
• 无反应的RPR卡试验与梅毒的临床证据可以看到早期原发性梅毒;在继发性梅毒中，由于prozone反应;在一些晚期梅毒病例中。
• RPR卡测试不能用于测试脊髓液。
• RPR卡检测可能对来自雅司病、平塔病或非性梅毒流行地区的人有反应。

参考文献

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