内脏利什曼病(黑热病)-原因，实验室诊断，治疗

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什么是内脏利什曼病(黑热病)?

内脏利什曼病有时被称为全身性利什曼病或黑热病。黑热病在亚洲也被称为黑热或达姆热。通常在被白蛉咬伤3至6个月后发生。它主要感染网状内皮系统。它损害内部器官，如脾脏和肝脏。它也会影响骨髓，以及免疫系统通过对这些器官的损伤。它是这种疾病最严重的形式，如果不及时治疗，通常是致命的。据估计，全世界每年发生5万至9万例VL新病例，只有25%至45%向世卫组织报告。它仍然是具有暴发和死亡潜力的主要寄生虫病之一。这种疾病是世界上第二大寄生虫杀手(仅次于疟疾)，估计每年在全世界造成20 000至30 000人死亡。

内脏利什曼病(黑热病)
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后黑热病真皮利什曼病(PKDL)

后黑热病真皮利什曼病(PKDL)通常是内脏利什曼病的一个后果，可能在内脏利什曼病治疗后1个月或数年后出现。在这种利什曼病中，寄生虫侵入皮肤，通常在面部、上臂、躯干和身体其他部位发展为黄斑、丘疹或结节状皮疹。据报道，5-10%的黑热病患者会发展成这种PkDL。它主要发生在东非和印度次大陆。PKDL没有生命威胁，但仍然被认为是潜在的利什曼虫感染。

内脏利什曼病的病因

  • 它是由利什曼虫donovani(印度和东非)，l . infantum(地中海地区)l . chagasi，由小型吸血白蛉叮咬传播Phlebotomus,而且Sergentomyia,旧世界的公共向量。
  • 因为传播新大陆疾病而臭名昭著的白蛉Lutzomyia。
  • 白蛉是一种非常小的昆虫，大约是小蚊子的三分之一大小，体长小于3.5毫米。
  • 它们不能承受脱水，因此在潮湿的气候中生长得很好。
  • 这些苍蝇是夜行性的，白天在洞穴、岩石或其他掩体下发现它们。
  • 雄性和雌性都从植物汁液中获取碳水化合物，雌性则需要血液。正是在这顿饭中，媒介蝇将原生动物传播给人类宿主。

内脏利什曼病(黑热病)的症状

  • 潜伏期为3至6个月，2年后可能出现症状。
  • 高危人群包括学龄前儿童和免疫功能低下和营养不良的人。
  • 最近，通过受污染的注射器，内脏利什曼病在艾滋病患者或静脉注射吸毒者或两者兼有的患者中发病率增加

症状包括:

早期的症状包括

  • 减肥,
  • 虚弱，持续数周或数月的发烧，
  • 脾脏肿大,
  • 贫血是由于血细胞的减少，
  • 出血,
  • 皮肤特别的变黑
  • 淋巴结肿大。

在t他先进的阶段,

  • 皮肤变得干燥、粗糙、变黑或着色。头发变得易碎并脱落。
  • 如果不治疗通常是致命的

内脏利什曼病(黑热病)的实验室诊断

黑热病的实验室诊断依赖于直接和间接证据。

直接的证据

1.显微镜

样品:

  • 在组织吸出物涂片中显示无象体是内脏利什曼病诊断的金标准。
  • 外周血样本,
  • 骨髓活检:通过胸骨或髂骨穿刺获得。
  • 脾抽吸:活检材料:经脾穿刺获得。
  • 淋巴结肿大
  • 吸出物涂片用利什曼染色剂、吉姆萨染色剂或赖特染色剂染色，以便通过显微镜检测寄生虫的无鞭毛体形式。
  • 为了准确诊断利什曼病，应在油浸渍下用光镜观察无鞭毛体。
  • 在巨噬细胞内可以看到无鞭毛体寄生虫，通常是大量的。一些细胞外的形式也可以
    被看到。
  • 巴菲的外套外周血可用于在显微镜下寻找寄生虫。棕黄色毛涂片呈日周期性，白天的阳性涂片多于夜间的阳性涂片。
  • 脾脏的愿望虽然有出血的风险，但它是诊断利什曼病最敏感的方法(95%)。
  • 骨髓活组织检查在大约三分之二的患者中显示无鞭毛体。
  • 淋巴结送气在诊断印度黑热病方面并不有用，尽管在其他一些国家在VL中使用了它。
  • 虽然特异性高，但显微技术的灵敏度各不相同，以高为特点脾(93%到99%)骨髓(53 - 86%)或lymph节点送气(53 - 65%)。
  • 这是内脏利什曼病的经典确认试验。

2.文化

  • 不同样本的血液，脾，或骨髓抽吸，组织培养在NNN培养基上。
  • 将材料接种到凝结水中，培养在22- 24°C培养1-4周。在每一个的结尾
    每周，在高功率物镜或相位对比照明下检查培养液中是否有孕体细胞。
  • 在阳性培养数天至4周后，显微镜下可观察到活动的原乳体。
  • 另一种双相培养基，如添加30%胎牛血清的施耐德果蝇组织培养基也可以使用。

3.动物接种

  • 这是一种非常敏感的方法。
  • 它不用于常规诊断。
  • 该方法是将该材料腹腔或皮内接种到中华金仓鼠的鼻子和脚的皮肤，并保存在23- 26°C。
  • 在阳性病例中，从溃疡或在接种部位形成的结节或脾脏中提取的涂片可显示无毛穗状体。

间接证据

1.检测抗原

  • 血清或其他体液中的抗原浓度很低。
  • ELISA而且聚合酶链反应已被开发用于检测利什曼原虫抗原。
  • 两种用于VL的尿液无创抗原检测试验正在评估中。
  • 它具有良好的特异性，但只有低至中等(48-87%)的敏感性。

2.检测的抗体

a.补体固定试验是第一个用于检测VL血清抗体的血清学试验。

从培养物中制备的特定利什曼氏抗原已用于若干试验以证明特定抗体。这些测试包括:

b.间接免疫荧光抗体试验(IFAT)

c.反免疫电泳(CIEP)

d。ELISA或免疫印迹使用整个寄生虫裂解物，在大多数研究中显示出较高的诊断准确性，但在现场环境中适应性较差。ELISA检测是高度敏感的(80-100%)，但特异性随所使用的抗原而变化，整个寄生虫裂解物的特异性从80-94%不等。

经过充分验证并在实地使用的两项测试是:

e.直接凝集试验

  • 广泛应用于诊断黑热病的血清学试验，以抗原-抗体反应为基础。
  • 抗原使用-胰蛋白酶处理，染色和福尔马林保存promastigotes。
  • 阳性反应- VL阳性患者特异性抗体凝集
  • 测试设置-室温
  • 它们的灵敏度或特异性不同，对电力、冰箱或设备齐全的实验室的要求，以及高昂的成本，都限制了其有效性。
  • 在各种研究中，DAT测定法已被发现具有91-100%的敏感性和72-100%的特异性。

f . rk 39检测试纸

  • 这是一种特异性、快速、无创的检查方法。
  • 利用重组利什曼氏抗原rk 39，建立了抗体免疫层析检测(ICT)方法l．infantum．该试验的敏感性为98%，特异性为90%。
  • rk 39抗体检测更有用，也更容易进行，是印度国家病媒传播疾病控制规划(NVBDCP)推荐的。
  • 结果可在5分钟内得到。
  • 该测试采用LCT或测尺格式，更适合于现场情况。

3.分子诊断

4.非特异性血清测试

a.纳皮尔醛试验

  • 在这种方法中，患者从一个小试管中取出1ml清血清，加入一滴福尔马林(40%甲醛)，摇匀，放在室温下的架子上。同时设置正常血清对照管。
  • 阳性反应是测试血清的凝胶化和浑浊，类似于3-30分钟内出现的凝固蛋清。
  • 在患病4个月或以上的患者中，约85%的患者出现阳性反应。
  • 皮肤利什曼病(CL)醛检测总是阴性。
  • 该测试的灵敏度较低，仅为34%
  • 该试验仅显示血清-球蛋白大幅增加，因此是非特异性的。

b.乔普拉锑试验

  • 方法是在德雷尔氏管中取0.2 mL用蒸馏水稀释1:10的血清，再淋上几滴4%的二乙胺尿素溶液。
  • 白色絮凝剂沉淀的形成表明试验结果为阳性。
  • 据说这种反应比醛测试更灵敏。
  • 这两种检测对其他几种疾病，如多发性骨髓瘤、肝硬化、肺结核、麻风病、血吸虫病、非洲锥虫病都有假阳性反应。

5.勒什曼宁皮肤试验(黑山试验)

  • 这是一种延迟超敏试验(DHT)。
  • 这是由南美洲的黑山最先发现的，因此以他的名字命名。
  • 0.1 mL灭活promastigote悬浮液(10^6水洗promastigote / mL)皮下注射于前臂背前腹侧。
  • 阳性结果是48-72小时后出现5毫米或以上的硬结和红斑。
  • 阳性结果表明之前接触过利什曼原虫。
  • 在非洲黑热病试验呈阳性，但在印度和地中海黑热病试验不阳性。
  • 在活动性黑热病患者中，该检测为阴性，通常在疾病治愈6-8周后变为阳性。
  • DTH检测在皮肤利什曼病的诊断中非常有用。
  • 它主要被用作流行病学工具，在建立急性VL的诊断方面作用不大。

6.血细胞计数

  • 全血细胞计数显示正常细胞性贫血和血小板减少。
  • 白细胞计数显示白细胞减少伴淋巴细胞和单核细胞相对增多。
  • 嗜酸性粒细胞缺失。在病程中，白细胞数量逐渐减少，降至1,000/mm3甚至更低。
  • 白细胞与红细胞的比例发生了很大的变化，可能在1:200到1:100之间(正常的1:750)。
  • 血清显示高丙种球蛋白血症和白蛋白与球蛋白比值的逆转。
  • 肝功能测试显示肝脏轻微升高

读也:

内脏利什曼病(黑热病)的治疗

  • 治疗利什曼病的决定取决于临床综合征和感染利什曼虫细菌，宿主的免疫状态，药物的可获得性和费用。
  • 黑热病对治疗的反应优于其他形式的VL。
  • 标准的治疗包括五价的锑化合物这是世界上大多数流行地区的首选药物，但在印度比哈尔邦存在对锑的耐药性，那里首选两性霉素-苯氧胆酸盐或米替福辛。
  • 五价的锑的化合物:两个五价锑
    (Sbv)制剂有:
    1.钠stibogluconate
    2.葡甲胺antimoniate剂量:每日剂量为20mg /kg，通过快速静脉(IV)输注或肌内(IM)注射，持续20-30天。大多数旧世界的治愈率超过90%，除了比哈尔邦(印度)，因为耐药性(治愈率36%)。
  • 其他药物包括两性霉素- b，脂质体两性霉素- b，帕罗霉素，千里福辛。
  • 预防

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