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蛋白质的热凝固试验定义
蛋白质的热凝固试验是一种生化试验用于确定蛋白质中如白蛋白和球蛋白的存在。蛋白质对热的反应是一种常见的现象。蛋白质的热凝固发生在两个阶段之一;变性和凝集，或变性蛋白以特定形式的分离。凝固蛋白在等电pH值下受热，蛋白质发生一系列变化;亚基或四元结构的解离，多肽链的解开，最终导致解开的多肽链相互纠缠在一起。象凝聚和絮凝这样的过程是蛋白质在变性过程中发生变化的表面可见的表现。
蛋白质的凝聚是一个不可逆的过程，在蛋白质的等电pH值时达到最大值。蛋白热凝是检测蛋白尿的一项重要临床试验。这是简单的和更少的时间。热凝固法可以对蛋白质进行定性和定量的测定。凝血的定量分析可以通过测量试管上形成的凝结物来进行。
蛋白质热凝固试验的目的
- 检测给定样品中蛋白质的存在。
- 检测在尿液样本中是否存在白蛋白、球蛋白和其他蛋白质
蛋白质热凝固试验原理
热凝试验的原理是蛋白质的结构由于热量和ph值的变化而发生变化。在酸性介质中加热蛋白质会导致蛋白质变性，因为蛋白质的三级和四级结构的某些键会断裂。然而，在可凝固蛋白质的情况下，当这些蛋白质在等电的pH值下加热时，多肽链就会展开并相互磨平，形成不可溶解的物质。形成的物质不会溶解回液体。凝血过程在等电点处最大，凝血物的质量随样品的粒径和蛋白质浓度的不同而不同。对于白蛋白和球蛋白的热凝试验，使用氯酚红调节样品的pH值至白蛋白的等电点。这个测试的试剂还含有乙酸，它有助于打破蛋白质分子中的肽键，促进凝固。
需求
试剂
- 氯酚红指示剂
- 1%醋酸
- 样本
所需的材料
- 试管
- 试管架
- 吸量管
蛋白质热凝固试验程序
- 大约三分之二的试管充满了给定的样本。
- 在试管中滴加1-2滴氯酚红指示剂，混合均匀。
- 当在试管中观察到紫色时，一滴一滴地加入1%的醋酸，直到颜色变为淡粉色。
- 然后，试管稍微倾斜，以便加热流体的上部。
- 观察试管中凝结物的形成。
蛋白质热凝试验结果与解释
- 积极的结果:热凝试验的阳性结果是在溶液的上部形成密集的凝结物。解决方案的较低部分作为一个控制。
- 负面结果:热凝试验的阴性结果表现为上层没有凝结物。这表明尿液中没有白蛋白和其他蛋白质。
蛋白质热凝固试验的用途
- 热凝试验用于检测尿液样本中是否存在白蛋白和球蛋白。由于在许多病理条件下都能观察到尿液中的白蛋白和球蛋白，通过这项试验可以确定它们的存在，这有助于疾病的诊断。
- 这种检测是检测尿液中蛋白质最常用的方法之一。
限制
- 在某些情况下，这种检测可能会给出尿液中可能存在的其他凝固蛋白的阳性结果。
- 溶液的pH值必须在样品中可能存在的蛋白质的等电pH值附近。
参考文献
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