表的内容
PYR测试的目的
- 测定生物产生l -吡咯烷酰基芳香酰胺酶的能力。
- 它有助于A群链球菌的推定鉴定(链球菌化脓性链球菌)和肠球菌通过l -吡咯烷酰基芳香酰胺酶的存在。
PYR测试原理
PYR是一种快速的检测方法,用于基于酶的活性鉴定a组-溶血性链球菌和肠球菌。吡咯烷酰芳基酰胺酶(PYR),又称吡咯烷酰氨基肽酶,是一种细菌酶,它将浸没在测试盘中的l -焦谷氨酸-β-萘胺水解,作为检测吡咯烷酰芳基酰胺酶的底物。底物水解得到-萘胺,与PYR试剂(对二甲氨基肉桂醛)结合形成明亮的粉红色到樱桃红色。检测方法可采用肉汤法或快速纸片法。
PYR测试程序
- 在接种前,用试剂级的水稍微湿润圆盘。
- 使用木质涂抹棒,将18至24小时纯培养的少量菌落涂抹在PYR圆盘的一小块区域上。
- 室温孵育2分钟。
- 加1滴检测试剂N,N -二甲基氨基甲酯醛。
- 1分钟内观察是否有红色
结果PYR检验解释
积极的测试:1分钟内呈现鲜红色
负面测试:颜色没有变化,也没有呈现出橙色或黄色
PYR测试的局限性
- 在长期储存期间从密封袋中取出PYR测试卡可能会导致保质期缩短。将卡片保存在密封的袋子里,直到可以使用为止。
- PYR可用于推测A组链球菌和D组肠球菌与其他链球菌分离。只有A组链球菌和D组肠球菌pyr阳性。其他链球菌呈阴性;然而,建议使用纯培养进行额外的检测,以完全鉴定,并可能是必要的,以分离a组链球菌(年代.化脓性链球菌)来自乙型溶血性肠球菌。
- 重要的是,首先要进行测试,以确定有机体是否在链球菌应进行革兰氏染色和过氧化氢酶试验,以确定有无革兰氏阳性、过氧化氢酶阴性球菌。水解胆汁酸蛋白的能力可能被用来推测D组肠球菌。
- 一些葡萄球菌,气球菌属,Lactococcus,最棒状杆菌属(Arcanobacterium)haemolyticum,以及一些肠杆菌科和其他革兰氏阴性杆菌,pyr也呈阳性。
- 如果磁盘或滤纸太湿,可能会导致假阴性检测。
- 虚弱,苍白的结果出现与磁盘测试金黄色葡萄球菌;阳性结果可能需要通过其他检测或试管PYR检测得到确认,这种检测可在商业快速识别试剂盒中获得。
- 如果选择培养基或试管生化琼脂作为接种物进行试验,可能会导致假阴性试验。
- 大肠杆菌和indole-positive普罗透斯从含有高色氨酸含量的培养基中获得的色氨酸可以产生蓝绿色显影,这被认为是阴性结果。
PYR检测的质量控制
粪肠球菌ATCC29212:积极
酿脓链球菌ATCC19615:积极
链球菌agalactiaeATCC10386:负
PYR测试参考文献
- Tille 2014点。贝利和斯科特的诊断微生物学。13版。Mosby, Inc.是Elsevier Inc. 3251 Riverport Lane的子公司。圣路易斯。密苏里州63043
- Snyder JW, Atlas RM。临床微生物学培养基手册。CRC出版社。泰勒和弗朗西斯集团,破碎之声公园大道NW 6000号,300室。佛罗里达州波卡拉顿33487-2742。
- 康普顿ST, Kania SA, Robertson AE, Lawhon SD, Jenkins SG, Westblade LF, Bemis DA。2017.吡咯烷酰基芳香酰胺酶活性的评价葡萄球菌delphini.J clinical Microbiol 55:859-864。https://doi.org/10.1128/JCM.02076-16。