表的内容
马松三色染色的定义
马松三色染色是一种组织学染色方法，用于选择性染色胶原蛋白、胶原纤维、纤维蛋白、肌肉和红细胞。它使用三种染色剂进行染色，因此被称为三色染色剂。这是韦格特苏木精，比布里希猩红酸碱溶液和苯胺蓝。
马松三色染色的目的
- 给拼贴纤维染色。
- 胶原蛋白染色。
- 角蛋白染色。
- 染色纤维蛋白。
- 染色肌肉纤维。
马松三色染色原理
通过使用这三种染色法，马松三色染色技术被用于检测皮肤、心脏、肌肉等组织中的胶原纤维。样品有福尔马林固定，石蜡包埋切片，或冷冻切片。韦格特氏苏木精，一种铁质苏木精染料被用来染色细胞核。这种染料耐酸性染色溶液脱色。Biebrich猩红酸浸出液染色所有酸性组织，如细胞质、肌肉和胶原蛋白。用磷钼酸或磷钨酸作为脱色剂，使比布里希猩红-酸杂色从胶原纤维中扩散出来。这会使肌肉细胞染成红色。苯胺蓝染色的胶原蛋白，沿着1%的醋酸，以显示组织切片的差异。胶原纤维染成蓝色，细胞核染成黑色，底色为红色。
读也:惠特利三色的染色
试剂和试剂准备
布安溶液(提高马松三色染色质量)
- 饱和苦味酸75毫升
- 40%甲醛25ml
- 冰醋酸5毫升
韦格特铁苏木精溶液
- 股票的解决方案
- 苏木精1克
- 95%的酒精100毫升
- 股票的解决方案B
- 29%氯化铁水4ml
- 蒸馏水95毫升
- 浓盐酸1ml
- 等量的原液A和B混合使用。该混合物仅稳定不超过3个月。
比布里希猩红酸富辛溶液
- 1%水比布里希猩红90ml
- 1%水溶液酸性富富酸10ml
- 冰乙酸1毫升
Phosphomolybdic-Phosphotungstic酸溶液
- 5%磷酸乳酸钠25ml
- 5%磷钨酸25ml
苯胺蓝溶液
- 苯胺蓝2.5克
- 冰醋酸2ml
- 蒸馏水100毫升
1%醋酸溶液
- 冰醋酸1ml
- 蒸馏水99毫升
马松三色染色程序
- 依次使用100%酒精、95%酒精和70%酒精进行脱蜡和补水。
- 用蒸馏水清洗。
- 用福尔马林固定的组织，在56℃Bouin溶液中重新固定1小时。这样可以改善污渍的质量。
- 用自来水冲洗5-10分钟，去除黄色。
- 用韦格特苏木精铁溶液染色10分钟。
- 用自来水冲洗污渍10分钟。
- 用蒸馏水清洗。
- 用贝布里希-猩红酸性溶液染色10-15分钟。
- 用蒸馏水清洗。
- 在磷钼磷钨酸溶液中分化10-15分钟或直至胶原蛋白失去红色。
- 将染色的部分转移到苯胺蓝溶液中，染色5-10分钟。
- 用蒸馏水冲洗染色部位，用1%的醋酸溶液浸泡2-5分钟。
- 用蒸馏水清洗。
- 用95%乙醇快速脱水。
- 明确在二甲苯。
- 用安装介质安装。
马松三色染色结果及解释
- 胶原纤维会染成蓝色。
- 细胞核染成黑色。
- 肌肉、细胞质和角蛋白染红。
- 背景染成了红色。
图A -大鼠气道马松三色染色。结缔组织染色为蓝色，细胞核染色为暗红色/紫色，细胞质染色为红色/粉红色。图B -用马松三色染色剂染色的小鼠皮肤。图片来源:维基百科．
应用程序
- 研究肌肉营养不良和其他肌肉病理
- 研究心脏感染和其他心脏病理
- 研究肝脏病理，如肝硬化
- 研究肾小球纤维化等肾脏病理
- 对肝、肾活检的肿瘤进行检测和分析。
优势
- 它可以用来测量和鉴别胶原蛋白沉积Hematoxylin-EosinY染色法。
- 与其他色斑相比，它能产生清晰的胶原纤维图像。
- 它比大多数染色技术更精确。
限制
- 原液必须在准备后24小时内使用。
- 染色必须谨慎进行，同时穿着防护服，以避免暴露在所使用试剂的腐蚀性中。
引用和来源
- https://agris.fao.org/agris-search/search.do?recordID=MY2016000018
- https://webpath.med.utah.edu/HISTHTML/MANUALS/MASSONS.PDF
- https://www.labce.com/spg531613_massons_trichrome_staining___chemistry.aspx
- http://www.ihcworld.com/_protocols/special_stains/masson_trichrome.htm
- https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/massons-trichrome-stain
- https://treat-nmd.org/wp-content/uploads/2016/08/cmd-MDC1A_M.1.2.003-67.pdf
- https://www.polysciences.com/default/catalog-products/life-sciences/histology-microscopy/staining-histology-cytology/dyes-and-stains-for-histology/massons-trichrome-stain-kit/
- https://en.wikipedia.org/wiki/Masson%27s_trichrome_stain